江苏省产学研联合创新资金项目(BY2009110)
- 作品数：3 被引量：21H指数：3
- 相关作者：段作营李华钟金光泽陈翰李祥更多>>
- 相关机构：江南大学南京中医药大学更多>>
- 发文基金：江苏省产学研联合创新资金项目国家自然科学基金江苏高校优势学科建设工程资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 重组融合人血清白蛋白-人白介素-2 C125A突变体在毕赤酵母中的表达被引量：13
- 2010年
- 构建编码人血清白蛋白-人白介素-2 C125A的重组表达质粒,在Pichia pastorisGS115中表达,获得具有较高IL-2活性的融合蛋白。设计并合成符合P.pastoris密码子偏好,且含有C125A突变的IL-2编码基因IL-2m,通过酶切连接方法将其与人血清白蛋白(HSA)的编码基因连接为融合蛋白HSA-IL2m的编码基因。克隆到表达质粒pPIC9K中,电击转化P.pastorisGS115感受态细胞,获得重组P.pastorisGS115/pPHIm基因工程菌。摇瓶发酵获得分泌表达产物。结果:Western blot鉴定结果显示该融合蛋白与IL-2、HSA的抗体都能发生免疫反应。经脱盐、冻干制备的粗蛋白的IL-2生物学活性为1.51×106IU/mg。结论:在P.pastorisGS115中成功表达了具有人白介素-2生物学活性的HSA-IL2m融合蛋白。
- 金光泽段作营张莲芬金坚李华钟
- 关键词：人血清白蛋白毕赤酵母融合蛋白
- 板蓝根药效活性部位化学成分的研究被引量：6
- 2014年
- 目的研究板蓝根水提醇沉部分的化学成分。方法板蓝根水提醇沉物经大孔树脂、硅胶、SephadexLH-20、反相C18多种色谱方法进行分离纯化，根据理化性质和波谱数据鉴定化合物结构。结果从板蓝根中分离出17个化合物，分别鉴定为：环（酪氨酸-亮氨酸）二肽（1）、肌-肌醇（2）、5-甲氧基-8-羟基补骨脂素（3）、对羟基苯甲酸（4）、（1’R，2’R，3’S，4’R）-1，2，4-三唑核苷（5）、依靛蓝酮（6）、靛蓝（7）、（9E，2S，3R）-3-羟甲基-2-N-（2＇-羟基二十九碳酰）-9-十三碳硝氨醇烯（8）、尿嘧啶（9）、（＋）-异落叶松树脂醇（10）、7S，8R，8’R-（＋）-落叶松树脂醇-4，4＇-二-0-B-D-吡喃葡萄糖苷（11）、吲哚-3一乙腈-6-0-p-D-吡喃葡萄糖苷（12）、紫丁香苷（13）、鸟苷（14）、腺苷（15）、蔗糖（16）、胡萝卜苷（17）。结论化合物1～5为首次从该植物中分离得到。
- 潘以琳陈翰李进李祥陈建伟
- 关键词：板蓝根化学成分
- 双抗体夹心ELISA定量检测IL-2-HSA融合蛋白被引量：3
- 2010年
- 以抗人IL-2多克隆抗体为包被抗体,以IL-2-HSA融合蛋白为夹心抗原,以辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗HSA单克隆抗体为检测抗体,建立了一种定量测定完整的IL-2-HSA融合蛋白的双抗体夹心ELISA方法。包被抗体和检测抗体的最佳工作浓度分别为为2μg/mL和0.5μg/mL,方法的线性检测范围39.06～1250ng/mL,标准曲线回归方程为y=0.4429x-1.1433,r=0.9966,灵敏度可达10.25ng/mL,批内、批间变异系数分别为6.40%和7.81%,发酵上清液中回收率为98.13%～102.94%,与IL-2、HSA基本无交叉反应,健全性分析表明发酵液及小鼠血清组分及稀释倍数对该方法无影响。该方法可用于该融合蛋白的发酵过程优化、分离纯化工艺、后期药动学、临床研究等的定量检测。
- 张红梅李波段作营雷楗勇金坚李华钟
- 关键词：双抗体夹心ELISA融合蛋白
