国家自然科学基金(31272205) 作品数:8 被引量:95 H指数:5 相关作者: 袁素霞 明军 徐雷锋 刘春 袁迎迎 更多>> 相关机构: 中国农业科学院蔬菜花卉研究所 阿坝藏族羌族自治州林业科学技术研究所 沈阳农业大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家科技支撑计划 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
百合愈伤组织的高效诱导及植株再生 建立百合高效愈伤组织的诱导及植株再生体系,可为建立其高效稳定的遗传转化及离体快繁体系奠定基础。以东方百合‘Sorbonne''''组培苗的叶柄和外层鳞片为外植体进行以下试验。(1)将外植体接种至添加不同浓度PIC(0.5... 徐雷锋 李雅男 袁迎迎 袁素霞 刘春 明军关键词:百合 愈伤诱导 植株再生 15个百合种和品种的食用性比较研究 百合是中国栽培历史悠久的食用、药用、观赏多用途植物,具有重要的药食保健作用。但是,传统、规模化栽培的食用百合仅有川百合(Lilium davidii Duchartre)、兰州百合(Lilium davidii var.... 李玉帆 明军 刘新艳 王良桂 袁素霞 刘春 王莹 徐雷锋 袁迎迎关键词:食用百合 食品感官评价 活性物质 依据ABC1基因家族研究进程探讨其在高等植物中功能研究的策略 ABC1家族属于蛋白质激酶家族,其成员普遍存在于原核和真核生物中,因其能够抑制细胞色素bmRNA翻译的缺陷以及维持线粒体呼吸链中bc1复合体的活性而得名。进化分析表明,该家族最早起源于古细菌、细菌及真核生物分离之前的祖先... 袁迎迎 李雅男 梁云 冯慧颖 徐雷锋 袁素霞 刘春 明军关键词:进化 基因功能 结构域 文献传递 百合杂交子代真实性鉴定研究进展 杂交育种是百合新品种选育的主要方式,但杂交育种所获得的子代,尤其是通过胚拯救获得的子代并非都是真实的杂种后代,所以在早期,及时、准确地鉴定杂种子一代的真实性,对加快百合新品种的选育具有重要的意义。本文综述了国内外在百合杂... 李雅男 袁迎迎 粱云 冯慧颖 徐雷锋 袁素霞 刘春 明军关键词:百合 杂种鉴定 形态学鉴定 分子标记鉴定 文献传递 百合甘油-3-磷酸酰基转移酶(GPAT)基因密码子偏性分析及其表达受体选择 被引量:5 2014年 本研究运用CodonW和Emboss中的CHIPS、CUSP软件程序对铁炮百合(Lilium longiflorum)、亚洲百合杂种系品种(Lilium‘Excite’)、王百合(Lilium regale)和毛百合(Lilium pensylvanicum)这4种百合GPAT基因(GenBank登录号分别为:JX524738,JX524739,JX524740和JX524741)密码子进行偏好性分析,分别与5种单子叶和6种双子叶植物的GPAT基因密码子偏好性进行比较与系统进化分析,又与4种常用模式生物基因组密码子的偏好性进行比较分析。结果表明,4种百合GPAT基因密码子偏性均较弱,基因表达水平较低,偏好于以A/T结尾的密码子;偏好密码子基本相同。在一定程度上表明,百合的GPAT基因在属间进化中比较保守。并且发现,GPAT密码子偏好性在单、双子叶植物上体现的差异并不显著,从一定程度上表明GPAT基因在进化上的保守性较高。百合GPAT基因密码子偏性与几种双子叶植物的更相近,某些双子叶植物也是该基因的适宜导入受体。在系统进化分析中,基于相对同义密码子使用度(RSCU)的聚类结果与基于CDS构成的聚类结果存在一定的差异,但均可在一定程度上反映物种间的进化关系。与4种模式生物密码子使用频率比较发现,4种百合与受体生物的差异情况比较一致,百合GPAT的密码子偏好性与受体生物酵母和大肠杆菌的基因组密码子偏好性均有较大的不同,表明需要对百合GPAT基因的部分密码子进行优化改造,才能使其在以上受体中高效的表达。百合GPAT与拟南芥基因组密码子使用频率差值较少,表明百合GPAT在拟南芥受体中的表达效率较高;而百合GPAT在烟草受体中的表达效率一般。对于转化植物的选择,拟南芥优于烟草。为准确预测百合GPAT基因的异源表达,为接下来选择其适宜的表达系统以及提高该基因在受体表达系统中的表达效率,进行有效的功能验证提供了有效的参考。 冯慧颖 梁云 徐雷锋 袁迎迎 袁素霞 刘春 明军 陈丽静关键词:百合 密码子偏性 系统进化关系 超声波辅助农杆菌介导的百合遗传转化 本研究以东方百合‘索邦’组培苗的鳞片为外植体,进行不同处理时间的超声波处理,并统计鳞片共培养后GUS基因的瞬时表达情况。结果表明:在超声波处理农杆菌侵染的条件下,鳞片在40Hz、100W条件下处理1.0min,GUS基因... 徐雷锋 冯慧颖 梁云 袁迎迎 李雅男 袁素霞 刘春 明军关键词:百合 文献传递 Virus-induced Phytoene Desaturase(PDS) Gene Silencing Using Tobacco Rattle Virus in Lilium × formolongi 被引量:7 2019年 Gene function analysis is challenging for Lilium due to the lack of an efficient method for stable genetic transformation. Virus-induced gene silencing(VIGS) is an attractive tool for determining gene function in plants. This study reported that Tobacco rattle virus(TRV)-based VIGS of a PHYTOENE DESATURASE(PDS) ortholog(LhPDS) can be achieved in Lilium × formolongi seedlings, with a survival rate of 92%, using the inoculation method of rubbing plus injection. Compared with untreated and mock-treated seedlings, the photobleached leaf phenotype of silenced plants significantly correlates with down-regulation of endogenous LhPDS(P ≤ 0.05). In addition, the silencing phenomenon can be observed in the growing points of plants, indicating that systemic viral infection was achieved using the protocol. The results indicate that TRV-based VIGS can be used to characterize gene function in Lilium × formolongi. This work lays the foundation for gene function analysis and molecular breeding in Lilium spp. Hua Xu Leifeng Xu Panpan Yang Yuwei Cao Yuchao Tang Guoren He Suxia Yuan Jingyi Lei Jun Ming关键词:LILIUM SEEDLING VIGS PDS 利用荧光标记SSR构建百合种质资源分子身份证 被引量:50 2014年 以96份百合种质资源为材料,使用SSR标记进行百合种质分子身份证构建试验。从172对百合SSR引物中筛选出20对多态性好的核心引物,采用四重荧光毛细管电泳技术检测扩增条带分子量的方法对百合资源进行标记分析,获得供试样品相应的扩增带型。采用个位数字和小写英文字母对不同带型进行编码,按照20对引物扩增带型数由少到多顺序串联排序的方式构建供试样品的分子身份证。结果显示:20对SSR引物共检测到69个SSR等位位点和170个带型,平均每对引物对品种扩增的等位位点3.45个,带型8.50个。对带型进行编码的结果表明:96份百合种质资源的SSR分子身份证互不相同,可以将材料完全区分开。 徐雷锋 葛亮 袁素霞 任君芳 袁迎迎 李雅男 刘春 明军关键词:百合 种质资源 SSR荧光标记 分子身份证 岷江百合蛋白激酶基因lilyABC1的克隆及在非生物胁迫下的表达特性分析 被引量:6 2014年 以野生型岷江百合(Lilium regale Wilson)为材料,克隆岷江百合蛋白激酶基因lily ABC1,分析其在非生物胁迫下的表达特性,为百合抗逆育种提供候选基因。结果表明:lily ABC1基因全长c DNA序列为2 333 bp,其开放阅读框(ORF)为2 007 bp。该基因编码668个氨基酸,预测lily ABC1蛋白分子量为74.84 k D,等电点为5.46,含有一个高度保守的结构域——STYKc。lily ABC1基因在岷江百合的叶片、鳞片、花蕾组织中均有表达,表达量依次为叶>花蕾>鳞片,其中不同时期的花蕾中的表达量基本一致。lily ABC1的表达受到Na Cl、低温、高温以及黑暗胁迫的诱导,对PEG-6000的模拟干旱处理不敏感,表明lily ABC1基因可能对岷江百合适应高盐、低温和黑暗等非生物胁迫具有一定作用。 袁迎迎 梁云 袁素霞 徐雷锋 李雅男 Younes Pourbeyrami Hir 刘春 明军关键词:岷江百合 LILY 基因克隆 非生物胁迫 RNAi介导的百合抗CMV和LMoV的载体构建 2016年 为获得高效的RNAi(RNA interference)表达载体,培育百合抗病毒新种质,选取感病百合叶片为试验材料,同源序列比对后选取CMV 2b基因271 bp和LMo V cp基因428 bp作为靶基因片段。首先采用RT-PCR方法对感病植株进行病毒检测,确定其带有CMV和LMo V病毒;之后提取感病植株叶片总RNA,反转录得到c DNA,设计带有不同酶切位点的引物,以反转录得到的c DNA为模板,PCR扩增获得目的片段,产物回收纯化后,转化大肠杆菌,重组克隆。将各自的反向片段、正向片段顺次连接到载体p FGC5941上,经多次双酶切、连接、转化后,采用冻融法将构建好的载体转入农杆菌EHA105并进行重组鉴定。酶切结果表明已成功构建了分别抗CMV、LMo V的RNAi植物表达载体p FGC5941-C2和p FGC5941-L2,PCR扩增结果表明表达载体已成功转入农杆菌中。所构建的载体及获得的工程菌与预期的完全一致,获得含载体的农杆菌可以直接应用于百合转基因抗病毒育种工程中。 冯亚言 冯慧颖 徐雷锋 杨盼盼 李雅男 袁素霞 明军关键词:CMV RNAI 植物表达载体 农杆菌转化