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吉林省卫生厅科研基金(20092081)

作品数：1 被引量：2H指数：1
相关作者：张玉成吴玫王姣琦高娴绯杜珍武更多>>
相关机构：吉林大学中日联谊医院更多>>
发文基金：吉林省卫生厅科研基金更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇杀伤
  • 1篇杀伤敏感性
  • 1篇肿瘤
  • 1篇肿瘤药
  • 1篇细胞
  • 1篇敏感性
  • 1篇抗肿瘤
  • 1篇抗肿瘤药
  • 1篇化疗
  • 1篇化疗药
  • 1篇化疗药物
  • 1篇基因
  • 1篇基因,BCL...
  • 1篇基因沉默
  • 1篇A549细胞
  • 1篇沉默

机构

  • 1篇吉林大学中日...

作者

  • 1篇张桂珍
  • 1篇杜珍武
  • 1篇高娴绯
  • 1篇王姣琦
  • 1篇吴玫
  • 1篇张玉成

传媒

  • 1篇中华结核和呼...

年份

  • 1篇2013
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
Bcl-2基因沉默对A549细胞化疗药物杀伤敏感性的影响被引量：2
2013年
目的探讨抑制Bcl-2基因表达对人肺癌A549细胞化疗药物杀伤敏感性及其相关基因mRNA表达的影响。为进一步提高非小细胞肺癌（NSCLC）化疗疗效提供实验依据。方法构建靶向人Bcl-2基因的微小RNA重组质粒，并转染至A549细胞，设稳定转染的实验组、阴性对照质粒组和空白对照组，运用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）琼脂糖凝胶电泳、实时荧光定量PCR和蛋白质免疫印迹法（Westernblot）检测转染细胞中Bcl-2mRNA转录和蛋白的表达水平，四甲基偶氮唑蓝（MTT）法和流式细胞术分析转染后细胞的增殖和周期变化。MTT法检测干扰后A549细胞对依托泊苷、5-氟尿嘧啶、顺铂、阿霉素、长春新碱、紫杉醇及长春瑞滨等7种化疗药物敏感性的变化。应用RT-PCR及实时荧光定量PCR方法进行核苷酸切除修复交叉互补基因1（ERCC1）、胸腺嘧啶合成酶（TYMS）、Ⅲ型β-微管蛋白（Class Ⅲ β-tubulin）、拓扑异构酶2α（TOP2α）等化疗敏感性相关基因mRNA表达的检测。结果成功构建微小RNA表达载体，稳定转染A549细胞后，实验组Bcl-2mRNA表达（相对表达量为0．002±0．001）与阴性对照质粒组（相对表达量为0．104±0．003）相比下降98．1％，蛋白表达水平下调57．6％（t值分别为98．70和7．66，均P〈0．05）。流式细胞术测定实验组细胞周期阻滞在G1期，MTT法检测示实验组细胞生长受到明显抑制，对依托泊苷、顺铂、紫杉醇、长春瑞滨等4种药物的敏感性明显增加[实验组IC50分别为（107．3±0．1）mg／L、（7．7±0．6）mg／L、（11．5±1．9）mg／L和（10．8±1．6）mg／L，阴性对照质粒组IC50分别为（145．8±0．1）mg／L、（60．7±1．4）mg／L、（80．6±1．7）mg／L和（20．6±1．7）mg／L]，差异均有统计学意义（t值分别为655．33，108．04，82．16和12．48，均P〈0．05）。此外，Bcl-2表达下调还使实验组ERCCl、TYMS、TO
王姣琦杜珍武高娴绯吴玫张玉成潘颖王茜张桂珍
关键词：基因,BCL-2抗肿瘤药基因
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