国家自然科学基金(81171141)
- 作品数：13 被引量：34H指数：4
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- SDF-1α促进骨髓间充质干细胞在脑缺血／再灌注大鼠海马中的存活与分化
- 2012年
- 目的观察基质细胞衍生因子1α（SDF-1α）对脑缺血／再灌注大鼠海马中移植的骨髓问充质干细胞（BMSCs）的作用。方法培养成年大鼠BMSCs并用BrdU标记，“四血管阻断法”制备大鼠脑缺血／再灌注模型。造模成功大鼠复灌24h后分为模型对照组、BMSC组和SDF-1α＋BMSC组。后两组经尾静脉分别注射BMSCs或SDF-1α＋BMSCs，模型对照组同法注射等体积生理盐水。分别于注射后存活1、3、7天和1个月时，应用免疫荧光化学法检测大鼠海马区域BrdU标记阳性细胞的表达情况。结果免疫荧光染色显示：①模型对照组大鼠在移植不同时间点海马结构中均未见BrdU标记的阳性细胞，但BMSC组和SDF-1α＋BMSC组的BrdU标记阳性细胞数随移植时间延长而逐渐增多，且各时间点问差异均有统计学意义（P〈0．05）；②SDF-1α＋BMSC组移植后1、3、7天BrdU阳性细胞数均显著高于相应时间点的BMSC组（P〈0．05），其中7天时的差异最显著（P〈0．01），但1个月时两者差异无统计学意义（P〉0．05）。结论SDF—1α可显著促进BMSCs在脑缺血／再灌注大鼠海马中的存活与分化，提示SDF-1α在BMSCs移植治疗缺血性脑损伤过程中可起到促进作用。
- 王玉兰李爱娜张世春刘志安高殿帅徐铁军
- 关键词：基质细胞衍生因子1Α骨髓间充质干细胞再灌注海马
- 缺血／再灌注不同时间点大鼠海马基质细胞诱导因子1α和趋化因子受体4的表达变化
- 2012年
- 目的：研究脑缺血损伤后大鼠海马基质细胞诱导因子1α（SDF-1α）和CXCR4蛋白的表达变化情况。方法：运用免疫组织化学和免疫印迹检测SDF-1α和CXCR4的表达变化。结果：免疫组织化学显色显示，大鼠海马CA区和DG区均可见SDF-1α和CXCR4表达阳性的细胞，其胞质呈棕黄色，DG区主要表达于齿状回颗粒细胞下层。表达SDF-1α和CXCR4的阳性细胞数均随时间推移而增多。免疫印迹检测进一步表明，脑缺血／再灌后1、3、7d和1个月均可见SDF-1α及CXCR4蛋白表达条带，且SDF-1α的表达随时间而增高，与1d比较，复灌7d、1个月时表达差异有统计学意义；CXCR4蛋白表达也随复灌时间延长而增加，但各组之间的表达无差异。结论：缺血／再灌脑损伤后SDF-1α蛋白表达具有时间差异性，提示SDF-1α在缺血性脑损伤过程中可生成、释放，其与缺血性脑损伤之间存在一定的关系。
- 王玉兰符炜李爱娜徐红刘志安高殿帅
- 关键词：趋化因子受体4缺血再灌注海马
- 基质细胞衍生因子-1_α/CXCR4/CXCR7轴对骨髓间充质干细胞迁移的影响被引量：10
- 2014年
- 目的探讨基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)受体CXCR4、CXCR7在骨髓间充质干细胞(BMSCs)中蛋白和mRNA的表达;及SDF-1α/CXCR4/CXCR7轴对BMSCs迁移作用的可能机制。方法体外培养大鼠BMSCs,流式细胞术鉴定细胞表面抗原CD29、CD44和CD34。应用CXCR4特异性拮抗剂AMD3100及CXCR7中和抗体分别阻断CXCR4及CXCR7,通过Western blotting和RT-PCR分别检测BMSCs蛋白和mRNA的表达变化;Transwell法检测细胞迁移能力。本次实验分为单纯BMSCs组(A)、AMD3100预处理BMSCs组(B)、CXCR7中和抗体预处理BMSCs组(C)及AMD3100+CXCR7中和抗体预处理BMSCs组(D)。结果经鉴定第3代大鼠BMSCs中CD29和CD44均呈阳性表达,而CD34表达阴性。BMSCs中CXCR4、CXCR7蛋白和mRNA均有表达。与A组相比,B组及D组CXCR4及CXCR7蛋白表达明显受到抑制(P<0.05),C组只有CXCR7蛋白表达降低(P<0.05);各组CXCR4 mRNA和CXCR7 mRNA的表达差异均无显著性。SDF-1α可以诱导BMSCs迁移,与0μg/L组相比,10μg/L组和100μg/L组穿膜细胞数均显著增多(P<0.01),与10μg/L组相比,100μg/L组穿膜细胞数亦明显增多(P<0.01);AMD3100和CXCR7中和抗体均能抑制BMSCs的迁移作用(P<0.05),当两者同时作用时,抑制效应更为显著(P<0.05)。结论 BMSCs共表达CXCR4、CXCR7蛋白及mRNA;BMSCs的迁移具有SDF-1α浓度依赖性;SDF-1α/CXCR4/CXCR7轴介导BMSCs的迁移作用,CXCR4受体和CXCR7受体对BMSCs的迁移可能具有协同促进作用。
- 王玉兰何晓梅唐薇顾怡萍张世春汤曼徐铁军高殿帅
- 关键词：基质细胞衍生因子-1ΑCXCR4CXCR7
- SDF-1α/CXCR7促进BMSCs向缺血/再灌注大鼠海马CA1区迁移
- 2013年
- 目的:研究基质细胞衍生因子-1α(stromal cell derived-factor-1α,SDF-1α)及其受体CXCR7在介导骨髓间充质干细胞(bone marrow derived mesenchymal stem cells,BMSCs)向大鼠脑缺血区迁移的作用。方法:BMSCs的原代培养、四血管阻断脑缺血模型制备大鼠脑缺血模型、侧脑室移植组(培养基干预组、BMSCs组和CXCR7抗体预处理BMSCs组)、免疫组织化学和免疫荧光组织化学染色方法。结果:免疫组织化学染色结果显示:在各组大鼠海马CA1区细胞内可见不同程度的呈黄色或棕黄色颗粒的SDF-1α免疫阳性产物,主要表达在细胞胞质中,CXCR7蛋白则主要表达在胞核和胞膜中;与假手术组比较,BMSCs组和CXCR7抗体预处理BMSCs组SDF-1α和CXCR7的表达均升高(P<0.05)。免疫荧光组织化学结果显示:侧脑室注射BMSCs并移植48 h后,BMSCs组、CXCR7抗体预处理BMSCs组海马CA1区均有不同程度荧光标记的阳性细胞;与BMSCs组比较,CXCR7抗体预处理BMSCs组阳性细胞数降低(P<0.05)。结论:缺血/再灌注损伤后,促进了SDF-1α及CXCR7阳性产物的表达;同时SDF-1α/CXCR7能够促进BMSCs向损伤区域的迁移。
- 张世春何晓梅刘志安高殿帅徐铁军王玉兰
- 关键词：基质细胞衍生因子-1ΑCXCR7
- SDF-1α促进BMSCs对脑缺血／再灌注大鼠CA1区神经元的保护作用
- 2012年
- 目的观察基质衍生因子1α（SDF-1α）促进骨髓间充质干细胞（BMSCs）对脑缺血／再灌注大鼠CA1区神经元的保护作用。方法原代细胞培养BMSCs，传至第3代时以BrdU标记；以“四血管阻断”法制作大鼠脑缺血／再灌注模型，造模成功鼠随机分为模型对照组、BMSCs组和SDF-1α＋BMSCs组。后2组经尾静脉分别注射BMSCs或SDF1α＋BMSCs，模型对照组同法注射等量生理盐水，注射后分别存活1、3、7天和1个月，灌注固定制备石蜡切片，苏木精-伊红染色，光镜观察并计数各组大鼠海马CA1区锥体细胞在不同时间点的损伤表现。结果各组CA1区的形态异常细胞数高峰均出现于第3天，以后随时间延长而减少。但在各时间点内，BMSCs组和SDF-1α＋BMSCs组CAl区形态异常细胞数均明显低于模型对照组，且SDF-1α＋BMSCs组显著低于BM—SCs组，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论BMSCs移植可保护缺血／再灌注损伤大鼠海马CA1区的细胞损伤，且SDF-1α对这种保护有促进作用。
- 王玉兰李爱娜张世春刘志安高殿帅
- 关键词：脑缺血再灌注损伤
- 转化生长因子β1对缺氧诱导的神经干细胞损伤的保护作用被引量：1
- 2015年
- 目的:观察转化生长因子β1(transforming growth factor beta 1,TGF-β1)对缺氧诱导的神经干细胞(neural stem cells,NSCs)损伤是否具有保护作用。方法:取新生1 d的大鼠大脑皮质,进行NSCs的分离、培养、传代、诱导分化和鉴定。以三气培养箱(94%N2、5%CO2、1%O2)制备NSCs的缺氧损伤模型。取传代细胞,随机分为4组:正常对照组、三气缺氧组、溶剂对照组、生长因子组。各组细胞在相应时间点用Hoechst33258进行荧光染色,镜下观察、拍照,计算Hoechst染色阳性细胞率,评估三气培养对NSCs的损伤情况以及TGF-β1对这种损伤的保护作用。结果:在未诱导分化前,传代培养的细胞呈Nestin免疫反应阳性;用胎牛血清(fetal bovie serum,FBS)诱导分化后则分别呈Ⅲ型β-微管蛋白(typeⅢbeta tubulin,Ⅲβ-tubulin)和胶质原纤维酸性蛋白(glial fibrillary acid protein,GFAP)免疫反应阳性,表明分离到的细胞是神经干细胞。Hoechst33258染色显示,凋亡细胞呈强亮蓝色荧光;正常细胞弥漫均匀着色,无强荧光。与正常对照组相比,三气缺氧组的凋亡阳性细胞显著增多(P<0.05)。与三气缺氧组或溶剂对照组相比,生长因子组的Hoechst33258染色凋亡阳性细胞数显著减少(P<0.05),但仍明显多于正常对照组(P<0.05)。结论:TGF-β1能够显著减少三气培养法所诱导的NSCs的凋亡,提示TGF-β1对NSCs的缺氧损伤具有重要的保护作用。为深入研究TGF-β1在NSCs的相关临床应用中的潜在价值提供理论基础和实验依据。
- 钱冰赵小芳吕春娥于娜韩冰高殿帅刘志安
- 关键词：神经干细胞缺氧细胞凋亡转化生长因子Β1大脑皮质
- 新生大鼠海马神经干细胞的离体培养及细胞连接的超微结构观察被引量：5
- 2013年
- 目的观察体外培养的新生大鼠海马神经干细胞球的超微结构特点。方法取处于指数期的原代培养7d的新生大鼠海马神经干细胞,常规制备透射电镜样品后,用日立H-600透射电镜观察并摄片。结果光镜下神经干细胞呈克隆球散在悬浮于培养基中,Nestin免疫荧光阳性;电镜下观察到神经干细胞相互间排列比较松散、核浆比例高,细胞间胞膜增厚,形成特化的结构,有的胞膜上可见胞吞/胞吐小泡。结论体外培养的新生大鼠海马神经干细胞间的细胞连接有间隙连接样结构,并可出现胞吞/胞吐功能,提示细胞间可进行相互交流,传递化学递质或电兴奋活动。
- 董富兴胡莹莹刘亚萍于红丽赵玉段现花董红燕徐铁军
- 关键词：海马神经干细胞细胞连接超微结构
- 光照强度和光照时间对性未成熟小鼠雌二醇的影响被引量：8
- 2015年
- 目的研究不同光照强度和光照时间对性未成熟小鼠体内雌二醇浓度的影响,为进一步探讨高强度光照和长时间光照与儿童性早熟之间的关系提供理论基础和实验依据。方法 100只20日龄的雌性昆明小鼠随机分为10组,在20W光照组、60W光照组、100W光照组的条件下各分为3h光照组、6h光照组、12h光照组,并设立1个对照组,每组5只。对照组小鼠置于自然状态下,持续1周。应用ELISA法检测不同光照强度和光照时间小鼠体内雌二醇的变化。结果采用SPSS 16.0统计软件进行处理。结果各实验组小鼠体内雌二醇浓度均高于对照组小鼠,差异均有统计学意义(P<0.05);在相同光照强度的条件下,随着光照时间的延长,各实验组小鼠体内雌二醇的浓度逐渐升高,且组间相比差异均有统计学意义(P<0.05)。在相同光照时间的条件下,随着光照强度的增强,各实验组小鼠体内雌二醇的浓度逐渐升高,且组间相比差异均有统计学意义(P<0.05)。结论在相同的光照强度下,延长对性未成熟小鼠的光照时间可以促进其体内雌二醇的分泌;而在相同的光照时间下,加强对性未成熟小鼠的光照强度亦可以促进其体内雌二醇的分泌。提示高强度照射与长时间光照均有可能通过增加儿童体内雌二醇的分泌而促进儿童的性早熟。
- 田晓康仲蕊钱冰杜日娜朱于青王克张海锋高殿帅刘志安
- 关键词：光照强度光照时间雌二醇性早熟
- 针刺治疗后阿尔茨海默病患者的杏仁核脑电信号被引量：1
- 2013年
- 目的比较针刺足三里穴位刺激杏仁核后阿尔茨海默病(AD)患者与正常人的脑电信号。方法利用基于小波变换的混沌分析,处理针刺足三里穴位刺激杏仁核后得到的电信号。结果在静止时,AD患者在低频带信号相对功率比较高,而在高频带信号相对功率比较低;而在进行认知活动时,AD患者高频带相对功率较低。结论从脑电信号角度可能得到诊断和治疗AD的新途径。
- 马凯刘志安
- 关键词：针刺治疗阿尔茨海默病脑电信号波变换杏仁核
- FTY720通过激活CaMKK/Akt通路减轻全脑缺血再灌注损伤
- 2012年
- 目的采用大鼠全脑缺血再灌注(I/R)模型,观察1-磷酸鞘氨醇(S1P)受体激动剂芬戈莫德(FTY720)对海马组织Ca2+/CaM依赖的蛋白激酶的激酶CaMKK表达水平和Akt磷酸化水平的影响以及对缺血再灌注后神经元的保护作用。方法制备全脑缺血大脑四动脉结扎模型,采用免疫印迹技术检测FTY720和CaMKK抑制剂STO-609对缺血后海马CA1区CaMKK表达、Akt磷酸化水平的影响,采用TUNEL检测FTY720和STO-609对缺血后海马神经元凋亡的影响。结果 FTY720降低缺血后海马CA1区神经元凋亡细胞数(P<0.05),而且在缺血复灌1d提高了CaMKK表达水平、Akt磷酸化水平(P<0.05),而STO-609可以降低其两者升高的水平(P<0.05)。结论 FTY720对缺血复灌后神经元有抗凋亡作用而且可能的分子机制是激活了CaMKK/Akt信号通路。
- 许静刘志安高殿帅
- 关键词：脑缺血FTY720
