山东省科技发展计划项目(2009GG10002044)
- 作品数：10 被引量：68H指数：5
- 相关作者：张蓓沈若武宁华英沈卫郭云良更多>>
- 相关机构：青岛大学青岛大学医学院附属医院青岛市传染病医院更多>>
- 发文基金：山东省科技发展计划项目国家自然科学基金青岛市科技发展计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 单次尾静脉注射法阿霉素大鼠肾病模型的建立被引量：25
- 2013年
- 目的建立阿霉素大鼠肾病模型,并观察模型的动态变化。方法 26只Wistar雄性大鼠随机分为模型组(13只)和空白组(13只),模型组单次尾静脉注射阿霉素6.2 mg/kg,空白组注射等容积生理盐水。检测连续10周12 h尿蛋白定量、终末血生化指标,光镜、电镜下观察各组大鼠肾脏病理改变。结果模型组12 h尿蛋白定量造模后1周与空白组差异有显著性(P<0.01),第5周达到高峰;血总蛋白、白蛋白均低于空白组,甘油三酯、胆固醇、血尿素氮均高于空白组(均P<0.05),血肌酐差异无显著性(P=0.64)。肾脏病理改变:第5周为微小病变型,第10周为局灶性节段性肾小球硬化。结论单次尾静脉注射6.2 mg/kg阿霉素,可以成功建立渐进性的大鼠肾病综合征模型。
- 张勇张蓓宁华英郭云良邢广群沈卫
- 关键词：阿霉素肾病综合征蛋白尿
- IL-2对COPD患者CD8^+ T细胞频率及功能的影响被引量：10
- 2011年
- 目的探讨IL-2在慢性阻塞性肺疾病(COPD)中的免疫调节作用。方法采集45例COPD急性发作期患者、33例COPD缓解期患者以及25例健康人外周血,采用ELISA检测血清中IFN-γI、L-2浓度。提取PBMC后分别设置IL-2刺激组和未刺激组,多色流式分析技术检测CD8+T细胞频率,胞内细胞因子染色技术检测CD8+IFN-γ+T细胞的频率。结果 COPD患者急性发作期IL-2I、FN-γ浓度较临床缓解期和对照组显著增高(P均<0.01);与未刺激组相比I,L-2刺激组CD8+T细胞频率及分泌IFN-γ显著增加(P<0.05)。结论 IL-2可通过对CD8+T细胞的免疫调节效应参与COPD的发生发展过程。
- 徐晟伟沈若武张蓓
- 关键词：IL-2CD8+T细胞
- 鲫鱼汤对阿霉素肾病大鼠Th17细胞相关炎性因子表达的影响被引量：4
- 2013年
- 目的研究鲫鱼汤对阿霉素肾病大鼠IL-17、IL-23、IL-1β和CXCR2等表达的影响,探讨其治疗作用和机制。方法成年Wistar雄性大鼠40只,随机分为鲫鱼汤组、厄贝沙坦组、肾病组、空白对照组,除空白对照组,其他三组给予尾静脉注射6.2 mg/kg体重阿霉素建立肾病模型,空白组注射等容量生理盐水。模型成功后,给予鲫鱼汤灌胃干预9周,每周检测12 h尿蛋白定量,检测终末血生化指标变化,光镜下观察大鼠肾脏病理改变,免疫组化检测IL-17、IL-23、IL-1β和CXCR2在肾脏的表达,ELISA法检测IL-17、IL-23和IL-1β在血液中的含量。结果鲫鱼汤组大鼠血白蛋白水平高于肾病组(P=0.03)低于空白组(P=0.01);鲫鱼汤组大鼠肾组织IL-17、IL-23、CX-CR2较肾病组表达减少(P=0.01,P=0.01,P=0.02),较空白组表达增多(P=0.04,P=0.007,P=0.05)。结论 Th17细胞相关炎性因子增多是阿霉素肾病大鼠的发病机制之一,鲫鱼汤可通过升高血白蛋白,降低IL-17、IL-23、CXCR2表达而发挥肾脏保护作用。
- 张勇邢广群张蓓宁华英王金香郭云良沈卫
- 关键词：鲫鱼汤IL-23CXCR2肾病
- 调控Tim-3通路在免疫性肝损伤大鼠中对Th17细胞的影响被引量：1
- 2015年
- 目的建立免疫性肝损伤模型,探讨Tim-3通路在阻断或激活时对Th17细胞的影响。方法大鼠尾静脉注射刀豆蛋白A(Con A)8周,建立免疫性肝损伤模型。无菌取脾脏制备脾淋巴细胞,取外周血分离血清后于-20℃保存,取肝脏组织放入4%的多聚甲醛中固定备用。在96孔板上将脾淋巴细胞平均分成5组,即阻断实验组、阻断对照组、激活实验组、激活对照组和Con A对照组。用Tim-3的单克隆抗体即Anti-Tim-3来阻断Tim-3通路;用Tim-3的重组配体galectin-9来激活Tim-3通路,37℃、5%CO2培养箱中培养72 h,收集细胞上清液于-20℃保存。生化分析法测血清中ALT、AST和ALB的表达;HE染色观察肝脏组织的病理变化;免疫组化法测肝脏组织中IL-17A和ROR-γt蛋白的表达;ELISA法测细胞上清液中IL-17A及IL-6的表达;实时定量PCR测各组脾淋巴细胞ROR-γt mRNA的表达。结果与对照组相比,模型组HE染色可见明显的炎性细胞浸润、肝脏组织损伤及较多的假小叶,免疫组化可见IL-17A和ROR-γt蛋白的表达明显升高;与阻断对照组相比,阻断实验组中IL-17A和IL-6的水平升高(P<0.05);与激活对照组相比,激活实验组中IL-17A和IL-6的水平降低(P<0.05);实时定量PCR显示与阻断对照组相比,阻断实验组中ROR-γt mRNA的表达明显增加(P<0.05)。结论免疫性肝损伤的发病与Th17细胞密切相关,免疫调控Tim-3通路可通过影响Th17细胞效应,进而参与免疫性肝损伤的发病机制。
- 张文张蓓李秀梅沈若武丛蓓蓓杨丽华孙东君王建伟
- 关键词：免疫性肝损伤TH17细胞
- 刀豆蛋白A诱导Wistar大鼠肝纤维化模型的建立被引量：11
- 2013年
- 目的:建立Wistar大鼠肝纤维化模型。方法:50只Wistar大鼠随机分成两组。实验组(E组)30只,经尾静脉注射12.5 mg/kg剂量的刀豆蛋白A(ConA),每周1次,10只大鼠在第4次注射1周后处死,其余20只8周后处死。正常对照组(N组)20只,大鼠经尾静脉注射300μl的PBS,第8次注射1周后处死。取大鼠肝脏计算肝脏指数并进行肝纤维化评分,做HE和Masson Trichrome染色,显微镜下观察肝脏的病理变化。取血清测ALT、AST、TP及ALB。结果:与对照组相比,实验组连续注射ConA 8周的大鼠ALT、AST显著升高,TP变化不明显,ALB及白球比显著降低。肝脏体积增大,肝脏指数增高,病理分析示明显纤维化。结论:反复尾静脉注射ConA可成功诱导Wistar大鼠肝脏纤维化模型的建立。
- 梁洁张蓓刘佳宝张希东李园园王十锦王丽周文超耿霄
- 关键词：肝纤维化动物模型刀豆蛋白AWISTAR大鼠
- IL-21在慢性乙型肝炎中免疫调节作用的研究被引量：3
- 2010年
- 目的 探讨白细胞介素21（IL-21）在慢性乙型肝炎中的免疫调节作用.方法 采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测32例慢性乙型肝炎病人（病人组）和29例健康人（对照组）血清中IL-21水平.提取外周血单个核细胞后分别设为IL-21刺激组、IL-2刺激组和未刺激组,多色流式分析技术检测CD8＋T细胞频率,胞内细胞因子染色技术检测CD8＋IFN-γ＋T细胞的频率.结果 与对照组相比,病人组血清中IL-21浓度明显增高（t=2.75,P＜0.01）;与IL-2刺激组和未刺激组相比,IL-21刺激组CD8＋T细胞频率及分泌IFN-γ水平显著升高（F=59.27、10.27,q=3.82～14.11,P＜0.01）.结论 IL-21通过对CD8＋T细胞的免疫调节效应参与慢性乙型肝炎病人体内病毒的清除,为临床治疗提供了新的靶标.
- 马伟平何大馨钟丹丹张蓓
- 关键词：白细胞介素21乙型CD8+T细胞免疫调节
- 鲤鱼汤对多柔比星肾损害模型鼠肾纤维化的影响被引量：1
- 2013年
- 目的:观察鲤鱼汤对多柔比星肾损害大鼠的肾保护作用。方法:50只Wistar雄性大鼠随机分为正常组(A组)、模型组(B组)、鲤鱼高(C组)、低(D组)剂量组、厄贝沙坦组(E组)。尾静脉一次性注射多柔比星6.2mg/kg建模。造模后14d灌胃相应药物干预。HE、Masson染色观察肾脏病变,免疫组化检测肾组织成纤维细胞特异性蛋白-1(S100A4)、Smad7、转化生长因子β1(TGF-β1)及胶原蛋白Ⅰ(Col-Ⅰ)的表达。结果:与B组相比,C组大鼠12h尿蛋白浓度(12h-Upc)、尿素氮(BUN)、血清肌酐(SCr)、肾组织TGF-β1、S100A4、Col-Ⅰ、肾小球硬化指数(GSI)及间质损伤指数(TII)降低(P<0.05),血清总蛋白(TP)、白蛋白(Alb)、12h尿量(12h-Uv)及肾组织Smad7升高(P<0.05),除12h-Upc及12h-Uv外,上述指标C组D组E组间无差异。S100A4表达与Col-Ⅰ、GSI及间质胶原沉积呈正相关(P<0.01),与Smad7呈负相关(P<0.01)。结论:鲤鱼汤利尿消肿、拮抗纤维化保护肾脏;上调Smad7负反馈调节TGF-β1/Smad信号转导、抑制EMT及ECM可能是其作用机制之一。
- 宁华英刘剑英沈卫郭云良张蓓徐功立宁华秀张宇
- 关键词：鲤鱼汤肾纤维化SMAD信号通路
- COPD病人外周血CD4^+CD25^+调节性T细胞检测及意义被引量：5
- 2011年
- 目的检测慢性阻塞性肺疾病(COPD)病人外周血中CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)的频率及血清γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素4(IL-4)浓度,探讨Treg在COPD发病中的免疫调节作用。方法采用流式细胞仪检测45例COPD急性发作期病人、33例COPD临床缓解期病人以及25例健康人外周血中Treg亚群的频率,ELISA法检测血清中IFNγ-、IL-4浓度。结果 COPD病人急性发作期组IL-4浓度较临床缓解期组和健康对照组显著增高,临床缓解期组低于健康对照组,差异有统计学意义(F=192.86,q=11.63~27.66,P<0.01);COPD病人急性发作期组IFN-γ浓度高于临床缓解期组和健康对照组,差异有统计学意义(F=35.53,q=9.72、10.13,P<0.01),而临床缓解期组与健康对照组差异无统计学意义(q=1.13,P>0.05);临床缓解期组IFNγ-/IL-4比值最高,急性发作期组次之,健康对照组最低,差异有统计学意义(F=230.95,q=7.79~30.10,P<0.01);CD4+CD25+Treg频率在COPD急性发作期组高于临床缓解期组和健康对照组,而临床缓解期组低于健康对照组,差异有显著性(F=146.08,q=8.68~12.72,P<0.01)。结论 COPD病人存在Th1/Th2动态变化,急性发作期以Th2免疫为主,临床缓解期则以Th1免疫为主;Treg在COPD的发生发展中担负着重要的免疫调节作用。
- 徐晟伟沈若武张蓓
- 关键词：白细胞介素4
- 常山酮对大鼠肝纤维化的影响及其机制被引量：8
- 2013年
- 目的探讨常山酮对刀豆蛋白A(Con A)诱导的大鼠肝纤维化的影响及其机制。方法 50只Wistar大鼠随机分成对照组(8只)、模型组(14只)及常山酮低、高剂量(5、10 mg/kg)组(各14只),对照组大鼠每周尾iv磷酸盐缓冲液(PBS)300μL 1次;其余3组大鼠每周尾iv Con A12.5 mg/kg(溶于300μL PBS)1次,连续8周。自造模起在常山酮各组大鼠饲料中添加相应剂量的常山酮,连续给药8周后大鼠称质量,处死。生化分析法检测血清中肝功能指标丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)的水平;ELISA法检测血清肝纤维化指标转化生长因子-β1(TGF-β1)、透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PC-Ⅲ)的水平;肝组织行HE和Masson胶原染色,进行病理分析并按肝纤维化半定量计分系统(SSS)计分系统进行评分;天狼星红和免疫组化染色观察肝组织Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)的沉积及蛋白表达的变化。结果与模型组大鼠比较,常山酮组大鼠血清中ALT、AST、TP、TGF-β1、HA和PC-Ⅲ水平显著降低(P<0.05、0.01),肝脏病理损伤明显减轻(P<0.05、0.01),肝纤维化评分明显降低(P<0.05、0.01),肝组织中Col Ⅰ沉积及蛋白的表达显著下调(P<0.05、0.01)。结论常山酮能有效减轻ConA致肝纤维化大鼠的肝脏损伤,降低肝纤维化程度,其机制与抑制肝内Col Ⅰ的沉积和蛋白的表达有关。
- 梁洁张蓓刘佳宝沈若武张希东高美华李营耿霄周文超王丽王十锦
- 关键词：刀豆蛋白A肝纤维化COLTGF-Β1Α-SMA
- Tim-3及Th17细胞在免疫性肝损伤中的动态研究被引量：2
- 2014年
- 目的建立免疫性肝损伤模型,探讨Tim-3及Th17细胞在免疫性肝损伤发病过程中的动态变化及意义。方法 60只Wistar雄性大鼠随机分为急性组(10只)、中间组(10只)、慢性组(30只)和对照组(10只)。用刀豆蛋白A建模,在第0、2、4、6、8周时对慢性组大鼠实施体外心间取血1.5 ml,分离血清后于-20℃备用。8周建模成功后取完整肝脏并计算肝脏指数;生化分析法测血清中ALT、AST、TP及ALB的动态变化;ELISA法测血清中细胞因子Tim-3、IL-17、IL-6及IL-23的动态表达;HE染色观察肝脏的病理变化;免疫组化法检测肝脏中Tim-3和IL-17蛋白的表达。结果与对照组相比,急性组、中间组及慢性组的ALT及AST均显著升高(P<0.05),ALB显著下降(P<0.05)。中间组HE染色偶见假小叶,而慢性组发现有明显的炎性细胞和肝脏损伤,镜下假小叶较多见。在慢性组的不同阶段中,IL-17的动态表达是先升高,4周后开始降低(P<0.05);Tim-3的动态表达则是先降低,4周以后开始升高(P<0.05)。结论 Tim-3及Th17细胞参与了免疫性肝损伤的发病机制,其表达水平的变化可以在一定程度上反应病情的严重程度。
- 张文张蓓沈若武高美华李秀梅丛蓓蓓王丽娜李晨雨
- 关键词：刀豆蛋白A免疫性肝损伤IL-17TIM-3
