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联合培养法优化K562细胞红系诱导分化及红系相关基因和膜蛋白表达分析: 2009年; 目的优化K562细胞体外红系诱导分化条件，分析红系相关基因和膜蛋白的表达，探讨K562细胞的分化潜能。方法采用红系诱导联合培养法，优化诱导试剂丁酸钠、红细胞生成素、氯化高铁血红素等成分组合和剂量组合。诱导效率鉴定指标选用红系ALAS mRNA和粒系bcr／ablmRNA表达丰度分析、细胞形态学观察、联苯胺染色阳性率计数。红系分化进一步鉴定指标选用Realtime-PCR检测10种红系分化相关基因的表达；流式细胞术测定红系细胞膜标志物。结果优化红系诱导组合联合培养K562细胞120h后，联苯胺染色计数阳性细胞可达1。0％。Realtime-PCR检测Spectrinα、Spectrinβ、band3、eALAS、CD47、RhD、EPB4．2的mRNA水平分别为对照组的8．05、14．58、22．87、14．52、26．53、3．48、1．94倍，而bcr／ablmRNA水平为对照组的0．39倍。流式细胞术测定红系膜蛋白CD47，band3、RhD水平明显增高（P〈0．01），GPA无明显差异。结论优化组合体外红系诱导分化法可使K562细胞稳定向红系分化，良好细胞状态利于转外源基因操作，进行红系统疾病研究。RhD比GPA更早在红系细胞表达，可作为早期红系特异标记。; 黄前川李津婴周虹许燕群黄正霞陈莉; 关键词：K562细胞

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国家自然科学基金(3057046)