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近交系小鼠微卫星DNA引物的筛选和Tm值优化研究被引量：4: 2012年; 目的通过对近交系小鼠微卫星引物的筛选和Tm值优化研究,以探索小鼠DNA多态性检测方法。方法随机选用32对位于小鼠不同染色体的微卫星引物,用PCR扩增方法对常用C57BL/6、C3H、BALB/c、DBA/2、129、FVB及SCID近交系小鼠DNA多态性进行扩增和电泳分析,并对其中25对引物的Tm值进行优化。结果 25对引物可稳定扩增,2对引物在不同品系小鼠间表现为单态性,23对引物在不同品系间呈多态性,10对引物呈显著多态性(3～4个态性)。结论所筛选和优化的25对微卫星引物,对不同品系小鼠DNA可稳定扩增,其电泳结果具有较高的DNA多态性,可反映不同品系小鼠的遗传概貌。; 刘先菊王艳蓉高子琪代小伟佟巍张丽芳刘云波; 关键词：近交系小鼠微卫星引物

雪貂空肠弯曲杆菌的分离与鉴定: 2010年; 从试验用雪貂分离到一株弯曲杆菌,通过菌落、菌体形态、生化特征、培养特性等生物学特性和PCR方法对所分离菌株进行鉴定,分离株经空肠弯曲杆菌VS1基因特异性引物PCR扩增为阳性,测序结果显示与空肠弯曲杆菌序列同源性达100%,结合生物学特性和PCR结果确定所分离菌株为空肠弯曲杆菌,该菌的分离鉴定为雪貂微生物检测标准的建立提供了理论依据。; 张丽芳佟巍代小伟刘先菊王艳蓉刘云波; 关键词：空肠弯曲杆菌

小鼠肝炎病毒金标快速检测方法的建立被引量：5: 2011年; 本试验旨在探讨一种能够快速、简便及特异检测MHV病毒的金标检测方法。采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记抗小鼠肝炎病毒(MHV)抗体,选择优化层析条件,建立双抗体夹心模式的免疫层析法试纸条对MHV进行检测。20 nm左右的胶体金颗粒、5.05μg为最低稳定抗体量(稳定0.5 mL胶体金)、M135层析材料、3%BSA是最佳封闭液。640μg/mL抗体蛋白为最适检测线包被浓度,而800μg/mL抗体蛋白为质控线最适包被浓度。此试纸条能10 min快速特异地检测出MHV抗原,阳性时检测线和质控线均显示红色,阴性时则只有质控线显示红色。结果表明,胶体金免疫层析方法能快速、特异、稳定地检测MHV抗原。; 胡晓燕佟巍刘先菊张丽芳刘云波; 关键词：小鼠肝炎病毒胶体金胶体金免疫层析法

雪貂葡萄球菌的分离与鉴定被引量：1: 2010年; 目的对雪貂分离菌株进行鉴定。方法通过菌落、菌体形态、生化特征等细菌学检测方法和药敏实验对所分离菌株进行鉴定。结果根据生物学特性和药敏实验确定所分离菌株为金黄色葡萄球菌和中间葡萄球菌。结论分离菌株为金黄色葡萄球菌和中间葡萄球菌。; 张丽芳佟巍刘先菊代小伟王艳蓉刘云波; 关键词：金黄色葡萄球菌

大鼠细小病毒KRV株培养方法的建立被引量：1: 2011年; 目的建立用大鼠胶质瘤细胞系(Rat glial cell line C6)替代大鼠原代胚细胞(Primary rat embryo cells,RE)来培养大鼠细小病毒(Kilham Rat Virus,KRV)的方法。方法将500 TCID50 KRV培养物接种到75T-C6细胞培养瓶中(细胞接种量为2×105/mL),培养过夜,待细胞病变CPE达++～+++时,分别用免疫荧光(FITC)鉴定所培养病毒的特异抗原,用血球凝集试验(HA)测定培养物上清的效价,用DNA测序鉴定所培养的病毒,最后用96孔板培养法测定KRV的TCID50。结果 KRV在接种到C6细胞的第4～5天,细胞发生明显的病变,CPE可达++++,FITC鉴定呈KRV抗原阳性,病毒的培养上清中HA效价为1∶5 120,测序结果表明,该病毒序列与NCBI中KRV序列同源性达98%,确定为KRV。收获的KRV的TCID50为104.6/0.1 mL。结论通过对C6细胞系培养KRV方法的标准化和对所培养病毒的一系列鉴定表明,用大鼠胶质瘤细胞系可以替代大鼠原代胚细胞系进行大鼠细小病毒的培养。; 刘先菊佟巍张丽芳王艳蓉高子琪仉惠敏荣蓉刘云波; 关键词：免疫荧光试验

浅谈实验动物病理检测被引量：1: 2010年; 实验动物病理检测是实验动物质量监督检验的重要环节,病理学研究是对实验动物质量综合评估的最好方法 ,针对目前的检测现状,本文在制定实验动物病理检测标准的重要性、病理检测内容以及检测标准的制定原则方面进行了讨论。; 代小伟刘云波; 关键词：实验动物病理检测

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中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目(DWS200906)