江苏省高校自然科学研究项目(08KJA350001) 作品数:11 被引量:39 H指数:4 相关作者: 蒋继宏 陈永强 袁博 陈先晖 鞠秀云 更多>> 相关机构: 徐州师范大学 安徽师范大学 中国矿业大学 更多>> 发文基金: 江苏省高校自然科学研究项目 国家高技术研究发展计划 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 轻工技术与工程 更多>>
野葛内生真菌的分离、鉴定及体外细胞毒活性 2012年 目的:药用植物内生真菌是一类重要的微生物资源,其代谢产物有着广泛的生物学活性。该研究拟从野葛(Pueraria lobata(Willd.)Ohwi)中分离有细胞毒活性的内生真菌。方法:组织块改良法分离内生真菌;细胞毒活性测定采用Alamar blue法;结合形态学和分子生物学方法进行菌种鉴定。结果:获得的34株内生真菌中菌株KLBMP f0027对HepG2、HO-8910、NCI-H460、SGC-7901等细胞株均有显著活性,ID50分别为437.4、460.0、542.5、771.2。而且活性产物相对稳定,对温度、pH变化及蛋白酶不敏感。代谢过程研究显示菌株KLBMP f0027的活性产物合成与细胞生长属于部分耦联关系类型。形态学和ITS-rDNA序列分析鉴定菌株为Aspergillus ostianus strain KLBMP f0027。结论:野葛内生真菌A.ostianus strain KLBMP f0027可作为细胞毒活性候选菌株进行深入研究。 曹成亮 曹小迎 陈永强 郑竹君 秦盛 蒋继宏关键词:野葛 内生真菌 细胞毒活性 系统发育分析 声磁发生器结合响应曲面优化平盖灵芝提取工艺的研究 被引量:4 2010年 目的:用中药快速声磁发生器对平盖灵芝进行提取。方法及结果:通过正交实验设计结合响应面方程分析了声磁发生器的超声功率、磁化强度、提取时间和提取剂乙醇体积分数对响应值(浸膏得率)的影响,得到的优化工艺参数为声磁发生器的超声强度26.6 KHz、磁场强度为1 252.50 GS、提取时间40 min和乙醇体积分数70%。在此提取条件下浸膏得率可以达到11.86%。结论:研究表明中药快速声磁发生器是非常有效的中药快速提取实验装置。 马捷琼 袁博 刘缠民 秦志宏 蒋继宏20种多孔类真菌乙醇提取物体外抗氧化和抗肿瘤活性的比较研究 被引量:4 2011年 采用清除DPPH自由基的方法和Alamar Blue法比较20种多孔类真菌乙醇提取物抗氧化活性和对3株癌细胞体外增殖的影响,对它们的子实体和菌丝体乙醇提取物进行测定。结果表明:20种多孔菌子实体乙醇提取物清除自由基和抗肿瘤活性大部分都强于菌丝体乙醇提取物,其中有10株多孔类真菌子实体乙醇提取物质量浓度在5mg/mL时,自由基清除率超过70%;质量浓度在500μg/mL时,对人非小肺癌细胞NCI-H460和人肝癌细胞HepG2两株癌细胞抑制率在90%左右,而对耐药细胞株Bel-7402/5-Fu抑制率略低于正常细胞株。 陈永强 陈先晖 孙勇 缪倩 王力 蒋继宏关键词:多孔菌 抗氧化 DPPH自由基 抗肿瘤活性 斑嗜蓝孢孔菌弱极性成分GC-MS分析 被引量:1 2011年 目的:采用GC-MS法对斑嗜蓝孢孔菌弱极性成分进行分析。方法:使用乙醇提取、石油醚淋洗的方法获得嗜蓝孢孔菌弱极性成分,利用气相色谱-质谱法分离并分析其化学成分,采用GC峰面积归一化法处理得到各组分百分含量。结果:鉴定出29种成分,其成分最多的是甾类和萜类化合物,含量较丰富的有酒酵母甾醇、麦角甾醇、麦角甾-7,22-二烯-3β-醇、麦角甾-7、22-二烯-3-酮、麦角甾-5,24(28)-二烯-3β-醇、菌甾醇、谷甾醇、羊毛甾醇、羽扇豆烯酮、麦角甾-4,6,8(14),22-四烯-3-酮、羽扇醇和白桦脂醇等。结论:本测定结果为研究斑嗜蓝孢孔菌的药效与化学成分的相关性提供了一定的研究基础。 朱峰 袁博 黄天姿 冯友建 蒋继宏关键词:气相色谱-质谱法 化学成分 桦褐孔菌原生质体制备与再生 被引量:4 2011年 研究桦褐孔菌原生质体制备与再生条件。采用正交试验法确定复合酶比例,用单因素试验测定不同等渗液、酶解时间、桦褐孔菌菌龄、酶解温度、再生培养基对桦褐孔菌原生质体制备与再生的影响。结果表明:混合酶(纤维素酶5mg/mL、蜗牛酶15mg/mL、溶壁酶15mg/mL、崩溃酶15mg/mL)、菌龄为7d的菌丝,采用0.6mol/LMgSO4为渗透压稳定液,酶解温度35℃,酶解时间5.5h,有利于原生质体的制备。就原生质体再生而言,酶解时间为3.5h制得的原生质体,以MgSO4作为渗透压稳定液,以完全再生培养基(CYM)和麦芽酵母葡萄糖再生培养基(GYM)有利于原生质体再生,再生率最高为0.13%。 孙勇 曹小迎 陈永强 缪倩 蒋继宏关键词:桦褐孔菌 原生质体 正交试验 斑点嗜蓝孢孔菌化学成分、生物活性及水提物荧光猝灭研究 被引量:4 2011年 对斑点嗜蓝孢孔菌乙醇提取物进行分级萃取,利用柱层析技术得到6个单体化合物。经核磁数据比对为β-谷甾醇(1)、麦角甾醇(2)、麦角甾-7,22-二烯-3β-醇(3)、5,8-过氧麦角甾-6,22-二烯-3β-醇(4)、3-乙酰齐墩果酸(5)、白桦脂醇(6)。采用Alamar Blue法检测各有机相及单体化合物对NCI-H460人非小细胞肺癌细胞增殖的影响,用DPPH自由基清除法检测其抗氧化活性。利用荧光光谱及紫外-可见光光谱研究方法在模拟人体生理条件下,研究了斑点嗜蓝孢孔菌水提物与人纤维蛋白原的相互作用,实验结果表明,斑点嗜蓝孢孔菌水提物与人纤维蛋白原的相互形成基态复合物导致人纤维蛋白原内源荧光猝灭。 袁博 朱峰 陈永强 黄天姿 鞠秀云 王力 冯友建 蒋继宏关键词:化学成分 抗肿瘤活性 抗氧化活性 荧光猝灭 响应曲面法优化超声波提取红缘拟层孔菌总三萜工艺 被引量:9 2010年 采用响应面法对超声提取红缘拟层孔菌总三萜的工艺进行优化,在对温度、液料比、超声时间和超声功率单因素试验的基础之上,根据中心组合设计原理采用四因素三水平的响应曲面分析法,通过建立数学模型对各因素显著性和交互性的作用分析,得到了超声提取红缘拟层孔菌总三萜的最佳工艺条件为提取溶剂95%乙醇、提取温度70℃、液料比26:1(mL/g)、超声时间39min、超声功率450W,此时总三萜的实际提取率为9.79%。 陈先晖 袁博 鞠秀云 蒋继宏关键词:响应曲面 超声波提取 总三萜 红缘拟层孔菌醇提物弱极性成分分析及抗肿瘤、抗氧化活性 被引量:5 2011年 用石油醚淋洗红缘拟层孔菌醇提物得到弱极性组分,采用气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术分析其成分;用Alamar Blue法检测其对NCI-H460人非小细胞肺癌细胞增殖的影响;用DPPH自由基清除法检测其抗氧化活性。从红缘拟层孔菌醇提物弱极性成分中鉴定出26种化合物,主要成分为麦角甾醇类、羊毛甾醇类和脂肪酸及酯类,其中含量最高的为麦角甾-7,22-二烯-3-醇(12.47%)和麦角甾醇(11.548%)。红缘拟层孔菌醇提物弱极性成分在100μg/mL时对NCI-H460肿瘤细胞的抑制率为95.93%,在20 mg/mL浓度时,其DPPH自由基清除率为95.0%。结果表明红缘拟层孔菌醇提物弱极性成分具有一定的抗肿瘤活性和抗氧化活性。 陈先晖 闫浩 戈群妹 尹婷 周敏 蒋继宏关键词:抗肿瘤细胞 抗氧化 木蹄层孔菌石油醚组分的成分分析及抗肿瘤活性研究 被引量:5 2011年 目的:分析木蹄层孔菌(Fomes fomentarius)石油醚组分中甾醇和三萜类等成分及其主要抗肿瘤活性物质。方法:采用95%乙醇回流提取法及拌硅胶淋洗方法得到木蹄层孔菌的石油醚组分。用气相色谱-质谱联用技术对石油醚组分甾体和三萜类成分进行分析和鉴定并计算出其含量。用硅胶柱色谱法分离纯化含量最高的7,22-二烯麦角甾-3-酮。采用Alamar Blue法进行体外抗肿瘤活性检测。结果:从木蹄层孔菌石油醚组分中检测出37个成分,鉴定了其中的35个成分,包括10种甾体和三萜类成分。其主要成分为:7,22-二烯麦角甾-3-酮(37.67%)和5,24(28)-二烯麦角甾-3-醇(27.01%)。石油醚组分对细胞株NCI-H460的IC50为75μg.mL-1,7,22-二烯麦角甾-3-酮对细胞株NCI-H460的IC50为30μg.mL-1,抗肿瘤活性与单体浓度存在明显的量效关系。结论:木蹄层孔菌石油醚组分主要成分为7,22-二烯麦角甾-3-酮和5,24(28)-二烯麦角甾-3-醇,抗肿瘤活性物质最高的为7,22-二烯麦角甾-3-酮。研究结果为木蹄层孔菌的进一步开发提供了依据。 杜德尧 陈永强 陈先晖 王力 冯友建 蒋继宏关键词:甾醇 NCI-H460 气相色谱-质谱联用 核磁共振 白灵侧耳纤溶酶的纯化及酶学性质分析 被引量:5 2010年 白灵侧耳子实体浸提液经过硫酸铵沉淀、DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子交换层析、凝胶过滤层析和羟基磷灰石色谱柱层析后,纯化得到一种纤溶酶。该酶在SDS-PAGE中显单条带,其分子量约为30kDa。该酶在45℃以下,pH6.5-10.0的范围内稳定,最适pH为8.0,最适温度为25℃。金属离子K+对该酶有明显的激活作用,Zn2+、Mg2+、Cu2+对酶有部分抑制作用。金属离子鳌合剂EDTA和丝氨酸蛋白酶抑制剂PMSF不抑制该酶活性,初步说明此酶既不是金属酶,也不是丝氨酸类蛋白酶。该酶既具有纤溶酶作用,又具有激活纤溶酶原的作用。 鞠秀云 曹成亮 蒋继宏关键词:纤溶活性 酶学特性