国家自然科学基金(81072472)
- 作品数:2 被引量:9H指数:2
- 相关作者:庄国洪杨晶晶张晶罗芳洪刘彬更多>>
- 相关机构:厦门大学厦门市第二医院生物技术有限公司更多>>
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- 相关领域:医药卫生更多>>
- 羟乙基壳聚糖抗人死亡受体5单链抗体纳米粒的制备、鉴定及体内抑瘤研究被引量:6
- 2012年
- 目的为提高抗人死亡受体5单链抗体治疗肝癌的效果,探讨羟乙基壳聚糖抗人死亡受体5单链抗体纳米粒(GCS-aDR5ScFv)的制备、鉴定并研究其对小鼠肝癌H22模型的治疗效果及机制。方法用亲和镍柱层析法纯化抗人死亡受体5单链抗体(aDR5ScFv),采用离子凝胶法制备GCS-aDR5ScFv,应用扫描电镜来检测GCS-aDR5ScFv的外观形态,激光粒度分析仪分析纳米粒的粒径及粒径分布,并检测其表面Zeta电势。建立小鼠肝癌H22模型,用0.272 mg/ml GCS-aDR5ScFv隔天治疗并测量小鼠体质量及肿瘤大小,治疗2周。通过Western blot检测active-caspase8、active-caspase3及BAX表达。结果纯化的aDR5ScFv符合理论条带(Mr30 000),GCS-aDR5ScFv纳米粒形态均一,纳米粒径大小、Zeta电势和多分散指数表明GCS-aDR5ScFv稳定。与正常组相比,治疗组小鼠体质量显著差异,治疗组肿瘤体积和大小差异显著。Western blot检测active-caspase8、active-caspase3、BAX的表达水平上调。结论本研究制备的GCS-aDR5ScFv稳定,对小鼠肝癌H22模型具有抑瘤作用,其机制可能与active-caspase8、active-caspase3及BAX蛋白表达上调相关。
- 黄小平张晶张敏萍刘彬杨晶晶闻强罗芳洪庄国洪
- 关键词:H22抑瘤作用
- TIPE2过表达质粒转染大鼠佐剂型关节炎滑膜成纤维样细胞及分析被引量:3
- 2013年
- 目的:通过TIPE2表达质粒转染大鼠佐剂型关节炎(AA)成纤维样滑膜细胞(FLS),体外研究AA的发病中TIPE2对DR5介导细胞凋亡的作用。方法:应用MIGR1/TIPE2+/+表达质粒,经脂质体法导入AA-FLS细胞中,转染72小时后,荧光显微镜检测质粒自带GFP基因的表达情况确认转染效率,以未作处理的AA-FLS为对照组,用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测TIPE2 mRNA的表达,用Western blot法检测TIPE2蛋白的表达变化,MTT法以及流式细胞术检测抗DR5功能性单链抗体ZF1对两组细胞生长的影响。结果:成功获得荧光强度90%的TIPE2过表达AA-FLS细胞,TIPE2 mRNA及蛋白表达显著提高。抗DR5单链抗体ZF1对TIPE2+/+的FLS组细胞具有明显生长抑制及凋亡诱导作用,与不作处理的FLS组相比差异显著。结论:TIPE2+/+表达质粒明显提升AA-FLS的TIPE2蛋白表达水平,TIPE2对DR5介导细胞凋亡有重要作用。
- 石春燕何琼杨晶晶庄国洪
- 关键词:佐剂型关节炎成纤维样滑膜细胞DR5