国家自然科学基金(81001306) 作品数:8 被引量:13 H指数:2 相关作者: 伍衡 褚忠华 曾育杰 刘璐 李琳 更多>> 相关机构: 中山大学孙逸仙纪念医院 南阳市中心医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家教育部博士点基金 广东省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
不同细胞因子诱导对树突状细胞体外分化的影响 被引量:3 2011年 目的观察不同细胞因子诱导对于体外培养的树突状细胞(DC)免疫刺激活性的影响。方法通过1000U/ml人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM—CSF)和500U/ml白细胞介素(IL)4体外诱导的人单个核细胞来源的DC,经1000U/ml肿瘤坏死因子(TNF)-α、1mg/L脂多糖(LPS)、1mmol/L丁酸钠、细胞因子鸡尾酒法诱导成熟,分别以流式细胞仪、FITC—Dxtran内吞检测、混合淋巴细胞反应(MLR)、酶联免疫吸附试验(ELISA)检测DC的表面标志、内吞能力、刺激淋巴细胞增殖能力和IL-12分泌的变化。结果鸡尾酒法诱导下的DC成熟标志显著上调,内吞能力减弱186.74±38.66,刺激淋巴细胞增殖能力增强18.23±2.22,并且IL-12的分泌能力增加(656.18±38.52)ng/L,说明其显著促进DC成熟。而丁酸钠诱导下的各项成熟指标均下调,导致DC免疫刺激源性减弱。结论细胞因子鸡尾酒法是诱导DC成熟的最佳方法;而丁酸钠可以抑制DC成熟,改变DC的免疫状态。 刘璐 李琳 闵军 伍衡 王捷 曾育杰 褚忠华关键词:树突状细胞 细胞因子 丁酸钠 术前静脉注射羟乙基淀粉对老年胃癌根治手术患者血流动力学及炎症因子水平的影响 被引量:2 2015年 目的探讨术前静脉注射羟乙基淀粉对老年胃癌根治手术患者血流动力学及炎症因子的影响。方法选取该院2011年10月至2013年12月老年胃癌根治手术患者156例,采用随机数字表法分为两组,78例患者术前静脉注射乳酸林格液为对照组,78例患者术前静脉注射羟乙基淀粉为观察组,比较两组患者不同时间点(静脉注射前T0、麻醉后5 min T1、麻醉后30 min T2、麻醉后60 min T3、手术结束时T4)血流动力学指标治疗前后凝血指标(凝血酶原时间、凝血酶时间、部分活化凝血活酶时间)、生化指标〔血红蛋白(Hb)、血细胞比容(Hct)、血小板(Plt)计数〕、炎症因子〔肿瘤坏死因子(TNF)α、干扰素(IFN)γ、白细胞介素(IL)-10〕的改变情况。结果对照组患者心率、平均动脉压在T1时均显著下降,而后逐渐增加;中心静脉压在T1时显著增加,而后逐渐降低。观察组患者心率、平均动脉压在T1、T2、T3、T4时均明显高于对照组,中心静脉压在T1、T2、T3、T4时明显低于对照组。治疗后,两组患者凝血酶原时间、凝血酶时间均显著增加。观察组患者Hb、Hct、Plt、TNFα、IFNγ和IL-10水平均显著降低,Plt、TNFα、IFNγ和IL-10水平均明显低于对照组、部分活化凝血活酶时间明显高于对照组(P<0.05)。结论术前静脉注射羟乙基淀粉有助于稳定老年胃癌根治手术患者的血流动力学指标,显著降低炎症因子水平。 贾会文 刘向业 张磊 王铭关键词:羟乙基淀粉 胃癌根治手术 血流动力学 细胞因子信号传导抑制因子-1在树突状细胞介导T细胞分化中的作用 2012年 目的观察细胞因子信号传导抑制因子-1(SOCS1)在不同诱导方法下树突状细胞(DC)的表达及其对T细胞刺激活性的影响。方法1000U/ml重组人粒细胞.巨噬细胞集落刺激因子(GM.CSF)和500U/ml白细胞介素(IL)-4体外诱导的人外周血单个核细胞来源的DC,经1mmol/L丁酸钠、1mg/L脂多糖(LPS)、细胞因子鸡尾酒法诱导成熟,分别以流式细胞仪、酶联免疫吸附试验(ELISA)、混合淋巴细胞反应(MLR)检测DC表面标志、IL-12、IL-10分泌和刺激淋巴细胞增殖能力。Westernblot和实时荧光定量聚合酶链反应(Real-timePCR)分别检测各组SOCSl蛋白水平及mRNA的表达。结果丁酸钠诱导的不成熟DC的SOCSl蛋白表达最高(1.61±0.22,P〈0.05);其SOCSlmRNA表达差异倍数(1.58±0.11)显著高于成熟组DC(0.99±0.04、1.27±0.05,P〈0.05)。高表达SOCS1的DC刺激淋巴细胞增殖的能力(1.53±1.04),IL-12分泌量(142.79d-15.61)较成熟DC显著降低(P〈0.05);而IL-10分泌(3.29±0.21)较成熟DC比较显著升高(P〈0.05)。结论SOCSl是调节DC介导的T细胞分化的关键因子。 刘璐 李琳 伍衡 王捷 闵军 褚忠华关键词:树突状细胞 T淋巴细胞 扭曲肉芝甲酯对人结肠癌LoVo细胞生长的抑制作用及其机制 被引量:1 2012年 目的探讨扭曲肉芝甲酯抗结肠癌LoVo细胞增殖活性及其机制。方法将LoVo细胞随机分为对照组和处理组(10、30、50umol/L3个亚组)。对扭曲肉芝甲酯处理后LoVo细胞凋亡率、细胞周期、凋亡蛋白表达的改变进行定量分析。结果经10、30、50umol/L扭曲肉芝甲酯处理24h后,LoVo细胞凋亡率分别为(2.32±0.93)%、(11.03±0.14)%和(16.29±1.98)%,对照组凋亡率为(2.09±0.97)%,而50umol/L扭曲肉芝甲酯处理0、6、12、24h后凋亡率分别为(2.67±0.97)%、(5.08±1.03)%、(5.04±0.83)%和(13.50±1.16)%(P〈0.05)。荧光显微镜下细胞呈现典型的凋亡性改变;扭曲肉芝甲酯在0、10、50及100umoL/L时将LoVo细胞抑制在G2/M期(9.53±3.97)%、(10.26±1.89)%、(11.36±2.56)%、(15.39±1.56)%(P〈0.05),该期的比例逐渐增高;Westernblot法结果显示扭曲肉芝甲酯处理后结肠癌kVo细胞的半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-8、Caspase-3表达升高。结论扭曲肉芝甲酯以浓度依赖性和时间依赖性的方式抑制结肠癌LoVo细胞增殖,抑制细胞周期G2/M期,通过Caspase-8/Caspase-3来诱导细胞凋亡。 李守峰 刘璐 伍衡 来伟 曾育杰 许鹤洋 褚忠华关键词:结肠癌 细胞增殖 脱噬作用 腹腔镜结直肠癌切除术后应用羟乙基淀粉的临床研究 被引量:1 2011年 目的探讨腹腔镜结直肠癌术后应用羟乙基淀粉(130/0.4,6%)对于患者术后恢复的影响。方法选自中山大学孙逸仙纪念医院胃肠外科2011年1月至2011年7月腹腔镜结直肠癌切除术共45例,随机分为羟乙基淀粉组(23例)和血清白蛋白组(22例)。术后3天分别连续使用羟乙基淀粉(130/0.4,6%)500ml/d和人血白蛋白10g/d。比较两组术前及术后1d、3d、5d患者心率(P)、中心静脉压(CVP)、平均动脉压(MAP)、凝血功能(PT、APTT)、红细胞压积(HCT)、肌酐(Cr)、血清白蛋白以及术后排气时间和术后住院天数。结果两组患者术前临床资料、肿瘤分期、病理分型具有可比性(P>0.05)。与术前和血清白蛋白组相比,羟乙基淀粉组CVP在术后1d、3d显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);羟乙基淀粉组HCT在术后1d、3d、5d与术前及血清白蛋白组比较降低,差异有统计学意义(P<0.05)。而两组在凝血功能(APTT、PT)、MAP、HR、Cr、白蛋白水平、术后住院时间、及排气时间方面比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论腹腔镜结直肠癌手术患者围术期应用羟乙基淀粉(130/0.4,6%)可以维持血流动力学稳定、提高血浆胶体渗透压、早期应用可以有效节约白蛋白的使用。 刘璐 曾育杰 伍衡 关玉峰 来伟 褚忠华关键词:结直肠癌 腹腔镜手术 羟乙基淀粉 TRAF6在人PBMC来源的树突状细胞成熟中的作用 被引量:1 2011年 目的:探讨肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)在不同成熟度树突状细胞(DCs)中的表达及其对DCs免疫刺激活性的影响。方法:重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)和重组人白细胞介素4(IL-4)体外诱导的人外周血单个核细胞来源的DCs,经TNF-α、LPS和细胞因子鸡尾酒法诱导成熟,分别以流式细胞术、ELISA和混合淋巴细胞反应(MLR)检测DCs的表面标志、IL-12分泌和刺激淋巴细胞增殖能力。Western blotting和real-time PCR分别检测各组TRAF6蛋白水平及mRNA的表达。结果:各组DCs均表达TRAF6,成熟状态最佳的鸡尾酒诱导下DCs的TRAF6蛋白表达最高。高表达TRAF6的DCs可促进IL-12的分泌,增强刺激淋巴细胞增殖的能力。结论:TRAF6是调节DCs激活和成熟的关键因素。 刘璐 李琳 闵军 王捷 伍衡 曾育杰 陈双 褚忠华关键词:树突细胞 肿瘤坏死因子受体相关因子 不同浓度丁酸钠诱导未成熟树突状细胞分化的免疫学功能比较 2011年 目的探讨不同浓度丁酸钠诱导对于体外培养的树突状细胞(dendritic cells,DC)免疫刺激活性的影响。方法通过重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和人重组白细胞介素4(IL-4)体外诱导的人单个核细胞来源的DC,按照0.5、0.75、1、1.25、1.5 mmol.L-15种浓度丁酸钠体外诱导分化,并分别以流式细胞仪,FITC-dxtran内吞检测、MLR、ELISA法检测DC的凋亡率、表面标志、内吞能力、刺激淋巴细胞增殖能力和IL-10、IL-12、INF-γ分泌的变化。结果 1.25、1.5 mmol.L-1丁酸钠有较高的细胞毒性。0.5、0.75、1 mmol.L-1丁酸钠均可抑制DC表面成熟表型的表达。其中以1.0 mmol.L-1丁酸钠诱导下DC不成熟表型表达效果最稳定。虽然不同浓度丁酸钠诱导下的DC内吞能力无显著差异(P>0.05),但1.0 mmol.L-1丁酸钠与0.5、0.75 mmol.L-1丁酸钠相比较其IL-10分泌量(3.29±0.21)最大,抑制淋巴细胞增殖能力(1.53±1.04)最强(P<0.05)。结论 1.0 mmol.L-1丁酸钠是诱导DC稳定不成熟状态的最佳浓度。 刘璐 李琳 闵军 王捷 曾育杰 伍衡 陈双 褚忠华关键词:树突状细胞 丁酸钠 免疫耐受 结直肠腺癌组织神经内分泌分化对预后的影响 被引量:5 2014年 目的 探讨伴神经内分泌分化(NED)细胞结直肠腺癌的临床病理特点及预后.方法 分析中山大学孙逸仙纪念医院胃肠外科同一治疗组2008年收治的82例结直肠腺癌病例的临床资料,应用免疫组织化学方法,重新对这些病例进行神经内分泌特异性指标嗜铬粒蛋白A(CgA)和突触素(Syn)染色并进行生存分析.结果 本组82例患者中,有15例(18.3%)患者出现CgA和/或Syn阳性.其中TNM分期Ⅱ期患者6例,Ⅲ期6例,Ⅳ期3例;高分化6例,中分化6例,低分化3例;肿瘤位于直肠4例,乙状结肠4例,降结肠1例,横结肠1例,升结肠5例.NED组复发转移率为66.7%,而无NED组为29.8%,两者差异有统计学意义(,=7.16,P<0.01).并且NED组结直肠癌患者的5年生存率为26.7% (4/15),明显低于无分化组的5年生存率[52.2%(35/67)],两者差异有统计学意义(x2=4.506,P<0.05).结论 结直肠腺癌出现NED,是本病预后不良的一个重要影响因素,免疫组织化学染色对诊断具有参考价值. 曾育杰 褚忠华 王林 来伟 许鹤洋 张旸 伍衡关键词:结直肠腺癌 神经内分泌 分化 预后