国家自然科学基金(91129718)
- 作品数：11 被引量：22H指数：3
- 相关作者：许文荣钱晖王梅朱伟高硕更多>>
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- IL-6在胃癌细胞株HGC-27上皮间质转化中的作用被引量：6
- 2013年
- 目的探讨白细胞介素-6(IL-6)对人胃癌细胞株HGC-27上皮间质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)的影响。方法体外用IL-6刺激培养HGC-27细胞,倒置显微镜下观察细胞形态学变化;实时荧光定量RT-PCR及western blot检测EMT相关标志分子E-cadherin、N-cadherin和Vimentin表达情况;Transwell迁移实验和平板克隆形成实验分别检测IL-6处理前后HGC-27细胞迁移和克隆形成能力的变化。结果 IL-6能诱导HGC-27细胞向间质细胞样形态转化,多数细胞表现为类似成纤维状,部分细胞呈明显的梭形;实时荧光定量RT-PCR结果表明,IL-6作用于HGC-27细胞后E-cadherin表达量明显降低(P<0.01),而N-cadherin和Vimentin表达则显著增强(P均<0.05)。western blot结果表明,IL-6作用HGC-27细胞后E-cadherin蛋白表达量降低(P<0.05),而N-cadherin和Vimentin蛋白表达量均增加(P均<0.05);Transwell实验及平板克隆形成实验结果显示,IL-6作用后HGC-27细胞的克隆形成能力及迁移能力均增强(P均<0.01)。结论 IL-6可诱导胃癌细胞发生EMT和进一步恶化的潜能。
- 张强史惠黄锋王梅钱晖朱伟许文荣
- 关键词：IL-6上皮间质转化胃癌
- 外源性sall4基因在胃癌HGC27细胞株中的表达及鉴定
- 2013年
- 目的:建立sall4稳定转染的HGC27细胞株,为sall4基因在胃癌发生发展中的作用研究奠定基础。方法:采用脂质体介导法将pCMV6-entry-sall4及pCMV6-entry质粒转染至HGC27细胞,48 h后加入终质量浓度600mg/L的G418抗生素进行药物加压筛选,获得阳性单克隆细胞株,通过RT-PCR和蛋白质印迹检测细胞中sall4的表达情况。结果:成功构建了稳定过表达sall4的HGC27细胞株,稳定转染细胞株中sall4的mRNA和蛋白水平明显高于未转染组及转染空载体组。结论:本实验成功筛选出sall4基因过表达的稳定转染胃癌细胞系。
- 张玲高硕张斌王梅许潇钱晖许文荣
- 关键词：胃癌SALL4过表达
- 肿瘤相关中性粒细胞研究进展被引量：2
- 2013年
- 近年来,中性粒细胞在肿瘤中的作用和意义逐渐为人们所认识。不同类型肿瘤患者肿瘤组织中浸润的中性粒细胞数量增加,与预后不良明显有关。但是对于中性粒细胞在肿瘤发生、发展中的作用机制尚不清楚。研究证实,中性粒细胞具有促肿瘤生长、转移、血管生成和抑制免疫的作用。本文主要综述了肿瘤相关中性粒细胞的研究进展。
- 张徐许文荣
- 关键词：中性粒细胞肿瘤极化
- 实时定量PCR检测胃癌组织miR-20a及初步应用被引量：1
- 2012年
- 目的建立检测人胃癌组织中miR-20a的实时荧光定量PCR方法。方法建立miR-20a标准曲线,评价该法检测的线性范围及灵敏度;对标准质粒扩增产物进行熔解曲线分析和琼脂糖凝胶电泳检测以分析该法的特异性。取高、中、低3份不同浓度的标准质粒进行批内和日间变异系数(CV)的检测,分析该法的重复性。收集70例胃癌患者手术切除的癌组织和对应的癌旁组织,定量检测组织中miR-20a的表达水平。结果构建的实时荧光定量PCR法的灵敏度为101copies/μL,扩增的线性范围为101～109copies/μL;扩增产物的熔解曲线峰和电泳片段特异;3份不同浓度标准质粒定量检测的批内CV分别为6.33%、4.74%、5.89%,日间CV分别为9.45%、6.29%、7.48%。定量结果显示75.7%(53/70)胃癌组织中miR-20a的表达高于癌旁组织,差异有显著性(Z=-4.427,P<0.01)。结论建立的实时荧光定量PCR检测miR-20a的方法准确、快速、灵敏、特异,可用于胃癌组织中miR-20a的检测。
- 王梅王胜顾红兵钱晖许文荣
- 关键词：微小RNA实时荧光定量PCR胃癌
- 脐带血移植治疗缺氧缺血性脑损伤和缺血性脑卒中的研究进展被引量：2
- 2015年
- 人脐带血(human umbilical cord blood,HUCB)富含丰富的未成熟干细胞,这些干细胞具有修复受损组织的潜能。HUCB干细胞移植在动物模型中可以产生多种作用:神经保护、神经再生、抗炎、血管再生等作用。目前HUCB干细胞移植已被用于治疗血液系统疾病,其还可以用于神经系统疾病,并已在基础研究方面取得较大进展。本文简要讨论HUCB移植的治疗机制及在缺氧缺血性脑损伤和缺血性脑卒中的研究进展。
- 叶壮李志奇
- 关键词：脐带血细胞移植缺氧缺血性脑损伤缺血性脑卒中
- 白血病细胞K562来源的外体对人脐带间充质干细胞作用的研究被引量：1
- 2012年
- 目的探讨白血病细胞株(K562)来源的外体(exosomes)对人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stemcells,hucMSCs)的影响。方法用离心超滤和蔗糖密度梯度超速离心法从K562细胞的培养上清液中分离并纯化exosomes。透射电子显微镜观察其形态;将exosomes与hucMSCs共育,细胞计数板法检测exosomes对hucMSCs增殖的影响;实时荧光定量PCR检测肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)相关基因FAP、α-SMA和IL-6的表达;western blot检测exosomes标志性蛋白CD9、CD81及CAFs相关蛋白FAP,α-SMA的表达。结果透射电镜下观察分离的exosomes呈椭圆或碟状的囊泡结构,直径在30～100 nm;细胞计数板法检测结果表明,不同浓度的exosomes均能抑制hucMSCs细胞增殖且呈剂量依赖性(P均<0.05);荧光定量PCR结果表明,不同浓度的exosomes作用于hucMSCs,其FAP、α-SMA和IL-6表达量明显增加(P均<0.05);western blot结果表明,exosomes可表达标志性蛋白CD9、CD81,且exosomes作用hucMSCs后FAP、α-SMA蛋白表达量增加。结论 K562细胞来源的exosomes能抑制hucMSCs增殖,且能诱导hucMSCs向CAFs的分化。
- 顾建美钱晖朱伟许文荣
- 关键词：K562细胞脐带间充质干细胞肿瘤相关成纤维细胞
- 干细胞相关分子及其在肿瘤发生与分子诊断中应用被引量：4
- 2012年
- 目前,文献报道和我们前期研究都表明,干细胞相关分子如人类婆罗双树样基因-4(SALL4)、转录因子Oct-4等及非编码RNAs如微小RNA(microRNAs,miRNAs)、长链非编码RNAs(LncRNAs)等与肿瘤发生、发展及预后具有密切的关系,特别是有些分子可以在外周血液中分析和测定。因此,干细胞相关分子的研究不仅为肿瘤的浸润、转移、复发提供依据,而且将成为肿瘤的诊断、治疗和预后判断的新分子标志物。
- 许文荣
- 关键词：干细胞非编码RNAS
- PEG诱导间充质干细胞与胃癌细胞融合的研究
- 2015年
- 目的探讨聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)1500诱导人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesechymal stem cell,huc MSC)与胃癌细胞系(HGC-27)融合的可能性及融合细胞(hybrids)的活力。方法荧光染料DIO、DID分别标记HGC-27与huc MSC;细胞计数法观察标记前后细胞增殖情况;PEG1500诱导细胞融合后,用荧光显微镜观察双色的融合细胞;CCK-8法检测融合细胞的活性;流式细胞术分析融合细胞的细胞周期。结果 DIO与DID荧光染料可分别标记HGC-27(表达绿色荧光)与huc MSC(表达红色荧光),且标记对细胞增殖无明显影响;荧光显微镜可观察到双色双核的融合细胞;流式细胞术结果表明,与HGC-27细胞相比,融合细胞活性增强,细胞周期中G1期比例降低,S期比例升高(P<0.01)。结论 PEG可诱导huc MSC与HGC-27细胞融合,且融合后的细胞表现很强的体外增殖活性。
- 薛建国尹磊祝源纪润璧贾浩源张娇俞静纪成王娟娟许文荣钱晖
- 关键词：脐带间充质干细胞胃癌细胞细胞融合聚乙二醇
- 转移性人小细胞肺癌裸鼠模型的建立被引量：3
- 2012年
- 目的建立转移性人小细胞肺癌(SCLC)的裸鼠模型,探讨其用于人SCLC的治疗研究的可行性。方法 RPMI 1640培养基培养的人SCLC细胞株NCI-H446用无血清培养液重悬成1×107个/mL,取0.1 mL细胞悬液接种于BALB/c-nu裸鼠胫骨结节骨髓腔内,构建裸鼠模型并观察腿部肿瘤生长情况及肺等器官的转移情况。免疫组化染色检测小细胞肺癌标志物CD56及神经上皮干细胞标志物netsin的表达情况。结果经胫骨结节骨髓腔注射的方法注射细胞后裸鼠腿部均形成原位瘤,肺部转移6/6只,肝、脾等脏器未见转移灶。肿瘤组织细胞CD56阳性率>75%,nestin阳性率为4%～12%。结论经胫骨结节骨髓腔注射的方法可以形成弥散性肺部肿瘤,其他各器官则未见肿瘤块,可以为人SCLC实验性治疗的研究提供一种高效的实验模型。
- 丁小青蒋留留张志坚王梅许文荣朱伟钱晖
- 关键词：小细胞肺癌动物模型
- 炎症环境下巨噬细胞对小鼠骨髓间质干细胞迁移能力的影响被引量：3
- 2013年
- 目的:探讨脂多糖(LPS)存在的炎症环境下巨噬细胞株RAW264.7对小鼠骨髓间质干细胞(mesenchymalstem cells,MSCs)的基因表达及迁移能力的影响。方法:采用全骨髓贴壁法分离小鼠骨髓MSCs,与RAW26 4.7细胞进行Transwell迁移及共培养实验,分为培养液对照组,RAW264.7作用组,LPS作用组及RAW264.7与LPS共作用组。Transwell迁移实验比较各组MSCs的迁移数量,同时qRT-PCR检测各组MSCs表达转化生长因子-β1(TGF-β1)、白介素-6(IL-6)和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)mRNA水平。结果:LPS刺激巨噬细胞活化,使其高表达IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)及MCP-1。RAW264.7作用组MSCs迁移数量多于对照组(P<0.01)。与LPS作用组相比,LPS活化的RAW264.7显著增加MSCs的迁移数量(P<0.01)。qRT-PCR结果显示活化的RAW264.7增加了MSCs的TGF-β1、IL-6和MCP-1 mRNA表达(P<0.05)。结论:炎性条件下巨噬细胞能增强MSCs的迁移能力并改变其细胞因子的表达水平。
- 高硕蔡梦洁毛飞杨婷婷张洁张玲赵露露坎吉克孜.阿不来提钱晖许文荣
- 关键词：骨髓间质干细胞巨噬细胞细胞迁移
