国家自然科学基金(30801230)
- 作品数：4 被引量：12H指数：2
- 相关作者：王玉东郎虓罗来敏程蔚蔚陶敏芳更多>>
- 相关机构：上海交通大学附属第六人民医院中国福利会国际和平妇幼保健院同济大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市卫生局青年科研基金上海市卫生局科技发展基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- ERβ介导脱氢表雄酮对成骨细胞的选择性作用被引量：1
- 2011年
- 目的明确ERβ介导脱氢表雄酮（DHEA）对成骨细胞的选择性作用机制。方法构建ERβ沉默表达的pLVTHM—GFP／ERβ-shRNA质粒和ER[3高表达的pWPT-ERβ重组质粒，转染人成骨细胞系hMG63，使hMG63细胞中的ER[3沉默表达（命名为hMG63-shER[3细胞）和高表达（命名为hMG63-ERβ细胞），分别给予DHEA（1×10^-7mol／L）、加或不加入U0126、依托泊苷作用后，流式细胞仪检测细胞的增殖和凋亡情况；同时利用逆转录PCR技术检测DHEA对hMG63细胞雌激素受体亚型mRNA表达的影响。结果hMG63-ERβ和hMG63-shERβ细胞中ERβ基因的相对表达量分别比hMG63细胞升高7．39倍和降低为17％。DHEA对hMG63-shERβ、hMG63-ERβ和对照细胞hMG63细胞ER[3mRNA的表达有升调节作用，而对ERamRNA的表达无明显影响。与hMG63-shERβ细胞相比，DHEA能明显促进ER[3高表达时（即hMG63-ERβ细胞）和对照细胞hMG63的细胞增殖[增殖指数分别为（81．6±7．6）％、（75．0±5．3）％，P均〈0．05]并拮抗细胞的凋亡[凋亡率分别为（12．2±1．6）％、（14．6±1．5）％，P均〈0．01]，该作用可被U0126部分阻断[增殖指数分别为（33．2±2．0）％、（41．2±2．4）％，凋亡率分别为（40．5±4．3）％、（43．3±4．1）％，P均〈0．05]。结论优势表达的ERB是介导DHEA对成骨细胞选择性作用的主要受体。
- 王玉东郎虓陶敏芳程蔚蔚
- 关键词：去氢表雄酮雌激素受体Β成骨细胞
- COX-2和VEGF在子宫内膜腺癌中表达及其与肌层侵袭和淋巴转移的关系被引量：1
- 2009年
- 目的探讨COX-2和VEGF在子宫内膜腺癌中表达与肌层侵袭和淋巴转移的关系。方法收集上海交通大学附属第六人民医院2006年9月至2008年7月手术切除子宫内膜腺癌标本60例,根据有无深肌层浸润和(或)淋巴转移将子宫内膜腺癌分为两组,应用荧光定量PCR、蛋白印迹法测定腺癌组织中COX-2、VEGF的表达水平,以正常子宫内膜组织作为对照组。结果(1)子宫内膜腺癌组织COX-2与VEGF mRNA表达呈正相关(r=0.7137,P=0.0001);(2)对照组中COX-2和VEGF mRNA表达(4.78±1.07、3.37±0.70)均高于低危组(3.84±0.91、2.55±1.02),差异有统计学意义(P<0.05);(3)低危组中COX-2和VEGF蛋白表达(0.13±0.10、0.68±0.16)均低于高危组(0.20±0.12、0.83±0.14),差异有统计学意义(P<0.05)。结论子宫内膜腺癌组织中COX-2可能上调VEGF的表达水平,促进新生血管和淋巴管生成,从而促进肌层浸润和淋巴转移,为临床预防、治疗及预后判断提供参考。
- 郎虓王玉东黄亚绢罗来敏
- 关键词：子宫内膜腺癌环氧化酶-2血管生长因子
- 宫腔镜联合彩阴超在子宫内膜癌临床分期中的价值被引量：9
- 2011年
- 目的提高早期子宫内膜癌临床分期的准确性,适应子宫内膜癌患者保留生育功能的需要。方法回顾性分析159例实施全面手术病理分期的子宫内膜腺癌患者的临床资料,比较基于宫腔镜联合彩阴超的临床分期(简称新临床分期)与FIGO 2009手术病理分期的一致性;通过磁共振、彩阴超及宫腔镜下分段诊刮对肌层浸润、宫颈侵犯的诊断价值,以及对病理分级的术前评估价值,综合分析宫腔镜联合彩阴超在子宫内膜癌临床分期中的价值。结果宫腔镜联合彩阴超的新临床分期与新手术病理分期具有高度一致性(Kappa=0.773,P=0.046),且评估病理分级的准确性较高(Kappa=0.885,P=0.056)。结论宫腔镜联合彩阴超能较准确地预测早期子宫内膜癌的手术病理分期及高危因素,使保留生殖、内分泌功能的子宫内膜癌手术成为可能。
- 童剑倩王玉东罗来敏郎虓
- 关键词：子宫内膜肿瘤宫腔镜
- β雌激素受体沉寂表达载体的构建及表达被引量：2
- 2010年
- 目的构建雌激素受体β(ERβ)亚型沉寂表达载体,并观察其转染成骨细胞后抑制ERβ基因表达的效果。方法参考人ERβ基因mRNA序列,设计、合成ERβ-shRNA的DNA Oligo后行PCR扩增,获得的shRNA双链DNA片段与pLVTHM-GFP质粒双酶切后连接,转化大肠杆菌E.coliDH5α感受态细胞。取鉴定正确的pLVTHM-GFP/ERβ-shRNA重组质粒转染人成骨hMG63细胞,实验分空白载体组、空白对照组和ERβ-siRNA组,转染48h后于倒置荧光显微镜下观察各组细胞的转染效果,并采用流式细胞术检测转染效率。抽提各组细胞的总RNA,经RT-PCR生成cDNA,Realtime-PCR检测ERβ基因的抑制效率。结果倒置荧光显微镜下观察显示,ERβ-siRNA组hMG63细胞90%以上呈现绿色荧光。流式细胞术检测ERβ-shRNA转染hMG63细胞的转染效率为92.3%。Realtime-PCR检测结果表明,ERβ-siRNA组ERβ表达量(0.17±0.01)仅约为空白载体组(1.00±0.01)的17.3%(P<0.001),ERβ-siRNA对hMG63细胞ERβ基因的抑制效率约为83%。结论成功建立了人ERβ沉寂表达的成骨细胞模型,慢病毒载体介导的ERβ-siRNA能有效抑制成骨细胞ERβ基因的表达,满足了研究成骨细胞中ERβ相关功能的需要。
- 孙旭妍陶敏芳程蔚蔚王玉东
- 关键词：成骨细胞雌激素受体Β
