国家质检总局科技计划项目(2006IK-019)
- 作品数：2 被引量：6H指数：2
- 相关作者：曾碧健马静云陈茹刘志玲林志雄更多>>
- 相关机构：华南农业大学广东出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：国家质检总局科技计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 牛流行热病毒LUX^(TM)荧光RT-PCR检测方法的建立被引量：2
- 2010年
- 采用LUXTM荧光PCR技术原理,以牛流行热病毒(BEFV)糖蛋白抗原G基因保守序列为模板设计特异荧光PCR扩增引物,建立BEFV LUXTM实时荧光RT-PCR快速检测方法。试验结果显示,所建立的荧光RT-PCR可特异检测牛流行热病毒RNA,而对蓝舌病病毒、牛病毒性腹泻-粘膜病病毒、水泡性口炎病毒、口蹄疫病毒、牛白血病病毒以及与BEFV同种属的狂犬病病毒核酸检测呈阴性反应。敏感性试验表明LUXTM荧光RT-PCR对BEFV RNA的检测敏感性比常规RT-PCR方法提高达100倍以上。该LUXTM荧光RT-PCR的批内检测变异系数0.64%-1.17%,批间检测变异系数均小于2%,表明检测体系稳定、重复性好。通过人工添加灭活病毒液的方法制备30份模拟感染牛血清样品,采用上述所建立的BEFV LUXTM荧光RT-PCR方法检测均呈阳性。
- 刘志玲陈茹邱索平马静云曾碧健周科
- 关键词：牛流行热病毒实时荧光RT-PCR
- 牛白血病病毒LUX^TM实时荧光聚合酶链式反应检测方法的建立被引量：4
- 2009年
- 采用LUXTM新型荧光PCR技术原理,设计并合成1对单标记LUXTM荧光引物,建立了LUXTM荧光PCR和RT-PCR方法,可快速检测牛白血病病毒(BLV)前病毒DNA和病毒RNA。结果显示所建立的LUXTM荧光PCR/RT-PCR体系可特异检测牛白血病病毒核酸,而对蓝舌病、牛病毒性腹泻-粘膜病、水泡性口炎、口蹄疫、牛流行热、牛传染性鼻气管炎等病毒核酸以及牛结核分支杆菌、大肠杆菌、健康动物组织核酸扩增均呈阴性反应。敏感性实验表明LUXTM荧光RT-PCR对RNA前病毒的检测敏感性达0.49 ng/μL,荧光PCR对pTblv-gp51重组质粒的检测敏感性可达0.138拷贝,比OIE规程的巢式PCR方法高104倍以上。采用该方法从血清学阳性临床牛血清中检出BLV阳性样品。
- 刘志玲陈茹马静云吴晓薇曾碧健林志雄
- 关键词：牛白血病病毒荧光PCR
