湖南省中医药科研计划项目(2009047) 作品数:5 被引量:45 H指数:5 相关作者: 钟广伟 罗艳红 李湘平 相玲丽 李炜 更多>> 相关机构: 中南大学 更多>> 发文基金: 湖南省中医药科研计划项目 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
平肝潜阳方药对自发性高血压大鼠血管组织蛋白质表达谱的影响 被引量:6 2011年 目的:观察平肝潜阳方药对自发性高血压大鼠血管组织中蛋白质表达的影响,为深入研究平肝潜阳方药治疗高血压的作用机制奠定基础。方法:选择WKY大鼠10只作为正常对照,自发性高血压大鼠20只随机分为模型组和平肝潜阳方治疗组。治疗时间为4周,治疗期间每周监测大鼠血压和心率,并观察大鼠行为学指标;治疗结束后,采用双向凝胶电泳(two-di mensional gel electrophoresis,2-DE)结合质谱技术分离鉴定血管组织相关蛋白。结果:平肝潜阳方药不仅能够明显降低自发性高血压大鼠的血压,而且能够改善大鼠的心率、易激惹程度和旋转耐受时间。本实验建立了自发性高血压大鼠血管组织的2-DE图谱。与正常组比较,模型组蛋白质点表达上升2倍及以上的有12个,下降2倍及以上的有15个。治疗组与模型组比较发现,表达下调的15个蛋白质中有10个表达增强,而表达上调的12个蛋白质中有8个表达降低。共得到16个肽质量指纹图谱,3个无质谱结果,搜索到13个具有统计学意义的蛋白质。结论:平肝潜阳方药能够降低血压和改善大鼠的行为学指标,其机制可能与调节血管组织的蛋白质表达谱有关。 范荣 何峰 王杨 钟广伟 李云辉关键词:高血压 蛋白质组学 血管组织 平肝潜阳方含药血清中天麻素水平测定及其对血管平滑肌细胞活性的影响 被引量:9 2010年 背景:平肝潜阳方为中药复方制剂,化学成分复杂,直接测定血清中药物含量,比较困难。天麻是平肝潜阳方的君药之一,且其为成苷类衍生物,水平容易测定。目的:通过检测血清中天麻素水平了解平肝潜阳方在体内的药物浓度,探讨制备含药血清的具体方法,并观察平肝潜阳方含药血清对血管平滑肌细胞活性的影响。方法:大鼠予以平肝潜阳方浸膏2g/d给药3d或7d,分别于3d或7d内于每天8:00和16:00各灌药1g,与第4或第8天8:00灌药2g,于最后给药前及给药后0.5,1,2,3,5h心脏内采血。高效液相色谱测定大鼠体内天麻素水平;在血管平滑肌细胞的培养液中分别添加不同浓度灭活处理的含药血清,加药培养后24h采用MTT法观察细胞活性的抑制率。结果与结论:平肝潜阳方浸膏3d与7d给药大鼠,均在最后一次给药后1h达到最高血药浓度,但3d给药血药浓度迅速下降,而7d给药可维持较长时间的血药浓度平台;天麻素在0.045~5.6mg/L范围内呈线性,r=0.9992,精密度RSD日内为1.86%,加样回收率为93.88%。不同浓度含药血清对血管平滑肌细胞的生长均有抑制作用,但以5%浓度含药血清对血管平滑肌细胞的生长抑制率最大(P<0.01),其中7d给药组的抑制率明显高于3d给药组(P<0.01)。因此,平肝潜阳方含药血清的制备应选取连续给药7d后末次给药1h后为最佳采血时间点,含药血清能够抑制血管平滑肌细胞的活性。 李湘平 罗艳红 钟广伟 尹桃 相玲丽 李炜 陈国林关键词:天麻素 中药血清 平肝潜阳药物对甲状腺功能亢进症肝阳上亢证患者的临床疗效观察和血淋巴细胞蛋白质表达的影响 被引量:10 2011年 目的:观察平肝潜阳药物对甲状腺功能亢进症肝阳上亢证患者的临床疗效和血淋巴细胞蛋白质表达的影响,为深入研究平肝潜阳法治疗甲状腺功能亢进症肝阳上亢证分子机制奠定基础。方法:48例甲状腺功能亢进症肝阳上亢证患者随机分为治疗组和对照组,治疗组口服平肝潜阳法中药复方;对照组口服甲巯咪唑片剂。3个疗程后,比较2组治疗前后的中医症状和体征记分的变化,观察心电图(P波),甲状腺激素(TSH,FT3,FT4),B超和不良反应等变化;采用双向凝胶电泳-串联质谱法分离和鉴定甲状腺功能亢进症肝阳上亢证患者外周血淋巴细胞和正常人之间差异蛋白表达,并观察应用平肝潜阳法药物干预后差异蛋白质表达水平的变化。结果:治疗组具有减慢心率、降低P波振幅、调节甲状腺激素水平和缩小甲状腺肿块体积作用,与对照组比较,差异无统计学意义;但在改善中医症状和减少副反应方面,治疗组明显优于对照组,以改善口干、烦躁易怒、面部烘热症状更为明显(P<0.05)。2组在总疗效方面比较无差异。正常组、治疗组治疗前和治疗组治疗后淋巴细胞凝胶蛋白质点数依次为429±31,452±28和437±36。治疗组治疗前与正常组比较有8个蛋白质表达下调,11个蛋白质表达上调;治疗组治疗前后比较,表达下调8个蛋白质中有5个表达增强,而表达上调11个蛋白质中有8个表达降低。共得到10肽质量指纹图谱,2个无质谱结果,搜索到8个具有统计学意义的蛋白质,主要有通道蛋白、抗氧化蛋白、代谢相关蛋白、免疫相关蛋白和细胞信号转导蛋白等。结论:平肝潜阳药物中药复方能够调节甲状腺素水平、改善中医症状和体征、减少不良反应;其治疗甲状腺功能亢进症肝阳上亢证可能是通过调节部分血淋巴细胞蛋白质的表达而实现。 李湘平 尹桃 钟广伟 李炜 罗艳红 相玲丽 刘泽灏关键词:平肝潜阳 蛋白质组学 甲状腺功能亢进症 平肝潜阳方对偏头痛肝阳上亢证大鼠血淋巴细胞蛋白质表达的影响 被引量:11 2010年 目的:探讨平肝潜阳方对偏头痛肝阳上亢证大鼠作用的分子机制。方法:用电刺激SD大鼠三叉神经节的方法并灌服附子汤复制偏头痛肝阳上亢证模型,采用平肝潜阳方中药进行干预。运用双向凝胶电泳技术分离偏头痛肝阳上亢证大鼠血淋巴细胞的总蛋白,图像分析识别差异表达的蛋白质点,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱得到相应的肽质量指纹图,搜索数据库鉴定蛋白质。结果:平肝潜阳方能够明显改善偏头痛大鼠的头痛等症状,得到分辨率及重复性较好的正常大鼠、偏头痛肝阳上亢证大鼠、中药治疗大鼠血淋巴细胞的双向凝胶电泳图谱;共得到13肽质量指纹图谱,2个无质谱结果,搜索到具有统计学意义的蛋白质11个,包括乙醇脱氢酶3,糖原磷酸化酶,ATP合酶D链,膜联蛋白-3,泛素,中性粒细胞防御素4前体,黑素瘤相关性E2抗原,热休克蛋白-27,膜联蛋白-A1,硫氧还蛋白过氧化物酶-Ⅱ,谷胱甘肽合成转移酶片断。结论:平肝潜阳方治疗后的偏头痛肝阳上亢证大鼠血淋巴细胞蛋白质的表达与治疗前比较有差异,所鉴定的11个蛋白质可能与平肝潜阳方的作用机制有关。 钟广伟 胡建军 陈泽奇 罗艳红 张莺 尹耀慧 李炜 易振佳 陈国林关键词:蛋白质组学 偏头痛 肝阳上亢证 血淋巴细胞 平肝潜阳方治疗原发性高血压大鼠的实验研究 被引量:14 2011年 目的:通过动物实验探讨平肝潜阳方治疗高血压病的中药药理学机制。方法:将40只原发性高血压大鼠(SHR)随机分为5组:模型组,平肝潜阳方高、中、低剂量组及马来酸依那普利对照组,每组8只;观察平肝潜阳方对SHR宏观表征和行为学的影响,测量给药前及给药后1、2、3、4周大鼠血压和心率,于给药4周后,检测大鼠血清一氧化氮(NO)和内皮素(ET)含量。结果:给药4周后,平肝潜阳方和马来酸依那普利对SHR宏观表征和行为学指标的影响表现出不同的特点,平肝潜阳方在改善大鼠急躁易怒、眩晕、头痛等方面具有一定的量效关系;与模型组相比,平肝潜阳方高、中剂量组能显著降低模型动物收缩压(SAP)、舒张压(DAP)和平均动脉压(MAP),减慢心率(P<0.01),2种药物均能显著增加大鼠血清NO含量,降低大鼠血清ET含量(P<0.01),但两者无显著差异。结论:平肝潜阳方不仅能够明显降低血压,而且能够改善大鼠的宏观表征,可能是通过调节血管活性物质而实现的。 李湘平 罗艳红 钟广伟 相玲丽 李云辉关键词:降压 原发性高血压 药效学