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国家自然科学基金(39770306)

作品数：26 被引量：91H指数：5
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文献类型

  • 26篇中文期刊文章

领域

  • 26篇医药卫生

主题

  • 21篇基因
  • 20篇细胞
  • 16篇白血
  • 16篇白血病
  • 13篇WT1基因
  • 9篇基因表达
  • 8篇NB4细胞
  • 7篇WT1
  • 7篇WT1基因表...
  • 6篇细胞系
  • 6篇白血病细胞
  • 5篇细胞瘤
  • 5篇母细胞
  • 5篇母细胞瘤
  • 5篇分化
  • 5篇白血病患者
  • 5篇病患
  • 4篇肾母细胞
  • 4篇肾母细胞瘤
  • 4篇细胞株

机构

  • 22篇苏州大学
  • 6篇苏州大学附属...
  • 4篇苏州医学院附...
  • 3篇青岛医学院
  • 1篇青岛大学
  • 1篇常州市第一人...
  • 1篇河北北方学院...
  • 1篇镇江市第一人...

作者

  • 21篇陈子兴
  • 18篇岑建农
  • 16篇胡绍燕
  • 15篇王玮
  • 12篇沈慧玲
  • 9篇顾伟英
  • 8篇赵晔
  • 7篇傅建新
  • 6篇王玲
  • 6篇谷敏
  • 4篇何军
  • 4篇陈子兴
  • 3篇朱江
  • 2篇姚利
  • 2篇王志林
  • 2篇段卫明
  • 2篇曹祥山
  • 2篇钱军
  • 2篇严峰
  • 1篇李振江

传媒

  • 7篇中华血液学杂...
  • 5篇肿瘤
  • 2篇江苏医药
  • 2篇中国病理生理...
  • 2篇中国实验血液...
  • 2篇苏州大学学报...
  • 1篇中华内科杂志
  • 1篇中华医学杂志
  • 1篇苏州医学院学...
  • 1篇肿瘤防治研究
  • 1篇癌症
  • 1篇中国血液流变...

年份

  • 1篇2010
  • 1篇2008
  • 2篇2007
  • 7篇2006
  • 7篇2005
  • 1篇2004
  • 1篇2003
  • 1篇2002
  • 2篇2001
  • 3篇2000
共 26 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
WT1基因增强子构建位点对WT1基因启动子转录活性的影响被引量：1
2008年
目的:以WT1基因启动子和增强子的功能片段为研究对象,探讨增强子构建在质粒的不同位点对基因启动子转录活性的影响。方法:利用基因重组技术将WT1基因增强子的功能片段分别插入在已含有WT1基因启动子的质粒,pEWP的不同位点(MCS中的BamHI、EGFP终止密码后的NotI和SV40polyA位点后的AflⅡ)中,将重组质粒转染慢粒白血病红白急变细胞株K562细胞、乳腺癌细胞株MCF-7细胞和人类胚胎肾转化细胞株293细胞,通过检测转基因细胞中EGFP的平均荧光强度来评估增强子对启动子的转录促进作用。结果:通过基因重组技术分别构建了含有WT1基因启动子的载体,即pEWP,和含有WT1基因启动子和增强子的载体,即pEWPE、pEWPD和pEWPA。流式细胞仪检测EGFP的平均荧光强度,发现pEWPA在293细胞和K562细胞中能够增强WT1启动子的转录活性,而pEWPE和pEWPD则无增强作用。3者均不能在MCF7细胞中增强WT1启动子的转录活性。结论:SV40polyA位点后插入增强子能够有效地增强启动子的转录活性,且具有细胞特异性。
胡绍燕陈子兴顾伟英赵晔岑建农傅铮铮何军谷敏
关键词：启动子WT1基因增强子WT1基因插入位点
Wilms瘤基因WT1表达与急性白血病微小残留病的检测被引量：4
2000年
近年来发现急性髓性白血病 (AML)有Wilms瘤抑制基因WT1的异常表达 ,且表达水平与预后呈负相关 ,提示其可作为一种新的白血病标志。为探讨WT1能否作为急性白血病微小残留病 (minimalresidualdisease ,MRD)的标志 ,我们采用巢式逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)测定了WT1基因的灵敏度 ,并与肿瘤特异性标志基因进行比较。所有样本RNA的质量均用内对照c abl基因证实。以两轮RT PCR扩增WT1和肿瘤特异性融合基因检测白血病细胞的极限在NB4细胞分别为 10 -4 和 10 -5,而在K5 62细胞分别为 10 -3- 10 -4 和高于 10 -6 ;在 2 9例供血员的外周血单个核细胞 (MNC)均未检测到WT1基因表达 ,但在 2 1例非恶性疾病患者骨髓MNC中有 8例呈WT1基因阳性 (38.1% )。本研究提示 ,监测WT1表达可用于AML的疗效评价及MRD随访 。
傅建新王玲王玮陈子兴
关键词：WT1基因NB4细胞系微小残留病白血病
急性白血病患者WT1基因异构体的研究被引量：14
2002年
姚利王玲王玮傅建新岑建农陈子兴
关键词：急性白血病
竞争性RT-PCR定量检测WT1基因表达方法的建立及初步应用被引量：7
2001年
王玲傅建新王玮陈子兴
关键词：白血病RT-PCRWT1基因表达
WT1基因异构体WTA对NB4细胞基因表达谱影响的研究
2006年
目的:探讨WT1基因异构体比例的改变对急性早幼粒细胞性白血病细胞株NB4基因表达谱的影响。方法:用电穿孔法将携带WT1基因异构体WTA(-17AA/-KTS)全长cDNA的重组真核表达载体及其对照质粒pCB6+转染入白血病细胞株NB4,建立WT1基因异构体表达比例改变的单克隆细胞株NB4/WTA。运用cDNA微阵列技术检测WT1基因异构体表达比例的转变对NB4细胞基因表达谱的影响。并用RTPCR方法验证cyclinA1及CDK7基因表达的改变。结果:转染WT1基因异构体WTA后,外源基因在mRNA及蛋白水平上稳定表达,NB4细胞中共89个细胞周期相关基因、细胞凋亡相关基因、癌基因以及细胞信号和传递蛋白等基因出现2倍以上表达水平的改变。RTPCR证实与细胞周期相关的cyclinA1基因表达上调,CDK7基因表达下调。结论:WT1基因异构体WTA表达比例增加能引起NB4细胞基因表达谱的改变,这些基因的改变可能对白血病细胞增殖、分化和凋亡等生物学行为产生影响。
沈慧玲陈子兴王玮岑建农胡绍燕赵晔
关键词：NB4细胞
NB4细胞诱导分化过程中WT1、RbAp46及IGFBP-rP1基因表达水平的变化被引量：2
2006年
目的:探讨WT1、RbAp46及IGFBP-rP1基因与NB4细胞诱导分化的关系。方法:利用实时定量RT-PCR方法检测NB4细胞诱导分化不同时间点WT1、RbAp46和IGFBP-rP1基因的表达水平,并用流式细胞仪检测NB4细胞表面抗原CD11b的变化。结果:随着NB4细胞向粒系终末分化,WT1、IGFBP-rP1基因的表达水平迅速下降。0.5μmol/L全反式维甲酸(all transretinoic acid,ATRA)作用0、4、8、12、24与48 h后WT1N分别为1.91、1.21、0.60、0.44、0.18与0.04;IGFBP-rP1N分别为1.10、0.80、0.54、0.28、0.17与0.15。RbAp46基因的平均表达水平则下降缓慢,分别为2.65、1.86、1.40、1.27、1.48与0.49。NB4细胞处理组WT1基因的改变分别与RbAp46和IGFBP-rP1基因的变化存在相关性(r=0.829,P=0.021;r=1,P<0.001),三者均与CD11b的变化呈负相关(r=-1.0,P<0.001;r=-0.829,P=0.021与r=-1.0,P<0.001)。结论:WT1、RbAp46和IGFBP-rP1基因的高表达可能参与了阻滞NB4细胞分化的过程。
胡绍燕陈子兴顾伟英沈慧玲岑建农
关键词：NB4细胞
RbAp46基因过度表达抑制K562白血病细胞的生长
2006年
目的探讨RbAp46基因对白血病细胞的作用机制。方法利用脂质体将全长RbAp46基因的cDNA片段及空载体PCB6+转入K562细胞株,分别进行生长曲线、软琼脂集落培养及细胞周期的检测,比较两者的差异。结果与空载体K562/PCB6+细胞比较,过度表达RbAp46基因的单克隆细胞株生长减慢,生长第4天,两者细胞数分别为(9.00±0.84)×105和(11.96±0.99)×105;集落减少[K562/RbAp46 vs K562/PCB6+为(131.67±15.57)vs(250.33±26.31),P<0.01];细胞周期改变主要表现为S期细胞减少[(48.88±4.35)vs(62.78±4.78),P<0.01)],G0/G1期细胞增多[(29.10±4.14)vs(22.40±2.43),P<0.05)]。结论作为抑癌基因,RbAp46通过抑制DNA合成而抑制K562细胞株的增殖。
胡绍燕陈子兴岑建农王玮谷敏沈慧玲
关键词：K562细胞株细胞周期
WT1基因干扰质粒的构建
2006年
目的构建WT1(Wilms’tumor susceptibility gene,WT1)基因siRNA(small interference RNA,siRNA)载体, 为进一步探讨WT1的生物学功能奠定基础。方法根据针对WT1 mRNA的有效的siRNA序列,设计合成两条shRNA(small hair RNA,shRNA)的DNA模板单链,同时模板链两端分别设计不同的两个限制酶切位点。退火形成siRNA载体插入片断。用限制性内切酶将siRNA空载体线性化,T4连接酶将插入片断插入siRNA空质粒中。结果经酶切、PCR及测序鉴定确定构建成功。结论成功构建了WT1的干扰质粒,可对其生物学行为作进一步研究。
谷敏陈子兴岑建农李振江
关键词：WT1基因SIRNA质粒RNA干扰
慢性粒细胞白血病患者WT1基因表达及其临床意义被引量：2
2007年
目的探讨慢性粒细胞白血病（CML）患者骨髓细胞中Wilms瘤抑癌基因（WT1）的表达水平及其临床意义。方法建立实时定量RT-PCR方法，采用Light Cycler PCR仪检测了46例（109份骨髓细胞cDNA标本）CML患者和23例非白血病患者骨髓细胞中WT1及内参β胆色原脱氢酶（GAPDH）的表达水平，以WT1N=（WT1拷贝数／GAPDH拷贝数）×10^4计算WT1表达水平。结果23份CML加速期与22份CML急变期患者骨髓细胞中WT1N的中位表达水平分别为103．71和129．44，明显高于64份CML慢性期和对照组（分别为3．44和1．47，P〈0．01），对照组与CML慢性期之间WT1基因表达差异无统计学意义；CML加速期与急变期之间WT1基因表达差异也无统计学意义（P〈0．05）。WT1基因表达水平与BCR／ABL融合基因表达水平具有一定的相关性。对其中7例CML患者行异基因骨髓移植前后动态检测WT1上升可提示白血病复发。结论CML患者加速急变期骨髓细胞中WT1基因表达升高，具有参考意义。
曹祥山顾伟英陈子兴胡绍燕何军岑建农
关键词：WT1RT-PCR
RNA干扰对乳腺癌MCF-7细胞株WT1基因表达的抑制作用被引量：5
2007年
目的:为探索治疗乳腺癌新途径,研究RNA干扰(RNA interferance,RNAi)对MCF-7细胞株WT1基因表达的抑制作用。方法:设计制备多对针对WT1基因的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),转染MCF-7细胞,采用实时定量PCR(real-time quantitative polymerase chain reaction,RQ-PCR)法测定WT1 mRNA的表达,westernblot测定WT1蛋白的表达,流式细胞仪检测加入长春新碱后的MCF-7细胞凋亡率。结果:siRNA能有效抑制WT1基因的表达,但不呈剂量关系,在较低浓度可维持RNAi至少4d时间,WT1基因表达下调的MCF-7细胞凋亡率增加。结论:RNAi能有效抑制MCF-7细胞中WT1基因的表达,同时转染siRNA后细胞对长春新碱敏感。
谷敏陈子兴岑建农何军
关键词：小干扰基因肾母细胞瘤MCF-7细胞
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