国家自然科学基金(81271871)
- 作品数：4 被引量：4H指数：2
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- 相关机构：中国农业科学院上海兽医研究所上海师范大学南京农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家社会公益研究专项计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 日本血吸虫凋亡诱导因子SjAIF功能区片段的克隆及表达分析
- 2015年
- 目的克隆表达日本血吸虫凋亡诱导因子(SjAIF)功能区片段,并对其生物学特性进行初步分析。方法应用PCR技术扩增日本血吸虫凋亡诱导因子的功能区片段,构建原核重组表达质粒并诱导其表达,实时定量PCR分析其在不同发育时期童虫和成虫的转录水平,通过Western-blot和间接ELISA法分析重组蛋白的抗原性和免疫原性,应用免疫组化分析该蛋白在虫体内的分布情况。结果克隆了SjAIF功能区片段,大小为831bp。成功构建了原核重组表达质粒pET-28a(+)-SjAIF,并在大肠杆菌中获得表达,重组蛋白分子量35kD。实时定量PCR分析表明SjAIF基因在童虫和成虫的各个发育阶段均有转录,其中7d^21d虫体表达量较低,42d和28d虫体表达量较高,雌虫表达量高于雄虫。重组蛋白具有较好的抗原性和免疫原性,免疫小鼠后诱导产生了较高水平的特异性IgG抗体。该蛋白主要存在于日本血吸虫体被,少部分分布于实质组织中。结论成功表达了SjAIF基因的功能区片段,对其生物学特性进行了初步分析,为进一步研究该基因生物学功能和作用提供了基础。
- 陆看韩宏晓洪炀马茜茜刘艳涛韩倩马帅傅志强林矫矫
- 关键词：日本血吸虫细胞凋亡凋亡诱导因子
- 日本血吸虫促凋亡基因SjBAD真核表达及其功能研究
- 2015年
- 根据日本血吸虫促凋亡基因SjB AD的参考序列设计引物,应用PCR技术扩增SjB AD,选用pcD NA3.1(+)真核表达载体,构建pcDNA3.1(+)-SjB AD,并将其转染到293T细胞内,采用实时定量PCR检测SjB AD在转染入293T细胞培养不同时期后的转录水平;利用细胞流式术检测pcD NA3.1(+)-SjB AD转染入293T细胞后细胞的凋亡水平。结果:成功克隆、表达了日本血吸虫SjB AD基因,构建了真核重组表达质粒pcD NA3.1(+)-SjB AD,并将其转染入293T细胞内,利用实时定量PCR检测SjB AD在转染入293T细胞培养36h后转录水平最高。利用细胞流式术检测pcD NA3.1(+)-SjB AD转染入293T细胞后可以引起细胞凋亡。本文为研究线粒体细胞凋亡通路和血吸虫的生长发育奠定基础。
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- 关键词：日本血吸虫真核细胞凋亡BAD
- 日本血吸虫凋亡相关基因SjBAK的初步研究被引量：2
- 2017年
- 利用PCR技术扩增日本吸血虫凋亡相关基因BAK(Bcl-2 homologous antagonist/killer),并构建重组质粒。应用Realtime PCR技术分析在日本血吸虫非易感宿主大鼠和易感宿主小鼠来源、不同发育阶段虫体中BAK基因的表达状况。结果显示,克隆获得日本血吸虫(Schistosoma japonicum,Sj)BAK编码基因Sj BAK,其ORF含2142bp,编码713个氨基酸,理论分子量为79.3 k Da,理论等电点为4.9。结构域分析表明该基因编码蛋白具有至少3个BH结构域,属于Bcl家族成员。Real-time PCR结果显示该基因在大、小鼠来源4个不同发育阶段虫体均有表达,其中大鼠来源虫体Sj BAK的表达水平都高于小鼠来源虫体,在感染后32 d和42 d表达差异具有显著统计学意义(P<0.05)。由此可推测日本血吸虫凋亡相关基因Sj BAK在血吸虫生长发育中可能发挥重要的作用。
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- 关键词：日本血吸虫BAK细胞凋亡
- Characterization of VAMP2 in Schistosoma japonicum and the Evaluation of Protective Efficacy Induced by Recombinant SjVAMP2 in Mice
- Background:The host-interactive tegument of Schistosomes appears to be a successful strategy to survival in th...
- 韩倩Yang HongZhiqiang FuMin ZhangXiaodan CaoYantao liuShuai MaYuntao GuoKe LuChuangang Zhu林矫矫
- 文献传递
- 日本血吸虫14d童虫凋亡现象的观察被引量：2
- 2014年
- 为观察BALB/c小鼠源日本血吸虫14d童虫的细胞凋亡现象,分别采用TUNEL检测法和透射电子显微镜从DNA分子水平和细胞层面上进行定性观察,并应用FITC-Annexin-V/PI双染色法通过流式细胞仪定量检测虫体凋亡细胞比例。结果表明,采用这3种方法均能在日本血吸虫14d童虫中观察到一定程度的细胞凋亡现象,但不会导致日本血吸虫该时期童虫的异常生长发育。
- 郭小勇洪炀韩宏晓曹晓丹韩艳辉张旻傅志强朱传刚陆珂李浩林矫矫
- 关键词：日本血吸虫透射电子显微镜TUNEL法流式细胞术
