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原种黑麦草组培再生体系建立初探被引量：3: 2013年; [目的]探索原种黑麦草愈伤组织诱导和植株再生方法,为多年生黑麦草原种的转基因研究奠定基础。[方法]以多年生黑麦草原种成熟种子为外植体,在组织培养条件下,施以不同浓度的激素进行培养,研究不同激素组合对愈伤组织诱导以及植株再生的影响。[结果]MS基本培养基中添加5.0 mg/L 2,4-D时愈伤组织诱导率最高,达64.85%;愈伤组织在MS附加1 mg/L 6-BA和0.5 mg/L IBA的分化培养基中分化率最高,为37%;不定芽在添加0.1 mg/L IBA的生根培养基中生根率为96%。[结论]黑麦草原种愈伤组织再生体系成功建立。; 郑若男阮以勒郑双双杨志红; 关键词：黑麦草愈伤组织

Construction of Plant-based Expression Vector of Polyphosphate Kinase Gene: 2012年; [Objective] The aim was to construct the fusion expression vector of polyphosphate kinase（PPK） and green fluorescent protein（GFP） genes.[Method] In this study,the primers were designed based on PPK gene sequence（L03719） of E.coli DH5α in Genbank.Genomic DNA of E.coli DH 5α was extracted as template for the amplification of PPK gene by PCR method.By using In-Fusion@ HD Cloning Kit,the PPK gene was directionally cloned into NcoI site of the pCAMBIA1302 vector.[Result] Sequencing results showed that the 2.0 kb long fragment of PPK gene was inserted into the plant-based expression vector pCAMBIA1302 in front of GFP gene.[Conclusion] The fusion expression vector of PPK and GFP genes were successfully constructed.; 曹访杨志红韩志萍杨倩费佳玲; 关键词：CONSTRUCTION

聚磷激酶基因克隆及其植物表达载体构建: 2012年; 利用试剂盒法提取E.coli DH5α基因组DNA,根据GenBank中登录的大肠杆菌聚磷激酶(PPK)基因序列(L03719)设计引物,通过PCR扩增得PPK基因,然后将其克隆到pMD20-T Vector上并测序,测序结果与GenBank登录的序列相比对,同源性达99.9%。用限制性内切酶XbaⅠ、BamHⅠ将目的片段和植物表达载体pBI121进行双酶切,T4连接酶连接,然后转化到E.coli BL21感受态细胞,获重组植物表达载体pBI21-PPK,从而为研究转PPK基因植物的聚磷能力奠定基础。; 曹访杨志红韩志萍李慧慧费佳玲; 关键词：大肠杆菌植物表达载体

蓝藻毒素影响植物生长发育及其机制研究进展被引量：3: 2015年; 随着工农业生产的发展,工业废水以及生活污水等导致水体富营养化日益加剧。在适宜的条件下,富营养化水体中的蓝藻可在短时间内迅速繁殖并聚集形成蓝藻水华,某些水华蓝藻能产生蓝藻毒素。蓝藻毒素不仅会对植物和水生动物的生长发育产生影响,而且会对人类的健康产生潜在危害。文章介绍了蓝藻毒素及其危害,重点围绕蓝藻毒素对植物生长发育的影响及其机理的研究状况进行了综述,为进一步研究蓝藻毒素影响植物生长发育机制提供信息。国内外的研究表明,蓝藻毒素影响许多植物的种子发芽、根系和地上部的生长,并在植物组织中积累,从而影响植物的产量和品质。蓝藻毒素影响植物生长发育的机理研究主要集中在组织结构损伤、蛋白磷酸酶的抑制、氧化胁迫和DNA损伤等方面,但传统的研究方法难以揭示植物复杂的蓝藻毒素胁迫响应机制,今后应加强分子生物学新技术(如芯片技术和深度测序技术等)在植物蓝藻毒素胁迫响应机制研究中的应用。; 陈建中郭铃汤玲燕张慧丽周慧丹凌露露; 关键词：蓝藻水华蓝藻毒素植物生长发育

芦竹对富营养化水体中磷及微生物的影响被引量：2: 2014年; 水体富营养化是我国水环境面临的一个突出问题。本研究对太湖主要水源之一苕溪河水取样,采用组培芦竹苗定植于水体,在实验室条件下研究了组培芦竹对于富营养化水体中磷的去除和对水体微生物(细菌、真菌和放线菌)的影响。结果表明,水体中种植芦竹使水体中磷含量显著降低,磷浓度由0.123 mg/L降低到0.002 mg/L,除磷效果显著;芦竹的定植对微生物有一定的影响。; 杨志红田前进吴诗谣何梦莹廖玉萍俞丽莎韩志萍; 关键词：芦竹富营养化磷微生物

乙酰丁香酮对组培芦竹不定芽诱导和生长的影响被引量：3: 2012年; [目的]研究组培条件下乙酰丁香酮(AS)对芦竹不定芽诱导和生长的影响,为芦竹农杆菌介导转基因过程中AS的使用提供依据。[方法]将芦竹外植体预培养3 d后接种到添加100、250、500、1 000、2 500、5 000μmol/L AS的培养基中培养,以不添加AS为对照,观察芦竹的不定芽诱导数及不定芽的高度。[结果]AS在一定的浓度下对芦竹外植体不定芽的诱导和生长都有影响。培养基中添加1 000～2 500μmol/L AS,对芦竹的生长有显著的促进作用;添加AS对芦竹不定芽的诱导有抑制作用,浓度范围1 000～5 000μmol/L与100～500μmol/L相比,对芦竹不定芽诱导的抑制作用显著增强。[结论]AS浓度为100～500μmol/L为芦竹转基因过程中可以使用的合适浓度。; 周莉凡吴茜茜张丽娜汤慧琴韩志萍杨志红; 关键词：芦竹乙酰丁香酮不定芽

多聚磷酸盐激酶(PPK)基因植物表达载体的构建: 2012年; [目的]构建融合表达PPK和绿色荧光蛋白的融合表达载体pCAMBIA1302-PPK。[方法]根据GenBank中登录的大肠杆菌PPK基因序列(L03719)设计引物,以E.coli DH5α基因组DNA为模板,通过PCR扩增得PPK基因,然后用In-Fusion@HD Cloning Kit将PPK基因克隆到pCAMBIA1302载体的Nco I酶切位点。[结果]序列测定结果显示,pCAMBIA1302-PPK含有约2.0 kb的PPK基因片段,说明PPK基因已插入植物表达载体pCAMBIA1302的绿色荧光蛋白基因前。[结论]成功构建了融合表达PPK和绿色荧光蛋白的融合表达载体pCAMBIA1302-PPK。; 曹访杨志红韩志萍杨倩费佳玲; 关键词：大肠杆菌植物表达载体

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国家自然科学基金(31070451)