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河北省自然科学基金(C2007001058)
作品数:
2
被引量:2
H指数:1
相关作者:
刘洁
张正茂
单保恩
张超
张风华
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相关机构:
河北省人民医院
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作者
2篇
张风华
2篇
张超
2篇
单保恩
2篇
张正茂
2篇
刘洁
1篇
陈书诚
1篇
王喜梅
传媒
2篇
中华肿瘤杂志
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1篇
2009
1篇
2008
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表达CD40L基因的卵巢癌细胞诱导树突状细胞成熟及分泌Th1型细胞因子的作用机制
被引量:2
2008年
目的探讨转染CD40L cDNA的卵巢癌细胞株OVHM对树突状细胞(DC)成熟、分化的影响及诱导其分泌细胞因子的机制。方法采用脂质体转染法将鼠全长CD40L基因转染人小鼠卵巢癌细胞株OVHM中,用C418筛选出表达CD40L基因的抗药性克隆细胞(CD40L-OVHM)。应用免疫磁珠分选并纯化小鼠骨髓DC。将DC与转染和未转染CD40L cDNA的OVHM细胞混合培养,流式细胞术检测DC细胞表面人主要组织相容性复合物Ⅰ类分子(MHC-Ⅰ)、Ⅱ类分子(MHC-Ⅱ)、CD80、CD86和CCR7的表达,逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)检测共培养细胞中自细胞介素(IL)-12、IL-23、IL-27、IL-18、γ干扰素(IFN-γ)、Mig基因的表达。结果DC与CD40L—OVHM细胞混合培养后可形成集落,且上调了DC细胞MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ、CD80、CD86、CCR7的共刺激分子和黏附分子的表达。在DC+CD40L-OVHM组可检测到细胞因子IL-12、IL-23、IL-27、IL-18、IFN-γ、Mig基因的表达,而在DC组、DC+0VHM组、CD40L-OVHM组、OVHM组未检测到这些基因的表达。结论表达CD40L的卵巢癌细胞促进了DC的成熟,诱导了Th1型细胞因子的分泌,这可能是转染CD40L基因的卵巢癌细胞产生抗肿瘤效应的机制之一。
张正茂
张风华
王喜梅
张超
刘洁
顾来梅
李全海
单保恩
田川雅敏
关键词:
CD40L
树突状细胞
细胞因子
转染CD40配体的卵巢癌细胞株OVHM抗卵巢癌肝转移机制的研究
2009年
目的探讨转染CD40配体(CD40L)的卵巢癌细胞株OVHM(CIMOL—OVUM)体内抗卵巢癌肝转移的可能机制。方法6~8周龄的C57BL/6N×C3H/He杂交一代(B6C3F1)雌性小鼠5只,经小鼠脾脏内接种OVHM,应用HE染色法验证小鼠肝脾转移模型是否建立成功。将OVHM细胞、空载体DNA—pMKITneo—OVHM细胞和CD40L—OVHM细胞接种于B6C3F1小鼠的脾脏,应用流式细胞术,分析荷瘤小鼠脾细胞CD11C分子的表达情况;应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法,检测荷瘤小鼠脾脏细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的杀伤活性;应用酶联免疫吸附试验(ELISA),检测荷瘤小鼠外周血血清中干扰素(IFN)-γ、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-12、IL-4和IL—10的含量,并且观察小鼠脾脏和肝脏的成瘤情况及小鼠生存时间。结果经病理学证实,卵巢癌肝脾转移动物模型建立成功。CD40L—OVHM组中小鼠脾细胞CD11C阳性细胞率明显高于OVHM组和转染空载体DNA—pMKITneo—OVHM组。CD40L—OVHM组小鼠脾脏内CTL的特异性杀伤活性明显增强,小鼠外周血血清中IFN-γ、TNF-α和IL-12的含量明显升高,而IL-4和IL-10的含量则明显降低,与OVHM组和转染空载体DNA—pMKITneo—OVHM组相比,差异均有统计学意义(P〈0.05)。CIMOL—OVHM组小鼠的肝脏和脾脏重量均明显低于OVHM组和转染空载体DNA-pMKITneo—OVHM组,并且小鼠的生存期也明显延长(P〈0.05)。结论转染CD40L cDNA的卵巢癌细胞可促进脾脏树突状细胞(DC)的成熟和分化,增强脾脏CTL的特异性杀伤活性,诱导Th1型细胞因子的分泌,抑制Th2型细胞因子的分泌,这可能是CIMOL基因体内抗卵巢癌肝转移的机制之一。
张正茂
刘洁
张风华
顾来梅
张超
陈书诚
康山
单保恩
关键词:
CD40配体
卵巢肿瘤
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