江苏省自然科学基金(BK2004156)
- 作品数：5 被引量：8H指数：2
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- HCK基因在小鼠胚胎干细胞向心肌细胞分化过程中的表达
- 2008年
- 目的探讨HCK基因在小鼠胚胎干细胞向心肌细胞分化过程中的表达及HCK基因在维持胚胎干细胞未分化状态中的意义。方法培养小鼠胚胎干细胞,并诱导其向心肌细胞分化。抽提其胚胎干细胞未分化及分化第2、4、6、8天的总RNA,应用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法对HCK基因mRNA的表达进行半定量分析;同时抽提胚胎干细胞未分化及分化第2、4、6、8天的总蛋白,应用Western-blot方法对HCK蛋白的表达进行半定量分析。采用SPSS11.5软件进行统计学分析,P<0.05为有统计学差异。结果HCK基因mRNA在未分化的胚胎干细胞(D0)及分化的第2天(D2)均有表达,而在分化的第4天(D4)开始已不能检测到有表达,HCK基因mRNA的表达水平随小鼠胚胎干细胞的分化呈急剧下调趋势;HCK蛋白的表达与mRNA的表达相一致,在小鼠胚胎干细胞的分化进程中逐渐下调,至第4天已基本检测不出。结论HCK基因随着小鼠胚胎干细胞向心肌分化,表达呈下调的趋势,HCK基因可能在维持胚胎干细胞未分化状态中起重要作用。
- 龚杰孙凤荣钱玲梅孔祥清盛燕辉杨荣曹克将
- 关键词：干细胞分化
- 房间隔缺损患者心房肌组织中HCK基因的表达被引量：3
- 2006年
- 目的探讨HCK(hemopoietic cell kinase)基因在心房肌组织中的表达与房间隔缺损(ASD)的病理生理学关系。方法获取10例单纯Ⅱ孔型ASD患者和8例正常对照者右房心耳肌组织标本,采用RT-PCR技术检测HCK基因mRNA的表达丰度。结果HCK基因mRNA在正常心房肌和ASD心房肌组织中均有表达,但ASD患者心房肌组织中的HCK基因表达丰度为(24.50±10.29)%,显著低于正常对照组(60.19±17.03)%(t=5.5100,P<0.01)。结论HCK基因在心房肌组织中的异常表达可能与ASD的病理生理学相关。
- 钱玲梅孔祥清盛燕辉杨荣曹克将
- 关键词：房间隔缺损心肌
- P19-αMHC—EGFP干细胞株的构建及其向心肌细胞诱导分化的初步研究
- 2008年
- 目的构建稳定携带心肌特异报告基因pαMHC—EGFP的P19细胞株并诱导其向心肌细胞分化。方法应用脂质体转染法转染质粒pαMHC—EGFP到P19干细胞，通过G418筛选和有限稀释法得到稳定携带pαMHC—EGFP的细胞克隆P19-αMHC—EGFP。诱导P19一otMHC—EGFP向心肌细胞分化，在诱导的不同阶段观测其超微结构的变化，在诱导分化进程中监测“跳动”的发绿色荧光的心肌细胞出现。同时与未转染pαMHC—EGFP的P19细胞进行心肌细胞分化率及心肌肌钙蛋白I（cTnI）表达量的对比。结果电镜结果提示在诱导的第10天，部分细胞出现心肌细胞样特征。P19-αMHC—EGFP在诱导分化的第7天出现发强绿色荧光并“跳动”的心肌细胞，同时与对照P19细胞在心肌细胞分化率及cTnI表达量上差异无统计学意义（P〉0．05）。结论P19-αMHC-EGFP细胞株在分化为心肌细胞的同时具有强绿色荧光标记，其向心肌细胞分化的效率及cTnI的合成未受影响。这一特征有利于对分化成熟的心肌细胞进行识别和纯化，从而应用于心肌细胞替代治疗。
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- HCK基因在大鼠胚胎心脏发育过程中的表达被引量：2
- 2007年
- 目的检测HCK基因在大鼠胚胎心脏过程中的mRNA表达变化,分析其与心脏发育的关系。方法取大鼠胚胎d12、d15、d19心脏,采用半定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测心脏组织中HCK基因mRNA的表达丰度,并应用原位杂交的方法对其进行定位分析。结果在胚胎d12、d15、d19心脏中,HCK基因均有表达,但主要表达于心脏间质,在心肌细胞中不表达,其表达丰度分别为(0.19±0.09),(0.38±0.07),(0.59±0.10),随胚龄的增长有上调趋势(P<0.05)。结论HCK基因表达于心脏间质,在心肌细胞中不表达,并随大鼠胚胎心脏的生长发育呈动态表达,HCK可能与心脏发育相关。
- 孙凤荣龚杰钱玲梅孔祥清盛燕辉杨荣曹克将
- 关键词：HCK胚胎心脏发育
- P19细胞向心肌细胞分化过程中ZNF207基因的表达变化被引量：3
- 2007年
- 目的:观察锌指蛋白207基因(ZNF207)在P19细胞向心肌细胞诱导分化过程中表达水平的变化,探讨ZNF207基因与心肌细胞分化之间可能的关系。方法:体外培养P19细胞,应用0.9%二甲基亚砜(DMSO)诱导其向心肌细胞分化,采用RT-PCR技术在细胞分化成熟的不同时段检测P19细胞中ZNF207基因mRNA表达水平。结果:ZNF207基因在P19细胞向心肌细胞分化的过程中均有表达,随细胞分化成熟,该基因表达水平逐渐升高。经统计学分析发现,在分化第0～2天该基因表达无差异;第2～10天表达持续性增高,各时间点之间均有差异,差异均有统计学意义(P<0.05);第10～17天该基因稳定高表达,各时间点之间无差异。结论:ZNF207基因在P19细胞向心肌细胞分化过程中表达逐渐上调,可能有利于心肌细胞的分化和发育。
- 卓莉莉龚杰周蕾盛燕辉杨荣孔祥清曹克将
- 关键词：P19细胞细胞分化
