教育部科学技术研究重点项目(108047)
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 相关作者：甄园丽李江杨南扬李晓萌张俊芳更多>>
- 相关机构：东北师范大学吉林大学口腔医院更多>>
- 发文基金：吉林省科技厅国际合作项目教育部科学技术研究重点项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 水通道蛋白AQP1/GST融合蛋白的原核表达及其抗体的制备
- 水通道蛋白(aquaporin,AQP1)是近年来新分离出的一族跨膜蛋白,广泛存在于原核和真核生物细胞的细胞膜上,主要介导自由水分子的被动跨膜转运,对保持细胞内外液环境的稳态平衡起着重要的作用。到目前为止,已发现哺乳动物...
- 杨南扬李江王中南关新刚张淑芝李晓萌
- 文献传递
- pEGFP-N1-Cameleons质粒稳定转染前列腺癌pc3细胞系的建立及其ZnSO4诱导下Ca2+浓度变化的研究
- Ca作为细胞内的信息传递物质,在很多生理、病理过程中都发挥了重要的作用,如细胞分化、细胞跨膜信号传导、受精,还介导多种可兴奋细胞的兴奋—偶联,同时通过钙调蛋白(Calmodulin,CaM)参与细胞生长和分化的调控。近期...
- 王中南李江张俊方甄园丽李晓萌
- 文献传递
- PIAS3的Myc融合蛋白真核表达重组质粒的构建
- 2009年
- 目的:构建PIAS3(活化型STAT3抑制蛋白)的Myc融合蛋白真核表达重组质粒,并表达融合蛋白Myc-PIAS3。方法:采用PCR方法,扩增鼠PIAS3基因全长cDNA编码区序列。将该1851bp的特异性片段连接到T载体上,将其亚克隆至pCMV-Myc真核表达载体的SalⅠ和NotⅠ位点之间。将pCMV-Myc-PIAS3重组质粒转染前列腺癌PC3细胞,利用Myc抗体通过Western blotting法检测融合蛋白Myc-PIAS3的表达。结果:重组pCMV-Myc-PIAS3质粒通过酶切和测序鉴定了其正确性。EcoRⅠ酶切鉴定时有4357和1318bp2条带,XbaⅠ酶切鉴定时有3291bp和2384bp2条带,与预期结果一致。测序结果显示,13个氨基酸Myc在N端,然后是阅读框架正确的PIAS3的基因序列。pCMV-Myc-PIAS3重组质粒转染PC3细胞,利用Myc抗体通过Western blotting法检测融合蛋白Myc-PIAS3的表达,在相对分子质量68000处检测到特异的蛋白表达条带。结论:成功构建pCMV-Myc-PIAS3重组质粒,并表达融合蛋白Myc-PIAS3。
- 李江甄园丽杨南扬张俊芳王中南李晓萌
- 关键词：PIAS3重组质粒
- 水通道蛋白1在肝癌细胞增殖和迁徙过程中的作用的分子机制研究
- 水通道蛋白(Aquaporin,AQP)是一类选择性高效转运水分子的细胞膜通道蛋白。它广泛表达于动物、植物及微生物体的各种组织细胞,在体内液体转运生理中发挥重要作用。哺乳动物水通道蛋白家族有13个成员。水通道蛋白1(AQ...
- 张爱丽Zohra Zaknrou F李江王妍青李晓萌
- 文献传递
- pCMV-Myc-PIASxβ重组质粒的构建与蛋白表达被引量：3
- 2009年
- 目的:通过基因重组方法构建pCMV-Myc-PIASxβ质粒,在真核细胞中高效表达重组蛋白并进行检测。方法:用SalⅠ和NotⅠ将PIASxβ片段从pGADT7载体中酶切后,利用DNA重组技术将其定向插入pCMV-Myc载体中。获得正确重组质粒后,瞬转CHO细胞系,用Western blotting检测Myc-PIASxβ重组融合蛋白表达。结果:经过酶切,片段回收,连接转化,获得重组质粒。重组pCMV-Myc-PIASxβ克隆通过酶切和测序鉴定其正确性。EcoRⅠ酶切鉴定,pCMV-Myc-PIASxβ为一条大小5 641 bp的条带;XbaⅠ酶切鉴定,pCMV-Myc-PIASXβ为2条大小分别为3 291和2 349 bp的条带,符合预计大小。Western blotting检测证实,在相对分子质量68 000处(PIASxβ融合蛋白)有特异的蛋白表达条带,与重组质粒相符。结论:成功构建了pCMV-Myc-PIASxβ重组质粒,为深入研究PIAS家族的功能奠定良好的基础。
- 李江张俊芳甄园丽杨南扬李晓萌
- 关键词：重组质粒基因表达
