辽宁省教育厅资助项目(051525)
- 作品数：4 被引量：7H指数：2
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- 磷酸化组蛋白H3--检测心肌细胞有丝分裂指数的可靠指标被引量：3
- 2008年
- 目的采用磷酸化组蛋白H3鉴定心肌细胞有丝分裂,为研究心肌细胞增殖机制奠定形态学基础。方法对H9c2(2-1)大鼠心肌细胞进行培养,利用免疫荧光双重染色技术,用横纹肌肌动蛋白IgM单克隆抗体标记心肌细胞,用磷酸化组蛋白H3 IgG单克隆抗体标记有丝分裂的染色体,同时用Hochest 33342显示细胞核,荧光显微镜观察并摄片。结果心肌细胞胞质呈红色荧光,有丝分裂的染色体呈现不同形状的绿色荧光,胞核为蓝色。结论磷酸化组蛋白H3是观察和鉴别心肌细胞有丝分裂的可靠指标。
- 邸菁张凌志柏树令
- 关键词：有丝分裂磷酸化组蛋白H3
- Polo样激酶1在大鼠心肌细胞分化过程中的表达被引量：3
- 2008年
- 目的通过检测polo样激酶1(plk1)在大鼠生后不同发育阶段心肌组织中的表达,探讨心肌细胞退出细胞周期的相关机制。方法生后0d、3d、7d、10d、2周和成年健康Wistar大鼠各5只,采用针对横纹肌肌动蛋白和磷酸化组蛋白H3的免疫荧光双标方法,测定各组大鼠心肌细胞有丝分裂指数;用RT-PCR和免疫印迹技术,检测心肌组织plk1 mRNA和蛋白表达的改变。结果大鼠生后0d心肌细胞有丝分裂指数[(0.905±0.087)%]是生后2周[(0.372±0.094)%]的2.4倍(P<0.01);plk1基因和蛋白在大鼠生后表达明显下调,2周后未检测到表达。结论plk1基因的表达下调与大鼠心肌细胞增殖停滞密切相关,在大鼠心肌细胞退出细胞周期的调控机制中发挥重要作用。
- 邸菁柏树令张凌志高杰佟浩
- 关键词：POLO样激酶1心肌细胞细胞周期调控免疫印迹法免疫荧光
- 大鼠生后不同发育阶段心肌细胞有丝分裂指数检测被引量：1
- 2007年
- 目的检测大鼠生后不同发育阶段心肌细胞的有丝分裂指数,为研究心肌细胞增殖机制奠定形态学基础。方法取大鼠生后不同发育阶段心肌组织行冰冻切片,采用免疫荧光双重染色方法,以横纹肌肌动蛋白单克隆抗体标记心肌细胞,以磷酸化组蛋白H3单克隆抗体标记有丝分裂的染色体,同时用Hochest33342显示细胞核,荧光显微镜观察并拍照。结果心肌细胞胞质呈红色荧光,有丝分裂的染色体呈现不同形状的绿色荧光,胞核为蓝色;大鼠生后零天心肌细胞有丝分裂指数(0.905±0.087%)是生后2w(0.372±0.094%)的2.4倍(P<0.01),4w至成年几乎为零。结论大鼠出生2w后心肌细胞逐渐丧失增殖能力,由增生性生长向肥大性生长转化。
- 邸菁陈双叶赵晨超张凌志柏树令
- 关键词：有丝分裂指数磷酸化组蛋白H3
- 酶标荧光-97检测中性粒细胞碱性磷酸酶活性的新方法
- 2007年
- 目的用一种新试剂酶标荧光-97(ELF-97)检测人血中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)活性,观察NAP阳性细胞数及阳性颗粒形态和分布。方法用Ficoll为介质的等密度沉降分离法从全血中分离出中性粒细胞,固定后以ELF-97为底物进行酶细胞化学反应,荧光/微分干涉相差显微镜观察并摄片。结果荧光显微镜下可见中性粒细胞内有明亮的黄绿色荧光颗粒,颗粒在细胞内的分布均匀,大小不一,51例健康成人血样NAP阳性率为(94.102±3.133)%。结论ELF-97荧光检测法操作简便,灵敏度高,产物不容易扩散,重复性好,结果精确,可作为不同用途的碱性磷酸酶检测手段。
- 邸菁张凌志柏树令赵海花
- 关键词：中性粒细胞碱性磷酸酶酶细胞化学
