国家高技术研究发展计划(2004AA2Z3212)
- 作品数：16 被引量：56H指数：5
- 相关作者：石佑恩胡媛朱晓华余龙江朱路更多>>
- 相关机构：华中科技大学教育部更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划教育部“新世纪优秀人才支持计划”国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学哲学宗教自动化与计算机技术更多>>
- 两种非病毒载体与质粒DNA的结合及解离过程的停流动力学研究
- 2008年
- 目的:对由1,2-二油烯氧基-3-三甲氨基丙烷[1,2-dioleoyl-3-trimethy-lammonium-propane(chloride salt),DOTAP]、二油酰基磷脂酰乙醇胺(1,2-Dioley-l-s-Glycero-3-Phosphoeth anolamine,DOPE)形成的阳离子脂质体与质粒DNA及壳聚糖与质粒DNA的结合及解离动力学过程进行研究。方法:以钌联吡啶配合物[Ru(phen)2dppz]2+作为荧光探针采用荧光停流光谱技术研究两种载体同DNA的结合和解离动力学。结果:结合动力学过程中,随N/P(载体中伯氨基数目/pDNA中磷酸基数目)比的增加,荧光强度的变化幅度增大,在N/P比小于4时,结合速率常数k1>k2。在解离动力学过程中,随N/P比的增加,荧光强度的变化越来越小,在所选N/P比范围内,解离速率常数k1>k2。结论:DNA压缩是复合物形成过程中的限速步骤,而DNA的伸展及重排是复合物解离过程中的限速步骤。
- 刘瑞珍孙晓辉甘璐
- 关键词：DNA解离
- 日本血吸虫双价DNA疫苗的致突变性研究被引量：1
- 2008年
- 目的评价日本血吸虫双价DNA疫苗的致突变性。方法应用Ames试验、小鼠骨髓多染红细胞微核试验、小鼠骨髓细胞染色体畸变试验对日本血吸虫双价DNA疫苗进行初步评价和检测。结果日本血吸虫双价DNA疫苗在S9活化和非活化两种测试条件下,在每皿6.25～100.00μg浓度范围内,对3种菌株的回复菌落数与阴性对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05),Ames试验结果为阴性;日本血吸虫双价DNA疫苗各剂量组骨髓多染红细胞微核率与阴性对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05),试验结果为阴性;日本血吸虫双价DNA疫苗各剂量组染色体畸变率与阴性对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05),试验结果为阴性。结论日本血吸虫双价DNA疫苗初步检测无致突变性。
- 陈丹石佑恩胡媛朱晓华
- 关键词：日本血吸虫双价DNA疫苗AMES试验微核试验染色体畸变试验
- 日本血吸虫双价DNA疫苗对小鼠单次肌肉注射的毒性试验被引量：1
- 2006年
- 目的观察日本血吸虫双价DNA疫苗单次肌肉注射小鼠的急性中毒反应,初步评价其安全性。方法40只BALB/c小鼠(雌雄各半)随机分为4组,即10、20mg/kg给药组,空白质粒和生理盐水对照组,连续观察14d。结果各组动物无死亡,疫苗10mg/kg组未见明显毒性反应,疫苗20mg/kg组有个别动物出现短暂的活动减少,而空白质粒对照组出现活动减少和体重下降。结论日本血吸虫双价DNA疫苗对小鼠单次肌肉注射给药无明显毒性反应,预期临床应用安全性好。
- 石佑恩胡媛朱路余龙江朱晓华
- 关键词：日本血吸虫双价DNA疫苗毒性实验单次剂量
- 寄生虫DNA疫苗免疫途径和剂量的研究进展被引量：2
- 2007年
- DNA疫苗又称核酸疫苗或基因疫苗，能在体内引起特异性细胞免疫和体液免疫应答。免疫应答的水平受多种因素的影响。该文就影响寄生虫DNA疫苗免疫效果的途径和剂量等方面的研究进展作一综述。
- 艾熙夏丽霞谢姣胡媛石佑恩
- 关键词：寄生虫DNA疫苗免疫途径免疫剂量
- 抑杀引起管道腐蚀的微生物的装置设计
- 2006年
- 基于高频交变电磁场技术,探索一种新的抑杀能引起管道腐蚀的微生物的新方法,研制了一种交变电磁场抑杀微生物的高性能的新型装置,以解决由水体中有害微生物引起的腐蚀问题。结果表明,高频交变电磁场能有效抑制水体中有害微生物的生长繁殖,从而减少这些有害微生物带来的腐蚀问题。该方法在石油化工、材料防腐、工业水处理等管道防腐领域都有很广泛的应用前景。
- 刘丽佳余龙江何峰鲁明波
- 关键词：微生物
- 日本血吸虫双价DNA疫苗肌肉刺激和全身过敏试验被引量：2
- 2008年
- 目的观察日本血吸虫双价DNA疫苗对家兔肌肉注射所产生的刺激反应和豚鼠的全身过敏反应,评价其安全性。方法家兔4只,雌雄各半,采用自身对照,左侧股四头肌注射日本血吸虫双价DNA疫苗,右侧注射生理盐水,观察注射部位肌肉的刺激反应,并进行病理组织学检查;豚鼠24只,随机分为4组,日本血吸虫双价DNA疫苗组(致敏剂量0.5mg/只,激发剂量1mg/只)、空白质粒对照组(致敏剂量0.5mg/只,激发剂量1mg/只)、生理盐水对照组和10%人血白蛋白阳性对照组,进行全身过敏试验。结果日本血吸虫双价DNA疫苗对家兔肌肉局部刺激仅见注射部位轻度充血,未发现肌肉组织的变性和坏死;对豚鼠无过敏反应发生,10%人血白蛋白阳性对照组出现明显的过敏反应。结论日本血吸虫双价DNA疫苗对家兔肌肉无刺激作用,对豚鼠也无过敏反应,预期临床应用安全。
- 陈丹石佑恩胡媛朱晓华余希霞
- 关键词：日本血吸虫双价DNA疫苗
- 红豆杉细胞中的酚类化合物含量与紫杉醇产量之间的关系被引量：9
- 2005年
- 研究了在真菌诱导子诱导红豆杉细胞时酚类化合物与紫杉醇产量之间的关系。结果表明:真菌诱导子处理提高了细胞的G6PD、PAL的活性和酚类化合物含量;真菌诱导子和谷氨酸的联合处理也可提高细胞中G6PD、PAL的活性,且联合处理后的酶活性较真菌诱导子单独处理的要高。联合处理后紫杉醇产量与酚类化合物的变化相似,均是前期低于真菌诱导子处理,后期高于诱导子处理;PAL的抑制剂AOA显著降低真菌诱导子处理的酚类化合物和紫杉醇的产量,同时细胞死亡明显增加。因此认为,酚类化合物与细胞诱导时的紫杉醇产量有关,细胞诱导时保持一定浓度的酚类化合物有利于紫杉醇产量的提高。
- 陈超付春华姜革民兰文智余龙江
- 关键词：酚类化合物紫杉醇
- 白细胞介素-12在日本血吸虫脂肪酸结合蛋白诱导小鼠保护性免疫力中的佐剂作用被引量：11
- 2005年
- 目的研究白细胞介素-12(IL-12)对日本血吸虫脂肪酸结合蛋白(Sj14FABP)DNA疫苗的免疫增强效果。方法分别构建pVIVO2-Sj14FABP和pVIVO2-IL12-Sj14FABP疫苗,鉴定构建成功后免疫小鼠。48只雄性BALB/c小鼠随机分为A、B、C和D等4组,分别用0.9%NaCl(对照组)、pVIVO2、pVIVO2-Sj14FABP和pVIVO2-IL12-Sj14FABP肌注免疫1次(100μg/只)。免疫后30d各组小鼠感染40±2条尾蚴,感染后45d剖杀,计数成虫及肝内虫卵;同时用ELISA法检测小鼠血清中IgG抗体水平,用双夹心ELISA法检测脾淋巴细胞经伴刀豆球蛋白A(ConA)和可溶性虫卵抗原(SEA)刺激后培养上清中白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-4(IL-4)和干扰素-γ(IFN-γ)含量。结果经PCR和酶切鉴定,成功构建pVIVO2-Sj14FABP和pVIVO2-IL12-Sj14FABP重组质粒;C、D组免疫后分别获得24.1%和39.4%的减虫率、27.2%和32.8%的减卵率;细胞因子检测结果,D组经ConA和SEA诱生的IL-2和IFN-γ水平显著增高(P<0.01),而IL-4水平显著降低,差异有统计学意义(P<0.01);免疫后30d小鼠血清IgG水平无明显升高,各实验组间差异也无统计学意义(P>0.05)。结论Sj14FABPDNA疫苗可诱导BALB/c小鼠产生部分抗血吸虫感染保护作用,细胞因子IL-12能够诱导机体免疫反应向Th1型优势分化,并增强血吸虫病DNA疫苗免疫保护性效果。
- 朱晓华石佑恩宁长修朱红刚
- 关键词：日本血吸虫脂肪酸结合蛋白白细胞介素-12DNA疫苗免疫保护性
- 日本血吸虫双价DNA疫苗体内外表达及持续时间的初步研究被引量：1
- 2006年
- 目的观察日本血吸虫双价DNA疫苗在体内外表达及体内表达的持续时间。方法将构建的共表达日本血吸虫双价核酸疫苗pVIVO2-SjFABP/Sj23瞬时转染HEK-293细胞,通过逆转录(RT-PCR)和间接免疫荧光试验(IFAT)检测真核细胞中SjFABP和Sj23基因及蛋白的表达。质粒经股四头肌注射免疫BALB/c小鼠12只,每月眼眶采血,并活体灌流小鼠2只,IFAT检测重组蛋白的原位表达,Westernblot法检测血清中特异性抗体,持续观察6个月。结果RT-PCR和IFAT证明质粒pVIVO2-SjFABP/Sj23能在体外表达。免疫后连续6个月,IFAT均检测到小鼠骨骼肌注射部位重组蛋白的原位表达,但Westernblot未检测到血清中特异性抗体的存在。结论日本血吸虫双价DNA疫苗在HEK-293细胞和小鼠骨骼肌中均能够正确地表达,体内表达持续时间至少在6个月以上。
- 胡媛石佑恩朱晓华
- 关键词：日本血吸虫双价DNA疫苗持续时间
- 日本血吸虫DNA多价疫苗pVIVO_2SjFABP-23的构建及其保护性免疫被引量：12
- 2006年
- 目的构建日本血吸虫多价DNA疫苗pVIVO2SjFABP-23,并观察其在小鼠抗血吸虫感染中的免疫保护作用。方法根据Sj FABP和Sj23的基因序列合成两对特异性引物,利用重组PCR技术将日本血吸虫Sj FABP和Sj23的基因片段进行拼接,得到融合基因SjFABP-23,再将该片段重组于p GEM-T载体中,进行PCR扩增及DNA序列测定。然后经双酶切将目的片段SjFABP-23克隆到pVIVO2的一个多克隆位点上转化E.coliGT 110获得重组质粒pVIVO2SjFABP-23,免疫小鼠进行免疫保护性实验。结果PCR扩增出一条大小约为1.1Kb的目的片段。免疫小鼠获得52.14%减虫率(P<0.01)和60.93%的减卵率(P<0.01),且均高于单价疫苗pVIVO2Sj23(P<0.05)。结论PCR成功扩增SjFABP-23的基因片段,血吸虫DNA多价疫苗pVI-VO2SjFABP-23构建成功,该疫苗在小鼠抗血吸虫感染中具有比单价疫苗pVIVO2Sj23更好的免疫保护作用。
- 李春艳余龙江刘智朱路朱晓华胡媛石佑恩
- 关键词：日本血吸虫脂肪酸结合蛋白多价DNA疫苗免疫保护
