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国家教育部博士点基金(20050487077)
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胰腺癌干细胞的体外增殖与鉴定
2008年
目的建立胰腺癌干细胞体外增殖体系并鉴定所获细胞。方法ASPC-1胰腺癌细胞以1000细胞/ml的密度培养于含碱性成纤维生长因子、表皮生长因子、胰岛素、转铁蛋白、硒及牛血清白蛋白的DMEM-F12培养基中。待培养10~14d,部分ASPC-1细胞增殖为细胞球后,收集细胞球进行鉴定。鉴定方法包括克隆形成实验、Hoechst33342染料染色、CD44抗体免疫细胞化学染色以及实时定量逆转录PCR检测CD44mRNA水平。结果小部分ASPC-1细胞可在干细胞体外增值体系中增殖为细胞球。此体系增殖所获细胞中能够排出Hoechst33342染料的细胞比例远高于普通培养体系中的细胞(〉95%vs2%~3%),且具更高的克隆形成能力[(10.92±3.38)%比(10.92±3.38)%,P〈0.01]。此外,此增值体系中所获细胞CD44表达率更高[(86.00±5.85)%比(18.71±3.64)%,P〈0.01]。结论部分ASPC-1细胞可在本研究所建立的于细胞体外增殖体系中增殖,增殖所获细胞具有肿瘤干细胞特性。
刘涛
万赤丹
勾善森
吴河水
熊炯炘
王春友
关键词:
肿瘤干细胞
胰腺肿瘤
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