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温州市科技局科研基金(H20100070)
温州市科技局科研基金(H20100070)
- 作品数：4 被引量：5H指数：2
- 相关作者：潘晓东吴存造陈必成蔡勇夏鹏更多>>
- 相关机构：温州医学院附属第一医院华中科技大学更多>>
- 发文基金：温州市科技局科研基金浙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 同时检测人多瘤病毒和巨细胞病毒PCR技术的建立及在肾移植受者中的初步应用被引量：2
- 2013年
- 建立同时检测人多瘤病毒(BKV)和巨细胞病毒(CMV)载量的实时定量荧光PCR技术(FQ-PCR),并探讨其在肾移植术后感染监测中的应用。选择BKV和CMV核酸保守性序列作为靶基因,PCR扩增靶片段与质粒pcD-NA3.1(+)连接。通过测序技术对进行克隆筛选。提取质粒并采用10倍梯度稀释(5×103～107拷贝/mL)作为BKV和CMV核酸序列的标准品,并评价其灵敏度;采用对比正常人DNA、BKV阳性质控和CMV阳性质控评价其特异性;通过对标准品DNA分别进行批内和批间各20次重复实验,以其循环阈值(Ct)的变异系数(CV)评价其精密度。对480例肾移植受者外周血样本,进行FQ-PCR检测BKV和CMV DNA拷贝数,检测FK506血药浓度,并对两者进行相关性分析。重组质粒经测序检测显示含有靶BKV和CMV核酸序列。所建立的FQ-PCR方法,其最低检测下限均为5.0×103拷贝/mL的DNA标准品。正常人DNA的BKV和CMV拷贝数检测为阴性,而阳性对照能够发现荧光值显著变化,证实为针对靶DNA的特异性扩增;重复性检测显示批内差异分别为3.44%(BKV)和2.23%(CMV),批间差异分别为4.98%(BKV)和3.76%(CMV)。肾移植患者CMV感染的阳性率为27.08%(130/480),明显高于BKV的阳性率(13.33%,64/480,P<0.05),并且感染程度与免疫抑制剂FK506用量呈正相关。建立的同时检测BKV和CMV两种病毒载量的FQ-PCR方法具有快速、重复性好、灵敏的优点,可为临床监测肾移植术后病毒感染提供技术平台。
- 张纯武陈孝倩白永恒潘晓东王斯璐蔡勇夏鹏吴存造陈必成
- 关键词：巨细胞病毒多瘤病毒荧光定量PCR肾移植
- HLAMatchmaker软件在HLA配型中的应用原理及前景被引量：2
- 2013年
- 随着分子生物学技术的发展,HLA基因序列、氨基酸序列及蛋白质晶体空间结构逐步明确,使得可以运用计算机生物信息方法在移植术前HLA配型中发挥更为有效的作用。HLAMatchmaker软件是基于Excel软件开发,通过对供、受者HLA抗原氨基酸序列上的eplets进行比较,寻找合适的供者,提高移植术后受者生存率。运用此软件分析可避开基因错配位点,让群体反应性抗体高敏感性受者亦能接受移植。本文就HLAMatchmaker软件在HLA配型中的应用原理及前景展开综述。
- 张行潘晓东陈文伟吴存造蔡勇夏鹏杨亦荣郑少玲陈必成
- 关键词：HLAMATCHMAKER表位群体反应性抗体
- 器官移植中的适应现象
- 2013年
- 移植适应(accommodation)是指供者器官和组织在受者体内存活过程中获得抵抗供体特异性抗体(donor specific antibodies,DSAs)介导损伤的能力.20 多年前即有文献报道此现象,普遍出现在ABO 血型不相配(ABO incompatible,ABOi)的移植中[1-2],在异种移植和人类白细胞抗原(HLA)不相配的同种异体移植中也可发现.
- 吴存造蔡勇潘晓东张行夏鹏杨亦荣郭晖陈必成
- 关键词：器官移植移植免疫耐受抗体介导DONOR抗体滴度
- 移植受者人巨细胞病毒感染研究进展被引量：1
- 2013年
- 人巨细胞病毒(HCMV)是移植术后受者最易感染的机会性病毒之一。随着新型免疫抑制剂和抗病毒药物的研发,以及预防治疗和预先治疗的广泛应用,移植受者HCMV感染情况已经发生了显著变化。但HCMV感染仍然是引起移植受者近期和远期病变和死亡的重要因素。本文对HCMV感染基础研究、诊断技术和治疗的最新进展进行了综述。
- 梁勇潘晓东吴存造陈必成
- 关键词：人巨细胞病毒
