国家自然科学基金(30770739)
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
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- 组蛋白脱乙酰化酶4N-末端和C-末端片段的原核表达及纯化被引量：1
- 2010年
- 目的在大肠杆菌中分别表达组蛋白脱乙酰化酶4(HDAC4)N-末端(1-1950bp)和C-末端(1708-3255bp)片段与谷胱甘肽-S转移酶(GST)的融合蛋白,并进行纯化。方法应用PCR方法扩增HDAC4N-末端和C-末端片段,将目的基因插入GST融合载体pGEX-6P-1中,重组载体在酶切鉴定和序列测定后,在大肠杆菌中经IPTG诱导表达GST-HDAC4-N'和GST-HDAC4-C'蛋白。经SDS-PAGE及Western blotting鉴定表达产物后,用谷胱苷肽琼脂糖珠纯化目的蛋白。结果经测序、酶切鉴定证明成功构建了融合蛋白表达质粒,表达出的融合蛋白经SDS-PAGE分析其相对分子量约为110500和93080。Western blotting分析证实融合蛋白可以被HDAC4特异性抗体所识别。结论成功构建了融合表达载体(pGEX-6P-1/HDAC4-N'和pGEX-6P-1/HDAC4-C'),并进行了融合蛋白的诱导表达和鉴定,可以进一步用于HDAC4与其他蛋白质相互作用的研究。
- 杨洋覃小翠刘书虎黄威王雪敏
- 关键词：原核表达融合蛋白
- PPARγ在氧化应激引起的神经元死亡中的作用和机理的研究
- 目的神经元是神经系统的基本结构和功能单位之一,神经元死亡是神经系统众多疾病的共同病理特征。但是神经元死亡的分子机制还不清楚,临床上也缺乏有效的治疗手段。近年的研究表明,转录因子PPARγ的激动剂对于多种神经系统退行性疾病...
- 杨洋王雪敏
- 关键词：氧化应激神经元死亡PPARΓ
- 文献传递
