目的探讨使用人脐静脉内皮细胞制备饲养层的方法。方法使用健康产妇剖宫产后同意遗弃的脐带,无菌状态下胶原酶消化法收集内皮细胞,进行传代培养和增殖扩增,免疫组化法进行Ⅷ因子相关抗原鉴定,分别取 P2~P5代内皮细胞经丝裂霉素 C(10μg/ml)分别处理30、60、90、120 min 后再接种 E14.1胚胎干细胞。观察 E14.1胚胎干细胞在内皮细胞上的生长情况。结果经丝裂霉素 C 处理30~60 min 后的 P2~P3代内皮细胞可以很好的支持胚胎干细胞的生长。结论人脐静脉血管内皮细胞可作为一种来源丰富、取材方便的人源化饲养层细胞,为以后临床应用打下基础。 [临床儿科杂志,2008,26(10):890-892]