辽宁省科学技术农业攻关计划项目(2011205001) 作品数:5 被引量:40 H指数:4 相关作者: 侯红漫 张公亮 孙黎明 杨方威 冯叙桥 更多>> 相关机构: 大连工业大学 渤海大学 更多>> 发文基金: 辽宁省科学技术农业攻关计划项目 更多>> 相关领域: 轻工技术与工程 生物学 更多>>
大连海湾仿刺参肠道细菌多样性的16S rDNA分析 被引量:1 2014年 采用构建16SrDNA克隆文库的方法对大连湾仿刺参肠道中的细菌进行了多样性研究,NCBI数据库中序列的Blast比对结果表明,大连湾仿刺参肠道细菌具有高度多样性。挑取149个阳性克隆子,经HinfⅠ和HaeⅢ限制性内切酶谱型分析后得到36个可操作分类单元(OTUs)进行序列测定,克隆文库库容覆盖率为75.8%,结果是大连湾仿刺参肠道细菌分属于14种(属),主要为弧菌(Vibiro),优势菌群为Proteobacteria,占86.1%。用CLUSTAL X软件对36个OTUs序列和NCBI基因库中最相似的序列进行分析,应用MEGA 4软件中neighbor-joining方法构建系统发育树,确定大连湾仿刺参肠道细菌与已知菌之间基因系统进化关系。 高美玲 张公亮 侯红漫关键词:仿刺参 RDNA 肠道细菌 多样性 应用SYBR GreenⅠ溶解曲线检测食源性单增李斯特菌 被引量:6 2013年 基于单增李斯特菌hlyA基因和李斯特菌属的16sRNA基因分别合成两对引物,确立SYBR GreenⅠ荧光PCR检测单增李斯特菌两个特异性基因的最佳反应体系及条件,反应液经凝胶电泳验证,验证结果显示,扩增出的两条不同大小、不同T_m值的目的核酸片段,分别对应两条荧光PCR溶解曲线上的两个独立波峰。基于单增李斯特菌hlyA基因建立标准曲线,相关系数为0.996,最低检出限约为89CFU/mL。为检验方法的可行性,对鲜活白蚬子样品中分离出的疑似菌株进行实际检测,所得阳性结果经国家标准方法(GB4789.30-2010)验证,验证结果表明,SYBR GreenⅠ荧光PCR实际检测阳性结果与GB4789.30-2010检测结果一致。 王昊宇 张公亮 侯红漫关键词:单增李斯特菌 SYBR 脱落酸的生物合成及对水果成熟的调控研究进展 被引量:19 2016年 作为一种重要的植物激素,脱落酸(abscisic acid,ABA)除具有引起植物芽体休眠、叶子脱落、气孔关闭、抑制植株生长和增强植物抗逆性等生理作用外,在果实生长发育和成熟衰老的过程中也具有重要的调控作用。高等植物组织中ABA生物合成主要是通过C40类胡萝卜素的间接途径来实现的。植物内源ABA的含量水平处于动态平衡状态,受其生物合成和分解代谢等因素影响,在此过程中有关基因转录表达水平和酶活性起着关键作用。内源ABA含量的升高会导致水果成熟和果肉软化,ABA可能同时调控了呼吸跃变型和呼吸非跃变型水果的成熟衰老。探究ABA的生物合成及其调控作用,对揭示水果的生长发育、品质形成、着色软化、成熟衰老等过程具有重要的现实意义。本文综述了ABA及其生成代谢相关基因调控水果成熟的研究进展,并展望了ABA在提高水果品质、延长水果货架期等方面的商业应用。 杨方威 段懿菲 冯叙桥关键词:脱落酸 生物合成 水果 即食海参优势腐败菌群体感应信号分子识别 被引量:5 2015年 为了研究即食海参革兰氏阴性腐败菌是否具有以群体感应介导的腐败特性,以根癌农杆菌CF11为指示菌,检测即食海参优势腐败菌H-3产生AHLs信号分子,结果 H-3在菌体生长至20 h时的AHLs活性最高。质谱分析发现H-3产生N-己酰基-高丝氨酸内酯(C6-HSL)。添加适量外源信号分子能促进菌株H-3生物膜的形成,降解H-3的AHLs后可阻断其蛋白酶的产生。经16S r DNA鉴定该菌为即食海参优势腐败菌。结论:即食海参优势腐败菌存在以AHLs介导的群体感应系统,与即食海参的腐败密切相关。 葛静慧 崔玉娜 王晶 张公亮 孙黎明 侯红漫关键词:优势腐败菌 信号分子 双重PCR快速检测海水贝类中副溶血性弧菌 被引量:9 2015年 应用双重PCR技术快速检测新鲜海水贝类样品中副溶血性弧菌。根据副溶血性弧菌tdh基因及tl基因设计两对引物,对影响PCR的主要因素进行优化,确定双重PCR最佳反应体系及条件,该方法对于副溶血性弧菌纯培养物的最低检出限为2.5×102 cfu/mL,模拟污染样品的检测限为10cfu/g。对市场随机抽取的77份新鲜红螺样品、63份方形马珂蛤样品、61份菲律宾蛤仔进行检测,8h内快速检出PCR阳性样品分别为15份、8份、5份,采用国家标准方法对PCR结果进行验证,验证结果表明,PCR阴性样品未检出副溶血性弧菌;PCR阳性样品均有副溶血性弧菌检出,春夏两个季节里红螺中副溶血性弧菌的检出率分别为13.3%、25%,方形马珂蛤为6.7%、21.2%,菲律宾蛤仔为0、16.1%。该方法具有较高的灵敏度和准确性,能快速检验海水贝类中副溶血性弧菌。 强世龙 张公亮 孙黎明 侯红漫关键词:副溶血性弧菌 双重PCR 海水贝类