蚌埠市科技计划项目(201051)
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
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- 相关机构：蚌埠医学院蚌埠市中心医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金蚌埠市科技计划项目安徽省高校省级自然科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- pBIFC-VN173-CXCR4和pBIFC-VC155-NT21MP真核表达质粒的构建及其在活细胞内的作用被引量：2
- 2012年
- 目的:构建pBIFC-VN173-CXCR4和pBIFC-VC155-NT21MP真核表达质粒,利用双分子荧光互补(BiFC)技术,在活细胞内直接观察趋化因子受体4(chemokine receptor 4、CXCR4和CD184)与CXCR4抑制性多肽的相互作用。方法:应用化学合成法获得巨噬细胞炎症蛋白Ⅱ(viralmacrophage inflammatory protein-Ⅱ,vMIP-Ⅱ)N端21肽(N-terminal 21-mer peptide,NT21MP)编码的基因序列,克隆至经Kpn I和EcoRⅠ酶切的pBiFC-VC155中,筛选含有目标基因的正确克隆。利用RT-PCR扩增人乳腺癌细胞株SKBR3的CXCR4全长基因后,T-A亚克隆至经Kpn I和EcoRⅠ酶切的pBiFC-VN173载体中。然后,经酶切鉴定及DNA测序分析2个基因是否正确连接至真核表达载体中。应用脂质体转染的方法共转染pBiFC-VC155-NT21MP和pBiFC-VC155-CXCR4至细胞株COS-7中,在荧光显微镜下观察NT21MP与CXCR4在胞内的相互作用。结果:经DNA测序及同源性对比,证实pBiFC-VC155-NT21MP和pBiFC-VN173-CXCR4重组载体构建成功;基因片段与NCBI基因库vMIP-Ⅱ和CXCR4基因CDS序列同源性达99.9%。BiFC法观察NT21MP与CXCR4在细胞内结合出现的荧光信号,该信号分布细胞内。结论:本实验成功构建了应用BiFC技术的真核表达载体,并且在活细胞内检测到NT21MP与CXCR4的互相结合。
- 高艳军杨清玲陈昌杰丁勇兴
- 关键词：质粒
- CXCL12/CXCR4信号通路及其与肿瘤关系的研究进展被引量：1
- 2014年
- 趋化因子是一类结构相似，对某些细胞具有趋化作用的小分子蛋白质。趋化因子12（CXCL12）及其受体（CXCR4）在许多生理和病理过程中发挥重要作用，在肿瘤中通过几个不同途径使细胞内信号发生改变，能够促进肿瘤细胞增殖、运动、黏附、侵袭、转移和分泌等，影响着肿瘤的发生、发展和预后。本文就近年来CXCL12／CXCR4研究进展作一综述。
- 高艳军杨清玲陈昌杰
- 关键词：趋化因子肿瘤信号通路
