国家自然科学基金(30700346)
- 作品数：4 被引量：5H指数：1
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- Caveolin-1在急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征发病机制中的作用进展被引量：4
- 2009年
- 吕学军李玉英钱桂生
- 关键词：窖蛋白急性肺损伤急性呼吸窘迫综合征
- Caveolae/caveolin与肺部疾病的研究进展
- 2012年
- 1953年Palade在电镜下发现血管内皮细胞表面有一些细颈瓶状的内陷结构,2年后Yamada在膀胱上皮细胞表面发现同类结构,并正式命名为小窝（caveolae）。50多年来,随着现代细胞技术的发展,科研工作者可以分离、纯化caveolae,并通过基因敲除或siRNA干扰技术对其标志蛋白小窝蛋白（caveo-lin）进行干扰,极大地扩展了对caveolae/caveolin结构和功能的认识。研究表明,caveolae/caveolin广泛分布于机体内,
- 王勤李玉英王建春
- 关键词：肺疾病小窝小窝蛋白
- 甲基-β-环糊精对肺泡Ⅱ型上皮细胞增殖和TGF-β/Smad信号通路的影响
- 2011年
- 目的观察甲基-β-环糊精(methyl-β-cyclodextrin,MβCD)破坏小窝(caveolae)对肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)增殖和TGF-β/Smad信号通路的影响。方法分离培养大鼠AECⅡ,免疫荧光双标检测小窝蛋白-1(caveolin-1)和TGF-β受体Ⅰ(TβR-Ⅰ)表达和分布关系。以MβCD(5 mmol/L)破坏AECⅡ细胞膜Caveolae,设空白对照组,非离子去污剂法提取脂筏检测TβR-Ⅰ与Caveolin-1在细胞膜上的分布;Western blot检测Caveolin-1和磷酸化Smad2(pSmad2)表达;四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖能力。结果荧光双标和脂筏提取结果提示TβR-Ⅰ主要分布于Caveolae区域,MβCD破坏Caveolae后,TβR-Ⅰ重新分布于细胞膜上非脂筏区域;MβCD干扰组Caveolin-1蛋白表达(24.53±3.24)%较正常对照组(54.83±5.67)%显著下调(P<0.01),而TGF-β/Smad信号通路下游分子pSmad2蛋白表达(10.93±1.11)%较对照组(8.36±0.64)%上调(P<0.05);MβCD干扰组细胞增殖率(31.00±4.18)%较对照组(49.20±4.44)%显著降低(P<0.01)。结论 MβCD破坏Caveolae结构可抑制AECⅡ增殖,其机制可能与TβR-Ⅰ在非脂筏区域的聚集和Caveolin-1下调导致的TGF-β/Smad信号通路增强有关。
- 王勤王建春李玉英王关嵩
- 关键词：小窝小窝蛋白-1转化生长因子Β
- 甲基-β-环糊精对Ⅱ型肺泡上皮细胞增殖与转分化的影响被引量：1
- 2011年
- 目的 观察甲基-β-环糊精（MβCD）破坏脂质微区结构对Ⅱ型肺泡上皮细胞（AEC Ⅱ）增殖、转分化及细胞周期的影响.方法 采用MβCD破坏体外培养的AEC Ⅱ细胞膜脂质微区（MβCD干扰组）,以必需基本培养基（DMEM）作为对照.用血细胞计数器计数培养细胞,四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法检测细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞周期,免疫荧光双标和蛋白质免疫印迹法（Western blotting）检测AEC Ⅱ特异性肺泡表面活性蛋白C（SP-C）及Ⅰ型肺泡上皮细胞（AEC Ⅰ）特异性水通道蛋白5（AQP5）的表达.结果 与对照组比较,MβCD组干扰后24、48、72 h细胞数及增殖能力显著降低[细胞数（×106/rml）：2.74±0.56比8.05±0.92,4.45±0.68比10.52±0.81,7.82±0.59比11.39±0.81;MTT结果（A值）：0.25±0.20比0.45±0.02,0.35±0.03比0.54±0.28,0.48±0.04比0.59±0.05,均P＜0.01＝;MβCD组干扰后24h G0/G1期细胞比例显著增多,S期细胞比例显著减少[G0/G1期：（60.06±1.65）%比（43.43±3.59）%;S期：（16.20±2.17）%比（34.07±2.63）%,均P＜0.05＝;MβCD组干扰后48 h、72 h SP-C蛋白表达明显增多（0.54±0.04比0.47±0.03,0.19±0.03比0.06±0.02）,AQP5蛋白表达明显减少（0.30±0.04比0.43±0.06,0.39±0.04比0.59±0.04,P＜0.05或P＜0.01＝.结论 MβCD破坏体外培养AEC Ⅱ脂质微区结构后,细胞发生G1期阻滞,细胞增殖和转分化受到抑制.
- 王勤王建春李玉英王关嵩
- 关键词：肺泡上皮细胞增殖转分化细胞周期
