国家自然科学基金(81072426)
- 作品数：8 被引量：18H指数：3
- 相关作者：李柏青盛玲玲夏惠金辉盛玲玲更多>>
- 相关机构：蚌埠医学院台州市第一人民医院蚌埠医学院第二附属医院更多>>
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- IL-17/IL-22在结核耐热性抗原和磷酸化抗原扩增极化后的表达及意义被引量：2
- 2021年
- 目的γδT细胞在结核耐热性抗原(Mtb-HAg)和磷酸化抗原(HDMAPP)培养扩增后,阐明Mtb-HAg和HDMAPP在细胞因子(ck:IL-1β、TGF-β和IL-23)极化状态下,IL-17和IL-22表达情况。方法密度梯度离心法获取外周血单个核细胞(PBMC),用RPMI1640培养基培养。实验组:分Mtb-HAg、HDMAPP、全菌抗原3组,各组分别加入(IL-1β、TGF-β)培养3 d加入rIL-2继续培养,第9天加入IL-23培养至12 d;对照组:分Mtb-HAg、HDMAPP、全菌抗原3组,培养3 d加入rIL-2继续培养至12 d。各组最终扩增为富含效应性γδT细胞的细胞群,收集细胞PMA/Ionomycin和Monensin刺激培养6 h,检测Tγδ17和Tγδ22细胞亚群进行分析。结果各组中γδT细胞均能产生IL-17和IL-22,Mtb-HAg+ck组较Mtb-HAg组及HDMAPP+ck组较HDMAPP组中γδT细胞产生IL-17细胞比例上升(均P<0.05),且IL-17主要由Vδ2亚群产生,而各极化实验组中γδT细胞产生IL-22细胞比例比较差异无统计学意义(均P>0.05)。结论 Mtb-HAg、HDMAPP刺激培养PBMC,在IL-1β、TGF-β和IL-23极化状态下,可诱导γδT细胞产生更多IL-17,而对诱导IL-22无效。
- 盛玲玲盛玲玲金辉杨再兴
- 关键词：白细胞介素17白细胞介素22
- 不同刺激剂对健康人和结核患者外周血T细胞产生γ干扰素和肿瘤坏死因子-α的影响被引量：1
- 2016年
- 目的：检测健康人和结核患者外周血经不同刺激剂刺激后T细胞亚群产生γ干扰素（IFN-γ）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的变化。方法：12名健康人和12例结核患者的外周血单个核细胞用佛波醇脂（PMA）＋钙离子霉素（IM）、结核杆菌耐热抗原（Mtb-HAg）、植物血凝素（PHA）刺激,莫能霉素阻断,流式细胞仪检测产生IFN-γ和TNF-α的T细胞亚群比例。结果：PMA＋IM刺激健康人外周血αβT细胞产生IFN-γ的比例明显高于结核患者（P〈0.01）;PMA＋IM、Mtb-HAg和PHA刺激健康人外周血γδT细胞产生IFN-γ的比例高于结核患者（P〈0.05～P〈0.01）。PMA＋IM和PHA刺激健康人外周血αβT细胞产生TNF-α的比例均高于结核患者（P〈0.05）;PMA＋IM和PHA刺激健康人外周血γδT细胞产生TNF-α的比例均高于结核患者（P〈0.05）。结论：经不同刺激剂刺激后,健康人γδT细胞产生IFN-γ的比例高于结核患者γδT细胞产生IFN-γ的比例。经PMA和PHA刺激后,健康人αβT和γδT细胞产生TNF-α的比例高于结核患者。
- 徐志庆夏惠李柏青
- 关键词：Γ-干扰素流式细胞仪
- 结核分枝杆菌抗原和TCRγδ抗体诱导人γδT细胞分化并产生IL-17被引量：3
- 2015年
- 目的探讨结核分枝杆菌耐热抗原（MTB—HAg）和抗T细胞受体γδ单克隆抗体（TCRγδ／5mAb）在刺激人γδT细胞诱导分化产生IL-17中的作用。方法健康人外周血单个核细胞经过免疫磁珠分选得到纯化的γδT细胞后，加入MTB-HAg或包被的TCRγδ 5mAb，再加或不加CD28mAb进行刺激，同时加或不加IL-17极化细胞因子组合（CK）（IL-1β、IL-6、TGF-β和IL-23），极化诱导培养10—12d。然后收集诱导极化培养的γδT细胞，经佛波醇酯和离子霉素再刺激6h后，用ELISPOT法检测产生IL—17的细胞数。结果经刺激和诱导分化培养的γδT细胞用ELISPOT法检测产生IL-17的细胞数发现，TCRγδ 8mAb联合CK组与TCRγδ／8mAb组相比明显增加，TCRγδ mAb联合CD28mAb组与TCRγδ mAb同时联合CD28mAb和CK组相比明显减少。TCRγδ 8mAb同时联合CD28mAb和CK组与TCRγδ mAb联合CK组相比明显增多。MTB—Hag同时联合CD28mAb和CK组与TCRγδ mAb同时联合CD28mAb和CK组相比显著减少，但与MTB—HAg联合CD28mAb组相比明显增多。结论诱导Th17分化的CK（IL-1β、IL-6、TGF-β和IL-23）也能诱导人γδT细胞分化产生IL-17，TCRγδ 8mAb刺激γδT细胞增殖后诱导分化产生IL—17的活性比MTB—HAg更强。另外，CD28在TCRγδ 8mAb激活γδT细胞诱导产生IL-17的过程中也有重要作用。
- 陈立夏惠汪洪涛盛玲玲徐志庆孙垚唐洁李柏青
- 关键词：结核分枝杆菌ΓΔT细胞IL-17
- IFN-γ和IL-17在结核病患者γδ T细胞中的表达及意义被引量：4
- 2018年
- 目的探讨正常人(HC)、结核病患者(TB)2组人群外周血结核杆菌耐热性抗原(Mtb-HAg)刺激后γδ T细胞产生IFN-γ和IL-17的变化及意义。方法分别选取12例HC作为对照组,12例TB作为实验组,采集2组人群外周血进行分离PBMC,经Mtb-HAg刺激扩增培养后,收集Mtb-HAg体外扩增效应性T细胞,Mtb-HAg作为刺激剂,设定阴性对照组和实验组分别刺激培养2 h,再加入莫能霉素(monensin)阻断培养4 h,收集细胞加入荧光抗体进行表面分子和胞内染色,上流式细胞仪检测对照组和实验组γδ T细胞产生IFN-γ和IL-17细胞的相对比例。结果 HC组、TB组各阴性对照组和实验组γδ T细胞均可以产生IFN-γ,用Mtb-HAg再刺激时,γδ T细胞中产生IFN-γ的细胞均显著高于未用Mtb-HAg刺激组(P <0. 001),且HC组和TB组差异有统计学意义(P <0. 001);HC组γδ T细胞中产生IL-17的细胞呈现降低趋势,与阴性对照组比较差异无统计学意义,而TB组γδ T细胞中产生IL-17的细胞也呈现降低趋势,且差异有统计学意义(P <0. 01)。结论 TB患者PBMC培养的γδ T细胞对Mtb-HAg刺激有较强的反应能力,而产生IL-17的能力降低。
- 盛玲玲金辉刘东红李柏青
- 关键词：结核分枝杆菌白介素17T细胞
- 结核分枝杆菌蛋白抗原T细胞表位的研究进展
- 2011年
- 结核分枝杆菌（Mtb）的蛋白抗原根据所处细胞位置的不同,可分为分泌性蛋白、胞质内蛋白和膜脂蛋白三类。其中Mtb分泌性蛋白对抗结核菌感染的免疫作用最为重要。因此,目前研究较深入的Mtb抗原均集中在Mtb的分泌性蛋白,如ESAT-6、CFP-10、MPT64、38kDa和Ag85复合物等。
- 彭美玉李柏青
- 关键词：结核分枝杆菌抗原T细胞表位
- 结核分枝杆菌耐热抗原激活的人γδT细胞Th2极性分化特征以及T-bet/GATA-3对分化的调控作用被引量：7
- 2015年
- 目的研究结核杆菌耐热抗原(MTB-HAg)激活的人外周血γδT细胞Th2极性分化特点和表达于T细胞中的T盒(T-bet)和GATA结合蛋白3(GATA-3)转录因子的调控作用。方法用MTB-HAg刺激人外周血单个核细胞(PBMC)获得MTB-HAg激活的T细胞(MTBAT),分别在中性条件和Th2极化条件培养后,再经10 ng/m L佛波醇酯(PMA)、500 ng/m L离子霉素(ionomycin)和2.5μmol/L莫能菌素(monensin)刺激6 h,四色荧光抗体染色流式细胞术检测γδT细胞和αβT细胞内细胞因子γ干扰素(IFN-γ)和白细胞介素4(IL-4)的表达。流式细胞术分选28 d MTBAT中的γδT细胞和CD4+T细胞,反转录PCR(RT-PCR)检测T-bet和GATA-3 mRNA的表达。结果在中性条件和Th2极化条件下培养的MTBAT中,γδT细胞一直优势表达IFN-γ,而Th2极化条件下,随培养时间增加IFN-γ+αβT细胞百分率显著下降。与中性条件培养比较,Th2极化条件下MTBAT培养28 d,Th0型(IFN-γ+IL-4+)γδT细胞显著增加;而Th2型(IFN-γ-IL-4+)αβT细胞显著增加。RT-PCR结果显示,Th2极化的γδT细胞仍高表达T-bet mRNA,而在CD4+T细胞T-bet mRNA表达被显著下调;同时,GATA-3 mRNA在γδT细胞和CD4+T细胞的表达均显著上调。结论 Th2极化条件下,大部分γδT细胞仍为Th1型,仅部分极性分化为Th0型细胞;Th2极性分化的γδT细胞转录因子T-bet和GATA-3未表现出交互调节功能。
- 朱安友吕合作张伦军胡建国王凤超李柏青
- 关键词：ΓΔT细胞T-BETGATA-3
- 不同结核杆菌抗原刺激外周血T细胞亚群产生干扰素的比较被引量：6
- 2014年
- 目的：比较磷酸化抗原（HDMAPP）、结核杆菌耐热抗原（Mtb-HAg）和结核杆菌低分子耐热抗原Mtb-HAg（10 k）刺激外周血T细胞产生γ-干扰素（IFN-γ）的反应能力方面的特点及差异.方法：采集正常人外周血,分别用HDMAPP、Mtb-HAg和Mtb-HAg（10 k）刺激培养14 h,再加入莫能霉素继续培养6h,收集细胞,加入荧光标记单抗进行表面分子和胞内染色,然后在流式细胞仪上检测各实验组中CD3＋ αβ细胞和CD3＋ γδ细胞胞内IFN-γ的表达.结果：正常人各抗原实验组CD3＋ αβ细胞和CD3＋γδ细胞胞内产生IFN-γ＋细胞比率较阴性组对照组升高（P＜0.01）.各抗原刺激组CD3＋γδ细胞产生IFN-γ＋细胞比率明显高于CD3＋αβ细胞（P ＜0.05 ～P＜0.01）.3种抗原刺激组间CD3＋αβ细胞和CD3＋γδ细胞无明显不同（P＞0.05）.结论：HDMAPP、Mtb-HAg和Mtb-HAg（10 k）均可以刺激外周血中T细胞中αβ和γδ细胞群产生IFN-γ,均可特异性诱导刺激CD3＋γδ细胞产生IFN-γ,HDMAPP、Mtb-HAg（10 k）对CD3＋γδ细胞产生IFN-γ的表达量高于Mtb-HAg.
- 盛玲玲夏惠孙悝陈勇李柏青
- 关键词：结核杆菌抗原干扰素T细胞T细胞
- Tγδ17和Tγδ22细胞在健康成人外周血中的比例被引量：1
- 2012年
- 目的:观察健康成人外周血中αβT细胞和γδT细胞中辅助性T细胞17(TH17)样细胞和TH22样细胞的比例。方法:采集18名正常人外周血用荧光抗体染色后用流式细胞仪检测αβT细胞、γδT细胞中白细胞介素-22(IL-22)、IL-17和γ干扰素(IFN-γ)表达细胞的百分比。结果:将正常人外周新鲜全血中CD3+T细胞分成γδT细胞和αβT细胞两群。TH1样细胞在αβT细胞中比例为14.31%,明显低于在γδT细胞中的61.07%(P<0.01),而TH17样细胞在αβT细胞中的比例为1.16%,明显高于在γδT细胞中的0.27%(P<0.01),TH22样细胞在αβT细胞中与γδT细胞中的比例分别为1.06%和0.91%,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:在γδT细胞中存在IL-17和IL-22均阳性的Tγδ17细胞和仅产生IL-22的Tγδ22细胞,但比αβT细胞中的TH17样细胞和TH22样细胞少。
- 徐丹梁华丁艳邱晓静盛玲玲李柏青
- 关键词：外周血ΓΔT细胞ΑΒT细胞
