上海市科委科技攻关项目(07dz19505)
- 作品数:2 被引量:7H指数:1
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- 大肠癌噬菌体展示肽库的构建及大肠癌早期检测分子的筛选
- 2010年
- 目的构建大肠癌噬菌体展示肽库,筛选用于大肠癌早期检测的分子标志。方法选取30例第二军医大学长海医院肛肠外科手术后立刻冻存的大肠癌组织标本构建T7噬菌体展示肽库;用结合protein-A/G的琼脂糖珠分别富集大肠癌组及非肿瘤对照组血清中的抗体进行5轮亲和筛选,富集大肠癌相关肽;随机挑取5轮筛选后的2000个噬菌体克隆,用ELISA方法进一步筛选与大肠癌患者血清和对照血清反应性存在差异的大肠癌相关标志物克隆,进行基因序列测定。应用通过Chilibot文献挖掘方法预测各克隆的蛋白功能,反证筛选结果。结果 (1)所建大肠癌噬菌体展示肽库的滴度为3.0×106pfu,经PCR鉴定其重组率为60%,库容为1.8×106pfu。(2)共筛选出18个有意义的噬菌体,测序后,预测其蛋白功能,其中12个与肿瘤的发生相关。结论应用ELISA对肿瘤重组抗原的噬菌体展示肽库进行筛选的方法 ,可以用来发现差异表达的抗原。所筛选出的噬菌体克隆所表达的抗原可用于早期筛检大肠癌。
- 吴玲玲曹付傲常文军傅传刚曹广文
- 关键词:肽库结直肠肿瘤
- 结直肠手术后吻合口出血诊治进展被引量:7
- 2014年
- 结直肠手术术后吻合口出血是较为严重的并发症,如未给予正确、及时的处理,患者可能出现失血性休克甚至危及生命,因此应引起结直肠外科医师的重视。笔者针对结直肠手术后吻合口出血的发生率、危险因素、预防措施进行总结,并探讨了各种治疗方式的适应证及特点。
- 王颢赵权权
- 关键词:结直肠外科手术出血