目的选择并比较L-赖氨酸脱羧酶、CYP450(CYP450-71A1和CYP450-72A1)、加双氧酶、N-甲基转移酶等石杉碱生物合成途径可能的关键基因(酶)在华南马尾杉(Phlegariurus austrosinicus(ching)L.B.Zhang)和有柄马尾杉(Phlegariurus petiolatus(C.B.Clarke)H.S.Kung et L.B.Zhang)中差异表达的情况。方法以相同生境但石杉碱甲含量差异明显的一对石杉科马尾杉属植物华南马尾杉与有柄马尾杉为试材,提取总RNA并进行总RNA的反转录,根据文献分别设计引物,开展荧光定量PCR实验并对2者的差异表达结果进行分析。结果加双氧酶基因在高含量石杉碱甲的有柄马尾杉中表达,但在华南马尾杉中表达量极低或者不表达;在有柄马尾杉植体中相对高表达的基因有L-赖氨酸脱羧酶基因(约180倍),CYP450-71A1基因(约33倍),CYP450-72A1基因(约223倍);N-甲基转移酶基因在2种材料中表达量接近。结论加双氧酶基因极有可能编码石杉碱生物合成限速酶和关键酶,导致2种植物中石杉碱甲的含量明显差异;L-赖氨酸脱羧酶基因、CYP450-71A1基因、CYP450-72A1基因编码的蛋白对石杉碱甲的积累具有促进作用;N-甲基转移酶基因应是编码定位于石杉碱生物合成途径下游石杉碱与石杉碱甲之间转换的催化酶,但非关键限速酶。
