江苏省自然科学基金(BK2009195)
- 作品数：4 被引量：11H指数：2
- 相关作者：崔素芬包广宇张玲玲覃文新陆奎英更多>>
- 相关机构：扬州市第一人民医院上海交通大学更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Dickkopf-1基因在宫颈鳞癌组织中的甲基化研究被引量：3
- 2012年
- 目的检测Dickkopf-1（DKKl）基因在宫颈鳞癌组织中的甲基化状态，分析其临床意义。方法采用甲基化特异性聚合酶链反应（MSP）检测28例宫颈炎、20例CINI、31例CINⅡ～Ⅲ及36例宫颈鳞癌组织中DKKl基因启动子区甲基化情况，并分析富颈鳞癌组织中DKKl基因甲基化水平与临床病理特征之间的相关性。结果宫颈炎、CINI、CINⅡ～Ⅲ和宫颈鳞癌组中DKKl基因甲基化阳性率分别为10．7％、10％、32．3％和44．4％。宫颈鳞癌组织的甲基化阳性率明显高于宫颈炎和CINI组，DKKl基因启动子甲基化与肿瘤分化程度以及肿瘤的直径相关。结论DKKl基因启动子区甲基化检测可能为宫颈鳞癌的诊断以及鉴别诊断提供一个新的检查方法。
- 崔素芬包广宇张玲玲沈秋瑾覃文新
- 关键词：宫颈肿瘤DICKKOPF-1DNA甲基化
- 重组DKK1及pCMV-HA2/DKK1重组质粒对宫颈癌细胞体外增殖作用的影响被引量：7
- 2012年
- 目的观察人重组DKK1和pCMV-HA2/DKK1重组质粒对体外培养宫颈癌细胞株Hela细胞增殖的影响。方法体外培养Hela细胞,非放射性细胞增殖(MTS)法检测重组DKK1、抗DKK1抗体和人源DKK1真核表达质粒pCMV-HA2/DKK1对Hela细胞增殖作用的影响,western blot及ELISA法检测转染pCMV-HA2/DKK1重组质粒后Hela细胞中DKK1蛋白的表达情况。结果与对照组相比,10,50 ng/mL的DKK1对Hela细胞有明显抑制作用(F分别为162.31,184.65,P均<0.01);抗DKK1抗体对Hela细胞的增殖影响无统计学意义(P均>0.05);pCMV-HA2/DKK1重组质粒转染Hela细胞后对细胞增殖有明显抑制作用,加入抗DKK1抗体不能完全拮抗pCMV-HA2/DKK1对Hela细胞的抑制作用;pCMV-HA2/DKK1重组质粒转染Hela细胞后可检测到DKK1蛋白表达,经western blot证实为DKK1蛋白(Mr约为38 000),ELISA法结果表明,DKK1蛋白的分泌量随培养时间的延长而增加,第5天时达峰值(19.82 mg/L)。结论重组DKK1和人源DKK1真核表达质粒pCMV-HA2/DKK1可抑制Hela细胞的增殖,抗DKK1抗体可部分抵抗DKK1的抑制作用,提示DKK1在宫颈癌肿瘤发生中对肿瘤细胞具有抑制作用。
- 陆奎英崔素芬徐亮张玲玲丁永玲覃文新包广宇
- 关键词：真核表达质粒HELA细胞
- Wnt信号通路抑制因子Dickkopf-1在宫颈癌中的研究进展被引量：2
- 2012年
- Wnt信号通路的异常激活在肿瘤的发病和进展过程中发挥着重要作用。Dickkopf-1(DKK-1)作为Dickkopf家族中的一员,是经典Wnt信号通路的胞外拮抗剂。目前研究发现,经典Wnt信号通路和DKK-1参与宫颈癌的发生、发展,抗DKK-1中和抗体BHQ880治疗多发性骨髓瘤已经进入临床Ⅰ/Ⅱ期试验。现就DKK-1在宫颈癌中的研究进展予以综述,为宫颈癌的诊断、治疗及预后判断提供一个新的、重要的生物学标志物。
- 崔素芬包广宇张玲玲
- 关键词：DICKKOPF-1WNT信号通路宫颈癌
- DKK1真核表达质粒的构建及表达产物鉴定被引量：1
- 2012年
- 目的构建人DKK1基因的真核表达质粒,表达、纯化、鉴定其表达产物。方法自宫颈癌组织提取癌细胞,抽提mRNA,RT-PCR获得人DKK1基因片断,构建重组质粒pCMV-HA2/DKK1,EcoRⅠ酶切、测序鉴定重组质粒;借助脂质体将载体瞬时转染入Free-Style293-F细胞(无血清培养)蛋白印迹法检测DKK1蛋白。结果 RT-PCR获得片断与预期结果相符,酶切鉴定、测序鉴定证实pCMV-HA2/DKK1重组质粒构建成功;DKK1蛋白分泌表达在Free-Style293-F细胞培养液中,WesternBlot鉴定表达产物为DKK1蛋白。结论成功构建了人DKK1的真核表达质粒,并对该基因的真核表达产物进行鉴定,为下一步的DKK1蛋白对肿瘤发生中的生物学活性研究奠定基础。
- 徐亮陆奎英崔素芬包广宇
- 关键词：蛋白质类哺乳动物基因表达
