国家自然科学基金(30700362) 作品数:4 被引量:10 H指数:1 相关作者: 陈东风 杨敏 张波 王正国 房殿春 更多>> 相关机构: 第三军医大学大坪医院 第三军医大学西南医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 中国博士后科学基金 重庆市自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
PKCγ在内脏高敏感状态下跨器官敏化中的作用 被引量:1 2011年 背景:内脏-内脏之间存在广泛的伤害性传入会聚和相互作用,在跨器官痛觉过敏的发生中起重要作用。目的:在内脏高敏感状态下建立跨器官敏化大鼠模型,探讨蛋白激酶Cγ(PKCγ)对跨器官内脏敏感性的调控作用。方法:Sprague-Dawley大鼠随机分为4组,其中3组在鸡卵清蛋白(OVA)基础致敏联合结直肠芥子油(MO)灌注建立结直肠-膀胱跨器官敏化模型的基础上,分别鞘内注射PKCγ特异性抑制剂GF109203X、0.9%NaCl溶液(NS)或不予鞘内注射,另一组为正常对照组。各组大鼠行梯度结直肠扩张/膀胱扩张(CRD/UBD),根据腹壁肌电活动曲线下面积(AUC)评估内脏敏感性的变化。结果:各组UBD梯度扩张刺激体积均与腹壁肌电活动AUC显著相关(P<0.05)。UBD扩张体积为1.0、1.5、2.0 ml以及CRD扩张压力为40、60、80 mm Hg时,OVA+MO组AUC显著高于正常对照组(P<0.05);UBD扩张体积为1.5、2.0 ml以及CRD扩张压力为60、80 mm Hg时,OVA+MO+GF109203X组AUC较OVA+MO+NS组显著降低(P<0.05)。结论:鞘内注射PKCγ特异性抑制剂能逆转跨器官交叉内脏高敏感性,提示PKCγ在跨器官敏化的产生和维持中起重要作用。 杨敏 陈东风 张波 王正国关键词:蛋白激酶CΓ 内脏高敏感性 蛋白激酶Cγ基因在脊髓背角跨器官敏化调控中的作用及其机制 2010年 目的探索在内脏高敏感状态下,跨器官敏化模型鼠脊髓背角蛋白激酶(PKC)γ基因表达的改变并探索其与内脏痛敏程度之间的相关性,寻求调控跨器官敏化的新靶点。方法采用鸡卵清蛋白(OVA)基础致敏联合结直肠芥子油(MO)灌注的方法建立跨器官敏化大鼠模型。30只SD大鼠随机分为:正常对照组(A组,n=7);跨器官敏化模型组(B组,n=8),给予OVA基础致敏联合MO结肠灌注;OVA+MO+生理盐水对照组(C组,n=7),给予OVA基础致敏联合MO结肠灌注,鞘内注射生理盐水10μl;OVA+MO+PKCγ特异性抑制剂(GF109203X)组(D组,n=8),OVA基础致敏联合MO结肠灌注,鞘内注射GF109203X10μl。采用免疫荧光染色技术及Westernblotting检测各组大鼠脊髓PKCγ的表达情况,并探讨PKCγ表达与内脏痛敏程度之间的关系。结果免疫荧光染色结果显示,跨器官敏化模型组大鼠L4-6脊髓背角组织PKCγ蛋白表达量(98.99±7.73)明显多于正常对照组(56.14±6.22,P<0.05);而鞘内注射GF109203X的D组大鼠PKCγ表达量显著降低,明显低于鞘内注射生理盐水的C组(56.83±7.07vs89.59±9.90,P<0.05)。Westernblotting检测结果也显示,B组大鼠L4-6脊髓背角组织中PKCγ的表达量(1.538±0.228)与A组(1.065±0.064)相比显著增加(P<0.001);D组大鼠PKCγ表达量(1.124±0.169)与C组大鼠(1.605±0.224)比较则显著降低(P<0.001)。结论采用OVA基础致敏联合MO结肠灌注可成功建立跨器官敏化大鼠模型,脊髓背角组织中PKCγ参与了跨器官内脏痛敏信号的传递,在跨器官敏化的产生和维持中发挥了重要作用。 杨敏 陈东风 张波 王正国关键词:蛋白激酶C 脊髓 食管内脏高敏感性动物模型的建立和评价 被引量:9 2008年 目的建立食管内脏高敏感性动物模型。方法采用腹腔注射鸡卵清蛋白(OVA)基础致敏联合食管酸灌注的方法处理SD大鼠,并采用免疫组织化学方法和显微图像分析技术评价内脏高敏感性-食管化学刺激大鼠模型的可靠性。结果OVA基础致敏联合食管酸灌注组大鼠被激活了一个复杂而广泛的大脑网络,其在额顶皮质、岛叶、扣带皮质、中央杏仁核、Klliker-Fuse核、疑核、臂旁核、下丘脑室旁核、丘脑室旁核、三叉旁核、孤束核、最后区、延髓网状核等Fos样免疫活性(FLI)神经元的数目均显著高于其余各组(P<0.05)。模型组大鼠在中央杏仁核、臂旁核、室旁核、三叉旁核、孤束核的FLI阳性产物的平均光密度(OD)值亦较其余各组明显增高(P<0.05)。结论预先腹腔注射鸡卵清蛋白基础致敏联合食管酸灌注可成功建立食管内脏高敏感性动物模型。 杨敏 陈东风 房殿春关键词:内脏高敏感性 C-FOS 免疫组织化学 食管酸灌注 卵清蛋白 孤啡肽对内脏高敏感模型大鼠跨器官交叉内脏痛觉过敏的影响 2010年 目的 观察内脏高敏感状态下鞘内注射孤啡肽对跨器官交叉内脏痛觉过敏的影响.方法 成年雌性Sprague-Dawley大鼠44只,采用鸡卵清蛋白基础致敏联合结直肠芥末油灌注方法建立跨器官交叉-内脏痛觉过敏大鼠模型,并分为对照组(14只,造模+鞘内注射0.9%氯化钠溶液)、模型组(14只,造模)和孤啡肽组(16只,造模+鞘内注射孤啡肽).记录梯度膀胱扩张刺激(0.5~2.0 ml,20 s)时的腹壁内脏运动反射(VMR)肌电图,评估鞘内注射孤啡肽对结直肠芥末油灌注诱导的跨器官交叉-内脏痛觉过敏的影响.采用连续膀胱灌注测压法研究孤啡肽对结直肠芥末油灌注诱导的膀胱功能紊乱的影响.结果 行1.0、1.5、2.0 ml膀胱扩张刺激时,模型组扩张期与基线期肌电活动曲线下面积的差值明显高于对照组(P值分别=0.006、0.015和0.0331);在1.5和2.0ml时,孤啡肽组的差值则较模型组明显降低(P值分别=0.016和0.031).与对照组比较,模型组大鼠呈现膀胱功能紊乱,最大尿流压力显著降低、尿流频率显著增高(P值均<0.01),孤啡肽组与模型组比较则最大尿流压力显著增高、尿流频率显著降低(P值均<0.01).结论 鸡卵清蛋白基础致敏联合结直肠芥末油灌注可成功建立跨器官(直肠-膀胱)交叉内脏痛觉过敏大鼠模型.在内脏高敏感状态下,孤啡肽可在脊髓水平对芥末油灌注诱导的跨器官交叉内脏痛觉过敏及膀胱功能紊乱起到明显的调节及抗内脏伤害作用. 杨敏 陈东风 张波 王正国关键词:止痛 孤啡肽