黑龙江省自然科学基金(ZJN0604-02)
- 作品数：23 被引量：84H指数：6
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- 相关机构：东北林业大学国家林业局更多>>
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- 相关领域：生物学农业科学医药卫生更多>>
- 东北林蛙皮肤抗菌肽基因在毕赤酵母中表达条件的优化被引量：1
- 2013年
- 目的:确定毕赤酵母表达东北林蛙皮肤抗菌肽dybowskin-1ST基因的最佳诱导表达条件。方法:本研究将PCR合成的dybowskin-1ST基因克隆到毕赤酵母表达载体pPIC9K中,构建pPIC9K-dybowskin-1ST诱导型表达载体。表达载体经线性化后转化巴斯德毕赤酵母GS115,应用BMMY培养基诱导表达。采用单一变量法及正交试验法,对甲醇诱导的浓度、时间和温度进行了优化,通过SDS-PAGE电泳分析和体外抑菌试验检测目的肽表达丰度。结果:最佳诱导条件:甲醇终浓度为0.5%、诱导时间为72 h、诱导温度为28℃,在此条件下表达产物SDS-PAGE电泳条带灰度值为117,抑菌环直径为28.16mm,可为规模化的抗菌肽表达提供参考数据。
- 崔绍鹏周旋朱熬肖向红张晶钰
- 关键词：抗菌肽毕赤酵母
- 东北林蛙烂趾病病原菌的分离鉴定及药敏试验被引量：2
- 2014年
- 对东北林蛙烂趾病病原菌进行分离鉴定,并对其药物敏感性进行研究。结果表明:从东北林蛙患病趾处分离到1株溶血性致病菌,经16S rDNA序列分析法鉴定为嗜水气单胞菌。通过对23种抗生素的药敏试验表明,此菌对氟喹诺酮类(如环丙沙星、培氟沙星、诺氟沙星),部分头孢类抗生素(如头孢呋辛、头孢噻肟、头孢吡肟),β-内酰胺类抗生素(如亚胺培南、氨曲南)高度敏感;对部分头孢类抗生素(如头孢噻吩、头孢西丁、头孢他啶),氨基糖苷类抗生素(如卡那霉素、庆大霉素、链霉素)中度敏感;对青霉素类如(青霉素、苯唑西林、氨苄西林、阿莫西林)有耐药性。说明可以考虑用氟喹诺酮类、头孢类或β-内酰胺类抗生素防治东北林蛙烂趾病。
- 张建平肖向红柴龙会
- 关键词：东北林蛙嗜水气单胞菌药敏试验
- 东北林蛙皮肤分泌物中特定范围内蛋白和多肽凝胶层析分析被引量：2
- 2007年
- 利用凝胶色谱法对东北林蛙皮肤分泌物中蛋白质及多肽组分分子量的分布进行分析。应用葡聚糖凝胶Sephadex G-100、G-50、G-25,利用已知分子量的牛血清蛋白(Mr 66 000)、卵清蛋白(Mr 45 000)、细胞色素C(Mr 11 700)、胰岛素(Mr 5 700)、胰高血糖素(Mr 3 550)等作为标准品,对流动相、洗脱速度、色谱条件等进行反复试验,用0．5％甲醇洗脱液(含0．14 mol／L NaCl)、0．4 ml／min流速,筛选东北林蛙皮肤分泌物中分子量Mr 4 000左右的蛋白质及多肽,分离获得了大量相应分子量范围的蛋白及多肽组分。该实验方法简便,结果重现性好,适合作为生物工程产品的质控方法。
- 孙芳肖向红杨琳
- 关键词：东北林蛙皮肤蛋白质多肽
- ROS与过氧化氢的研究现状及新进展被引量：5
- 2020年
- ROS作为动植物体内一系列生理生化反应的调控物质,长期备受关注。ROS中以过氧化氢为代表,是近年来研究的热点。近期研究表明,过氧化氢作为信号分子,在调控细胞的增殖、衰老、凋亡等方面起到不可替代的作用,成为当下研究热点。本综述就以过氧化氢为代表的ROS在机体内的产生、作用机理、信号通路及其与疾病治疗相关的前沿进展方面进行了讨论,旨在联系以过氧化氢为代表的ROS与机体相关的代谢途径与生理病理反应,为将来的研究及临床治疗等方面提供便利。
- 凤琦张晶钰
- 关键词：ROS过氧化氢细胞凋亡信号通路
- 电刺激后东北林蛙皮肤分泌物及其抗微生物肽组分的动态恢复被引量：1
- 2012年
- 东北林蛙皮肤分泌物排空后,在不同时间点收集其皮肤分泌物,分析皮肤分泌物及其中抗菌肽谱的动态恢复规律。结果表明:电刺激排空后的第0～21天时间范围内东北林蛙皮肤分泌物总量的恢复呈递增趋势;高效液相色谱显示不同时间收集的皮肤分泌物的组分差异不显著(P>0.05,n=5),但各组分恢复的时间并不同步;用大肠杆菌和金黄色葡萄球菌对恢复较快的2个组分峰成分进行抑菌试验,发现2组分均有较强的抑菌活性。用ESI-MS/MS对2组份进行质谱鉴定,确定其氨基酸序列。东北林蛙皮肤分泌物中抗微生物肽的恢复表达优先于其他多肽,该免疫防御策略可为东北林蛙在复杂环境中的生存提供保证。
- 肖向红马建章苗慧敏申屠德君张晶钰柴龙会
- 关键词：东北林蛙皮肤分泌物抗微生物肽环境压力适应性
- 低温胁迫对东北林蛙雄性成体GP、PEPCK比活性的影响被引量：6
- 2012年
- 采用葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法、蒽酮比色定糖法分别检测低温胁迫下东北林蛙血糖和肝糖原、肌糖原的含量,并通过6-磷酸葡萄糖脱氢酶偶联比色法、乳酸脱氢酶偶联比色法分别检测低温胁迫下东北林蛙肝脏、肌肉糖原磷酸化酶(Glycogen phosphorylase,GP)和肝脏、肾脏磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)的比活性,以探讨低温对东北林蛙GP、PEPCK比活性的影响。结果表明:随着环境温度降低,东北林蛙血糖水平逐步升高,糖原含量逐步降低,与对照组相比,各低温组血糖升高极显著(P<0.01),而肝糖原和肌糖原含量降低极显著(P<0.01);与对照组相比,0℃组、-1℃组肝脏、肌肉组织GP比活性升高极显著(P<0.01),且肝脏、肾脏PEPCK比活性升高极显著(P<0.01)。说明低温胁迫促使东北林蛙糖原含量降低,糖原分解和糖异生限速酶比活性升高,进而血糖含量升高,提示血糖作为抗冻保护剂在东北林蛙冬眠中发挥重要作用。
- 李秀峰肖向红柴龙会张晶钰
- 关键词：东北林蛙冬眠糖原磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶
- 一类蛙源非典型结构抗菌肽cDNA的克隆以及成熟肽的预测被引量：5
- 2010年
- 抗菌肽是两栖类非特异性免疫的重要组成部分,具有广谱的抗菌、抗病毒、抗肿瘤、抗寄生虫等活性,而且不易产生耐药性。抗菌肽的功能发挥与其特有的α螺旋结构密切相关,但是一些抗菌肽在水溶液中呈无规则卷曲,在类膜溶液中才转变成α螺旋,这类抗菌肽往往表现出极强的抗菌肽活性或细胞毒性,在药物开发中提供更多的利用潜能。本文从东北林蛙(Rana dybowskii)皮肤组织中,通过RT-PCR技术,克隆了一类无规则卷曲的抗菌肽,属于chensirin-2家族。19条不同的抗菌肽的cDNA序列共编码3种长度为14个氨基酸残基的成熟肽,分子量在1450.78-1460.82之间,理论等电点在9.53-9.70之间,3种抗菌肽都有两亲性和阳离子性,二级结构呈现无规卷曲。这些理化性质预示着这3种抗菌肽可能具有特殊的药用价值。
- 李晓平朱倩夏睿季菁菁刘冠群徐艳春
- 关键词：东北林蛙RANA抗菌肽分子克隆
- 东北林蛙皮肤及其腺体组织形态学观察被引量：13
- 2007年
- 本文观察了东北林蛙皮肤及其腺体组织形态学结构,结果表明:东北林蛙体表各部位皮肤薄厚不一,头部背侧皮肤最厚(224.4±5.46μm),后肢腹侧皮肤最薄(135.7±5.06μm),但基本结构相同,由表皮和真皮组成。表皮薄,为复层扁平上皮;真皮疏松层有大量腺体分布,主要是粘液腺和颗粒腺。粘液腺广泛分布于全身皮肤,颗粒腺多见于背部皮肤,以躯干背侧褶处体积最大。色素细胞分布于真皮浅层,以背侧皮肤多见。
- 刘满樱肖向红徐佳佳吴建平
- 关键词：东北林蛙皮肤组织形态学
- 嗜水气单胞菌胁迫下东北林蛙皮肤MyD88和TRAF6基因表达的动态变化被引量：7
- 2015年
- 采用高通量测序获得东北林蛙(Rana dybowskii)MyD88和TRAF6mRNA序列设计引物,将蛙类易感微生物嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila,Ah)经东北林蛙腹腔注射后,用荧光定量PCR技术分析蛙皮肤MyD88和TRAF6mRNA表达水平的变化,以期揭示东北林蛙在识别嗜水气单胞菌后,其机体TLR信号通路中相关分子的免疫效应。数据显示,处理后12h试验组皮肤MyD88和TRAF6mRNA的表达量与对照组相比有明显升高且达到峰值,分别为2.38倍和8.12倍,其中TRAF6mRNA表达水平尤为显著,在24h^48h仍处于较高水平,分别为对照组的4.32倍和2.54倍。结果表明,嗜水气单胞菌胁迫能促使东北林蛙机体TLR信号通路中的MyD88和TRAF6mRNA的表达量上调。本研究探讨了微生物侵袭时东北林蛙的TLR信号调控机制,为认识两栖类机体的先天免疫系统奠定了一定的理论基础。
- 史雪灿柴龙会牛曙东肖向红
- 关键词：嗜水气单胞菌东北林蛙MYD88TRAF6
- 东北林蛙皮肤中一类新抗菌肽cDNA的克隆及成熟肽的预测被引量：2
- 2007年
- 为进一步研究和开发高效广谱天然抗生素的抗菌肽,本文克隆东北林蛙(Rana dybowskii)的抗菌肽基因,并预测其成熟肽的有关性质。根据蛙属抗菌肽信号肽末端序列设计简并引物,以RT-PCR技术扩增皮肤中抗菌肽的cDNA,并进行克隆测序。用生物信息学软件分析cDNA序列特点,预测成熟肽的理化性质。研究发现一种长度为28个氨基酸残基的新抗菌肽dybowsin-1,该肽具有Rana box结构;与已发现的抗菌肽仅有35%的同源性;理论等电点在9.70-10.01之间;均呈阳离子性;从第3或4个氨基酸开始到第16个氨基酸形成α-螺旋结构,极性氨基酸位于螺旋轮的一侧,非极性氨基酸位于螺旋轮的另一侧;具有N-端疏水、C-端亲水的两亲性。一个个体表达5条cDNA序列编码3种不同的dybowsin-1分子,显示出该抗菌肽表达的多样性。序列分析显示,该抗菌肽可能由多基因座位编码。
- 朱倩徐艳春肖向红
- 关键词：东北林蛙RANACDNA
