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杂合抗菌肽牛乳铁蛋白素-天蚕素在大肠杆菌中的高效表达及其活性鉴定被引量：3: 2012年; 【目的】菌株耐药性问题日益突出,研制新型安全高效的抗菌药物成为目前的研究热点之一。抗菌肽具有多种优良特性,高活性抗菌肽的开发及其重组表达对解决菌株耐药性问题具有重要意义。【方法】根据牛乳铁蛋白素与天蚕素的结构,设计一种新型的杂合抗菌肽牛乳铁蛋白素-天蚕素(LfcinB-Cecropin),根据Escherichia coli密码子偏爱性合成其编码基因,利用同尾酶法构建含有不同LfcinB-Cecropin基因片段拷贝数的重组表达载体,转化到E.coli BL21(DE3)进行重组表达。【结果】经IPTG诱导,LfcinB-Cecropin融合蛋白成功获得表达。经超声破碎、包涵体纯化、甲酸裂解后,获得具有明显抑菌活性的杂合肽LfcinB-Cecropin。【结论】获得一种高活性的新型抗菌肽LfcinB-Cecropin,并实现了在E.coli中的高效重组表达。; 宋雪莹冯兴军李静许文杉; 关键词：抗菌肽天蚕素

牛乳铁蛋白素-马盖宁杂合抗菌肽的设计、合成及抑菌活性被引量：8: 2011年; 根据抗菌肽牛乳铁蛋白素(Lfcin B)与马盖宁(Magainin)的核心功能序列,将Lfcin B(1-15)和Magainin(1-12)二者连接起来,设计一种新型杂合抗菌肽LFB15-MA12,采用固相化学合成法合成获得纯度大于95%的LFB15-MA12。微量肉汤稀释法测得LFB15-MA12对金黄色葡萄球菌ATCC25923、大肠杆菌ATCC25922、绿脓杆菌ATCC27853、鼠伤寒沙门氏菌C77-31四种细菌的最小抑菌浓度(Minimal inhibition concentration,MIC)分别为16、64、64和32μg·mL-1,在抑菌浓度范围内未表现出溶血活性。获得了一种具有较高抗菌活性且安全无毒的新型抗菌肽,为研究开发理想的新型抗菌肽分子提供了新思路。; 冯兴军李静赵晓宇宋雪莹许文杉

鸡源抗菌肽Fowlicidin-2在大肠杆菌中的重组表达及其生物学活性鉴定被引量：1: 2013年; 【目的】对抗菌肽Fowlicidin-2基因进行克隆与表达,并鉴定其生物学活性。【方法】根据抗菌肽Fowlicidin-2氨基酸序列,依照大肠杆菌(E.coli)密码子的偏爱性,人工设计合成其编码基因。与质粒pET-32a连接,构建重组表达载体,转化表达宿主菌E.coliBL21(DE3),IPTG诱导表达,融合蛋白经溴化氰裂解后进行纯化,测定重组抗菌肽的抑菌活性。【结果】Fowlicidin-2融合蛋白以包涵体形式表达,经溴化氰裂解后,成功释放出Fowlicidin-2,获得的重组Fowlicidin-2对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均有明显的抑菌效果。【结论】实现了抗菌肽Fowlicidin-2的重组表达,为抗菌肽的重组量化制备提供了理论基础与技术手段。; 许文杉冯兴军李晓冲邢丽维柳迪; 关键词：抗菌肽抑菌活性

抗菌肽FAPs在毕赤酵母中的重组表达研究被引量：4: 2013年; 将4种抗菌肽Fowlicidin-2、Cecropin B、Cecropin A(1-8)-Melittin(1-18)和Thanatin串联,并在每种抗菌肽N-末端加上Kex2蛋白酶裂解位点,根据毕赤酵母密码子偏爱性,化学合成四种抗菌肽(Fusion Antimicrobial Peptides,FAPs)编码基因,连接到pPICZαC载体中,构建分泌型重组表达载体并转化毕赤酵母。经甲醇诱导后,Tricine-SDS-PAGE分析获得与目蛋白大小一致特异表达蛋白条带,每升发酵液上清含量达到32 mg。初步鉴定FAPs对大肠杆菌(E.coli)ATCC25922、金黄色葡萄球菌(S.aureus)ATCC25923、鼠伤寒沙门氏菌(S.syphimurium)C77-31和绿脓杆菌(P.aeruginosa)ATCC27853均有抑菌活性,且对S.aureus ATCC25923活性最强,最小抑菌浓度MIC为8.0μg·mL-1。; 冯兴军李静宋雪莹许文杉邢丽维柳迪; 关键词：抗菌肽毕赤酵母 MIC

抗菌肽分子设计研究进展被引量：1: 2010年; 抗菌肽具有分子量小、热稳定性高、杀菌范围广、毒性低及无污染等特点。通过分子设计进一步提高抗菌肽活性是近年来研究的热点问题。文章对抗菌肽分子的设计主要原则、方法及其步骤进行了综述。; 宋雪莹冯兴军李静; 关键词：抗菌肽分子设计

抗菌肽及其重组表达系统研究进展被引量：5: 2010年; 抗菌肽作为一类具有多种生物学功能的小肽,具有分子量小、不含外源成分、不易产生耐药性等特性,成为近年来的研究热点。该文综述了抗菌肽的种类、作用机制及其重组表达系统等方面的研究进展,并对存在的热点问题进行了探讨。; 郭佳音赵晓宇冯兴军; 关键词：抗菌肽

抗菌肽酵母表达系统的研究进展被引量：3: 2011年; 抗菌肽是生物体内一类具生物活性的小分子多肽,由于从天然资源中提取成本高,得率低且化学合成价格昂贵,利用基因工程技术生产抗菌肽具有重要意义。酵母表达系统具有表达量高,利于产物分离纯化等优点,利用酵母表达抗菌肽具有很好的前景。本文综述了毕赤酵母表达系统表达抗菌肽的最新进展。; 李静冯兴军宋雪莹; 关键词：抗菌肽酵母表达

抗菌肽Lactoferricin B的原核表达及其纯化被引量：5: 2010年; 牛乳铁蛋白活性多肽(Lactoferricin B,LfcinB)是一种阳离子型抗菌肽,因其具有多种生物学功能,现已被认为具有能够替代传统抗生素的发展前景。然而,由于传统的分离制备方法存在诸多弊端,所以基于基因工程的原核表达技术在制备高纯度和高效表达的该蛋白方面具有极其深远的意义。研究旨在摸索出一套完整的利用原核表达技术制备LfcinB的分子生物学方法。依据大肠杆菌密码子偏爱性的原则,设计了LfcinB的基因序列,通过人工合成的方法获得该基因的优化序列,借助Bam HI和Sal I双酶切、连接等手段将其构建到原核表达载体pGEX-4T-2上,获得重组表达载体pGEX-4T-2-LCB,将该载体转化E.coli Rosetta(DE3)。使用IPTG诱导,结果发现LfcinB在大肠杆菌中表达量超过20%。通过一系列蛋白纯化技术分离得到纯度达到95%以上的LfcinB融合蛋白。抑菌试验结果表明,重组抗菌肽LfcinB融合蛋白具有很好的抑菌活性。研究结果为人们使用基因工程技术制备抗菌肽LfcinB提供了具有重要参考价值的技术路线和理论依据。; 赵晓宇冯兴军孟利强张淑梅王玉霞张先成; 关键词：抗菌肽融合蛋白原核表达

毕赤酵母重组表达抗菌肽Fowlicidins的研究进展: 2012年; 文章主要介绍了Fowlicidins的抗菌特性和机制,以及其在毕赤酵母中的表达。; 许文杉冯兴军; 关键词：毕赤酵母

乳酸菌重组表达抗菌肽研究进展: 2011年; 本文对乳酸菌表达系统的载体、筛选标记及表达形式进行概述,阐述了抗菌肽在乳酸菌中重组表达的研究进展以及乳酸菌表达抗菌肽的优势和存在的问题。; 许文杉冯兴军; 关键词：乳酸菌抗菌肽基因工程

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