贵州省科技攻关计划(2008-7)
- 作品数：4 被引量：16H指数：3
- 相关作者：何志旭汪浩文尚峰刘俊峰王志华更多>>
- 相关机构：贵阳医学院皖南医学院附属池州医院贵阳医学院附属医院更多>>
- 发文基金：教育部“新世纪优秀人才支持计划”国家自然科学基金贵州省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 同源异体骨髓间充质干细胞移植对大鼠实验性肺动脉高压的治疗作用被引量：1
- 2010年
- 目的探讨同源异体骨髓来源的间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)移植对大鼠实验性肺动脉高压的治疗效果及作用机制。方法体外分离、培养并纯化SD大鼠骨髓MSCs。健康雄性SD大鼠随机分为3组,正常对照组(n=15)、肺动脉高压组(n=30)、MSCs移植组(n=20)。肺动脉高压组和MSCs移植组大鼠一次性项背部皮下注射野百合碱(50 mg/kg),复制肺动脉高压模型。三组大鼠同等条件饲养。3周后,MSCs移植组大鼠经舌下静脉注射5×106/ml的经Hoechst 33342标记的MSCs细胞悬液1 ml,肺动脉高压组大鼠予等量L-DMEM液,正常对照组不作任何处理。移植后28 d,观察三组大鼠的平均肺动脉压力(mPAP)、右心指数、血气及肺小动脉的微观结构的改变。结果肺动脉高压模型大鼠用MSCs移植28 d后,该组动物生存率为100%,平均肺动脉压力明显降低、右心指数下降,动脉血气指标等均有明显改善,与肺动脉高压组相比差异有统计学意义(P<0.01)。荧光显微镜观察到Hoechst 33342标记的MSCs在肺内定植且分化成大量新生血管并形成侧支循环,肺动脉重构得到有效逆转。结论MSCs移植可有效减轻并逆转野百合碱诱导的肺动脉高压的进程,其治疗作用机制可能与MSCs分化形成新生血管和改善肺小动脉血管重构有关。
- 汪浩文何志旭尚峰王志华米蔷
- 关键词：骨髓间充质干细胞肺动脉高压
- 大鼠骨髓间充质干细胞多向分化潜能的研究被引量：7
- 2009年
- 目的分离和培养大鼠骨髓间充质干细胞(marrow mesenchymal stem cells,MSCs),并行多向分化潜能的鉴定。方法经Percoll梯度分离法获得大鼠骨髓单个核细胞。贴壁培养后,通过倒置显微镜进行细胞形态学观察,并采用流式细胞术进行分析。传至第3代后,分别进行成脂肪细胞、神经元样细胞、血管内皮样细胞的诱导,并行免疫组织化学鉴定。结果骨髓间充质干细胞大小较为均匀,基本上呈梭形或星形的上皮样细胞,传代培养后的细胞体积增大,成纤维样细胞逐渐增多。经反复传代纯化的MSCs检测CD71、CD29呈阳性表达并证实骨髓间充质干细胞经诱导后分化为脂肪细胞、神经元样细胞、血管内皮样细胞。结论在体外,大鼠骨髓间充质干细胞具有多向分化潜能,可作为组织工程的种子细胞。
- 汪浩文何志旭王志华刘俊峰
- 关键词：骨髓间充质干细胞脂肪细胞神经元样细胞血管内皮样细胞
- 骨髓间充质干细胞移植治疗肺动脉高压大鼠肺血管病变的研究被引量：5
- 2009年
- 目的探讨骨髓来源的间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)移植对野百合碱诱导的实验性肺动脉高压大鼠肺血管病变的干预作用。方法体外分离、培养并纯化SD大鼠骨髓MSCs。健康雄性SD大鼠随机分为3组,肺动脉高压组(n=20)、MSCs移植组(n=20):2组大鼠均一次性向背部皮下注射野百合碱50 mg/kg,诱导肺动脉高压动物模型;正常对照组(n=15):注射同体积的生理盐水。同等条件饲养3周后,MSCs移植组大鼠经舌下静脉注射5×106/ml的经Hoechst33342荧光染料标记的MSCs细胞悬液1 ml,肺动脉高压组和正常对照组大鼠注射等量L-DMEM液。移植后观察4周,测定3组大鼠生存率、肺动脉平均压、肺小动脉的微观结构的改变。结果肺动脉高压大鼠移植MSCs 4周后,生存率由30%上升到90%,肺动脉平均压由(42.7±2.3)mmHg下降到(24.7±2.3)mmHg,下降了50%;右心指数由(45.30±3.13)%下降到(37.90±3.18)%(q=29.86,P<0.01),肺小动脉病变得到有效改善。荧光显微镜观察到Hoechst 33342标记的MSCs在肺内定植且分化成大量新生血管并形成侧枝循环,肺动脉重构得到有效逆转。结论MSCs移植可有效减轻并逆转肺动脉重构的进程,其作用机制是MSCs分化形成新生血管,建立了侧枝循环,从而修复野百合碱诱导的肺血管损伤。
- 何志旭汪浩文尚峰刘俊峰米蔷
- 关键词：肺动脉高压肺血管病变动物模型肺血管重构
- 骨髓间质干细胞移植治疗大鼠实验性肺动脉高压被引量：3
- 2009年
- 目的探讨骨髓间质干细胞（MMSC）移植治疗肺动脉高压（PAH）的疗效和机制。方法体外分离培养SD大鼠骨髓MMSC，以Hoechst 33342荧光染料标记。80只SD大鼠随机分为PAH组（30只）、PAH＋MMSC移植组（移植组，30只）和正常对照组（对照组，20只）。采用一次性注射野百合碱50mg／kg的方法制备PAH模型。移植组于建模第22天舌下静脉注射5×10^6／ml的MMSC细胞悬液1ml，其他2组同时间注射等量细胞培养液。饲养4周，观察各组大鼠一般情况计算生存率。实验第21天每组各处死4只大鼠，实验第49天处死所有存活大鼠，测定肺动脉平均压（mPAP）、右心室肥大指数，并取肺组织做肺小动脉形态计量学指标检测、血管Ⅷ因子相关抗原免疫组织化学染色和微血管密度分析。结果实验结束时PAH组和移植组大鼠生存率分别为50％（15／30）和90％（27／30，P〈0．01）。第21天PAH组和移植组mPAP分别为（39．1±2．5）和（38．5±2．1）mmHg（1mmHg=0．133kPa）；右心室肥大指数分别为（34．0±3．1）％和（33．8±2．6）％，均明显高于对照组[（15．2±1．7）mtnHg，（22．7±1．5）％，均P〈0．01）]。第49天，PAH组和移植组mPAP分别为（42．7±2．3）和（24．7±2．1）mmHg，右心室肥大指数分别为（45．1±3．4）％和（38．8±3．2）％，移植组均明显低于PAH组（均P〈0．01）；与PAH组比较，移植组肺小动脉形态计量学指标明显改善。荧光显微镜观察显示荧光标记MMSC在肺内定植且分化成大量新生血管并形成侧支循环，肺动脉重构得到有效逆转。免疫组组织化学染色观察证实移植组大鼠肺组织中有大量新生血管形成，微血管密度明显高于PAH组[（5．2±0．8）比（1．4±0．5）个／高倍视野，P〈0．01]。结论MMSC移植可通过分化形成新生血管和修复损伤肺小动脉，逆转肺血管重构，降低肺动脉压，有效减轻甚�
- 何志旭汪浩文尚峰严虎杨燕
- 关键词：骨髓
