广东省科技计划工业攻关项目(B30202)
- 作品数：9 被引量：58H指数：4
- 相关作者：孟凡义孙启鑫扶云碧毛平彭盘俐更多>>
- 相关机构：南方医科大学南方医院广州市第一人民医院中国科学院广州生物医药与健康研究院更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人脐血单个核细胞体外扩增后植入NOD/SCID小鼠重建多系造血被引量：13
- 2006年
- 目的探讨人脐血单个核细胞（MNC）体外扩增后植入能力的改变，以及对NOD／SCID小鼠造血重建的影响。方法采用不同细胞因子组合对人脐血MNC进行短期无血清培养扩增，比较扩增后的效果及细胞凋亡的变化；将扩增6d后的人脐血MNC植入经半致死剂量照射的NOD／SCID小鼠体内，观察小鼠6周后的存活率和造血重建情况。结果人脐血MNC在干细胞因子（SCF）、酪氨酸激酶受体3配基（FL）、白细胞介素6（IL-6）和白细胞介素3（IL-3）细胞因子共同作用下，培养6～11）d获得最佳扩增效果，同时细胞表面膜联蛋白V（Annxin V）的表达明显减少；移植6周后有55．6％的小鼠存活，存活小鼠的骨髓、脾和胸腺细胞中均能检测出人类CD45、CD34、CD33、CD3和CDl9抗原，外周血提取的DNA可检测出人特异的Cart—Ⅰ基因和Alu基因。结论SCF＋FL＋IL-6＋IL-3细胞因子协同作用能有效扩增人脐血MNC，MNC扩增6d后可成功植入N（）D／SCID小鼠体内，并帮助小鼠重建多系造血。
- 毛平彭盘俐许力
- 关键词：脐血干细胞移植小鼠
- 蛋白酶体抑制剂硼替佐米诱导髓系白血病细胞株 HL60凋亡的机制研究被引量：19
- 2006年
- 目的探讨蛋白酶体抑制剂硼替佐米诱导髓系白血病细胞 HL60凋亡的机制。方法四甲基偶氮唑盐(MTT)法、Hoechst33342染色形态学观察及流式细胞仪证实细胞凋亡,Western 印迹检测 B 细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Caspase-9、Caspase-3、多聚 ADP-核糖聚合酶(PARP)蛋白表达。结果硼替佐米对 HL60细胞的增殖抑制作用呈浓度和时间依赖关系,30 nmol/L 的硼替佐米作用24 h 能明显抑制 HL60细胞增殖,抑制率为76％,形态学观察可见明显的胞核凝聚、固缩及碎裂;流式细胞仪检测可见明显的凋亡峰凋亡率为62.6％;Western 印迹检测显示 Bcl-2表达下降,Caspase-9、Caspase-3、PARP 蛋白均裂解激活。结论硼替佐米能诱导髓系白血病细胞 HL60凋亡,其机制与Bcl-2蛋白的抑制及 Caspase 凋亡信号途径的激活有关。
- 扶云碧孙启鑫孟凡义谢军周光飚
- 关键词：脱噬作用白血病硼替佐米HL60细胞
- 血清半乳甘露聚糖诊断恶性血液病并发侵袭性真菌感染的应用价值被引量：4
- 2009年
- 目的应用半乳甘露聚糖(GM)试剂盒检测恶性血液病并发侵袭性真菌感染(IFI)高危因素患者的血清GM值,评价其对IFI的诊断、疗效预测价值。方法采集83例具有IFI高危因素患者的254份血清,按GM检测试剂盒说明ELISA法检测抗真菌治疗前后GM抗原水平变化。参照IFI分层诊断标准进行评价。结果GM阳性患者36例,其中确诊组3例、临床诊断组5例、拟诊组23例、不符合IFI组5例,阳性率分别为75%、63%、51%和19%;本次GM试验灵敏度0.67,特异度0.81,阳性预测值0.62,阴性预测值0.84;GM阳性患者选择覆盖曲霉的抗生素治疗有效率62%,治疗前、后GM平均值各为1.65±0.85和0.58±0.30,P<0.05;而用氟康唑治疗有效率仅为25%。GM阴性患者采用氟康唑或两性霉素B、伊曲康唑均可,各药物间疗效无明显差别,治疗前、后平均GM值各为0.25±0.10和0.26±0.20,P>0.05。结论GM试验灵敏度中等、特异度较高,高危患者结合临床表现,GM试验检测阳性应立即抗曲霉治疗,动态检测GM值变化可有效判断治疗效果。
- 孙启鑫孟凡义谭筱江李军体蔡艳霞朱志刚
- 关键词：半乳甘露聚糖血液病侵袭性真菌感染
- STI571、三氧化二砷和Velcade对bcr/abl^+-CD34^+细胞增殖、凋亡的影响被引量：2
- 2007年
- 目的研究STI571、三氧化二砷(As2O3)和Velcade在单独及联合应用时对bcr/abl+-CD34+细胞增殖、凋亡的影响。方法提取慢性粒细胞白血病患者骨髓的bcr/abl+-CD34+细胞,用STI571、As2O3、Velcade单独及联合处理96h,通过CCK-8分析及流式细胞术分别检测细胞增殖、凋亡的变化,并用Hoechst33342染色及荧光显微镜技术观察凋亡细胞形态学改变。同时检测上述方案对正常骨髓CD34+细胞的抑制作用。结果STI571、As2O3及Velcade对bcr/abl+-CD34+细胞的作用呈剂量依赖性,其中在低浓度时以抑制增殖作用为主,促凋亡作用不明显。当0.25～2μmol/LSTI571分别与2.5μmol/LAs2O3及15nmol/LVelcade联合后,抑制率和凋亡率均显著提高,呈相加或协同作用,且对正常CD34+细胞的抑制作用无进一步增强。结论As2O3及Velcade与STI571联合能够增强对BCR/ABL+-CD34+细胞的作用,具有一定临床意义。
- 李澄宇孟凡义孙启鑫扶云碧李利易正山宋兰林
- 关键词：BCR/ABLCD34^+细胞STI571三氧化二砷VELCADE
- 三例急性髓系白血病患者基因表达谱的演变被引量：2
- 2005年
- 目的研究急性髓系白血病(AML)患者初诊与复发时的基因表达谱差异,探讨难治性AML的发病机制。方法应用Agilent Human1B寡核苷酸基因芯片,动态检测了3例AML-M2a患者初诊、复发时骨髓单个核细胞的基因表达谱差异。结果在检测的20173个基因中,有10个基因在3例患者初诊、复发时共同差异表达,其中7个基因在复发时均共同上调,3个基因在复发时均表现下调。结论DAPK1等10个基因的表达变化可能与AML-M2a发病和复发有关,这些新基因的发现可能对早期诊断难治性AML具有重要价值,同时为难治性AML提供新的治疗靶点。
- 唐加明孟凡义马文丽
- 关键词：急性髓系白血病基因表达谱寡核苷酸基因芯片技术
- G-CSF对慢性粒细胞白血病患者bcr/abl^+-CD34^+细胞增殖、分化的影响被引量：1
- 2007年
- 目的了解 G-CSF 对 bcr/abl^+-CD34^+细胞增殖、分化的影响。方法采集慢性粒细胞白血病(CML)患者的 ber/abl^+-CD34^+细胞,分别以0、10、100、1000 ng/ml 的 G-CSF 与之共培养,并以正常骨髓 CD34^+细胞为对照,通过锥虫蓝拒染法、流式细胞术和光学显微镜观察研究其细胞增殖、周期分布、抗原分化和形态变化特点。结果所有实验组 ber/abl^+-CD34^+细胞均明显增长,其中 G-CSF10 ng/ml 组培养48、96 h,其细胞数量著高于同期无 G-CSF 组(P<0.05);而正常 CD34^+细胞数只在G-CSF 存在的情况下增长明显,其中 G-CSF 100 ng/ml 组培养48、96、144 h 细胞数均显著高于同期无G-CSF 组(P 值分别为<0.05,0.01,0.01);G-CSF 10、100、1000 ng/ml 组的 ber/abl^+-CD34^+细胞培养144 h 其 G_0/G_1期比例显著低于 G-CSF 空白组(P<0.05);而正常 CD34^+细胞 G-CSF 10、100、1000ng/ml 组培养48和96 h 其 G_0/G_1期比例均明显低于无 G-CSF 组(P<0.01);bcr/abl^+-CD34^+细胞及正常 CD34^+细胞 CD34抗原表达均随培养时间延长而下降,伴随 CD33和 CD13抗原先升后降,其变化与 C-CSF 浓度无关,但 ber/abl^+-CD34^+细胞的各抗原分化显著快于正常 CD34^+细胞。ber/abl^+-CD34^+细胞和正常 CD34^+细胞均随着增殖分化表现出终末细胞的形态特征。结论 G-CSF 能促进ber/abl^+-CD34^+细胞及正常 CD34^+细胞的增殖,但并非前者增殖的必要条件。ber/abl^+-CD34^+细胞比正常 CD34^+细胞分化更快,但两类细胞的分化速度均与 G-CSF 浓度无关。
- 李澄宇孟凡义孙启鑫扶云碧江千里易正山宋兰林
- 关键词：白血病髓样慢性CD34
- 基质细胞联合细胞因子对脐血CD133阳性细胞体外扩增和粘附分子表达的影响被引量：1
- 2007年
- CD133是新近发现的造血干细胞表面标志，众多的实验表明，脐血CD133^＋细胞能在体外得以扩增，我们选用脐血单个核细胞（MNC）作为培养的起始细胞，应用实验室已经建立的胚胎骨髓基质细胞联合细胞因子的造血细胞体外培养体系，研究脐血MNC中CD133^＋细胞在此培养体系的扩增效果，并检测CD133^＋细胞表面粘附分子CD44、CD62L的表达率，评估扩增后的脐血CD133^＋细胞的归巢能力。
- 卢丽娜毛平曾进龙王彩霞杜庆华
- 关键词：CD133^+细胞脐血单个核细胞细胞体外扩增细胞因子粘附分子表达细胞表面标志
- IL-3影响脐血单个核细胞体外扩增、凋亡及再植入能力的研究被引量：1
- 2006年
- 目的探讨细胞因子IL-3对脐血单个核细胞（MNC）体外扩增、凋亡和植入能力的影响，寻找扩增后脐血应用于临床移植的可行方案。方法采用早期作用的细胞因子组合对脐血MNC进行短期无血清悬浮培养，比较有或无IL-3支持的扩增效果和细胞凋亡变化；MNC扩增6d后移植给亚致死剂量照射的非肥胖糖尿病／严重联合免疫缺陷（NOD／SCID）小鼠，观察6周后存活小鼠的人脐血细胞植入情况。结果脐血MNC在有IL-3支持的体系中培养6～10d获得最佳扩增效果，同时细胞表面膜联蛋白V（annexinV）的表达明显减少；移植6周后存活小鼠的骨髓、脾和胸腺细胞中能检出人类CD45抗原，外周血提取的DNA也能检出人特异的Alu序列。结论短期培养下IL-3有助于脐血单个核细胞体外适度扩增，减少凋亡且并不损伤扩增后细胞的植入能力。
- 彭盘俐毛平许艳丽杜庆华王汉平谢健晋
- 关键词：脐血白细胞介素3小鼠
- 氟达拉滨联合不同剂量阿糖胞苷治疗复发、难治性急性白血病86例分析被引量：16
- 2006年
- 氟达拉滨（Flud）、阿糖胞苷（Ara-C）、粒细胞集落刺激因子（G-CSF）组成的FLAG方案治疗复发、难治性急性髓系白血病（AML）的完全缓解（CR）率多在50%左右,而且不良反应明显.我们应用Flud联合不同剂量Ara-C治疗复发、难治性急性白血病86例,旨在探讨适合中国患者的最佳方案.
- 孟凡义徐兵杜欣汪明春朱康儿
- 关键词：难治性急性白血病阿糖胞苷氟达拉滨难治性急性髓系白血病粒细胞集落刺激因子ARA-C
