国家自然科学基金(30700270) 作品数:10 被引量:25 H指数:3 相关作者: 宋波 方强 张永革 贾卓敏 封建立 更多>> 相关机构: 第三军医大学西南医院 第三军医大学 第三军医大学第一附属医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 重庆市自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
Glevic抑制ICCs功能对ATP诱导大鼠盆神经放电的影响 被引量:1 2012年 目的探讨Glevic抑制ICCS功能对ATP诱导大鼠盆神经传入电活动的影响。方法 20只SD大鼠随机分为ATP组和Glevic组。ATP组通过膀胱内灌注ATP诱发盆神经放电评估ATP介导的膀胱感觉功能,Glevic组则通过Glevic预处理抑制膀胱ICCs功能后,重复ATP组实验。结果两组大鼠给药前膀胱灌注生理盐水均可诱发盆神经进行性增强的簇状放电。膀胱内灌注20 mmol/L ATP可诱发大鼠盆神经放电,频率为(27.36±2.53)次/分,并伴有较微弱的逼尿肌收缩。100μmol/L Glevic抑制ICCs功能后,ATP诱发的盆神经放电频率为(2.46±0.38)次/分,与ATP组相比差异非常显著(P<0.01)。结论 Glevic对ATP诱发的大鼠盆神经放电的抑制作用表明ICCs可能在ATP介导的膀胱感觉形成中发挥了重要作用。 方强 杨景 潘进洪 李为兵 封建立 宋波关键词:CAJAL间质细胞 膀胱 大鼠膀胱ICC样细胞与逼尿肌神经调控关系的形态学研究 被引量:3 2008年 目的从形态学上探讨膀胱ICC样细胞在逼尿肌神经调控中的作用。方法采用透射电镜观察大鼠膀胱内ICC样细胞、神经和逼尿肌细胞之间的超微结构关系。通过c—kit免疫荧光染色对大鼠膀胱ICC样细胞进行鉴定,并通过c-kit与PGP9.5免疫荧光双标观察ICC样细胞与神经的结构关系。结果透射电镜显示,ICC样细胞与逼尿肌细胞紧密相邻处可见典型缝隙连接。在局部区域可见ICe样细胞的突起与神经末梢联系紧密。c-kit免疫荧光染色显示,大鼠膀胱内ICC样细胞主要位于黏膜下层、肌束边缘以及肌细胞间。c-kit与PGP9.5免疫荧光双标显示ICC样细胞与神经末梢在结构上关系紧密。结论从形态学上看,膀胱内ICC样细胞具备参与逼尿肌神经调控的结构基础,进一步从功能学上予以证实将有助于全面阐明逼尿肌神经调控理论。 方强 杨景 潘进洪 李为兵 沈文浩 李龙坤 王永权 封建立 丁砺蠡 宋波关键词:膀胱 逼尿肌细胞 神经调控 胆碱能受体在大鼠膀胱ICC样细胞的表达 被引量:3 2009年 目的探讨胆碱能受体(muscarinic acetylcholine receptors,M受体)各亚型在大鼠膀胱ICC样细胞(interstitial cells of Cajal,ICC)的表达及意义。方法制备SD大鼠膀胱组织铺片,通过免疫荧法检测大鼠膀胱组织内ICC样细胞分布情况,并进一步采用免疫荧光双标法(c-kit抗体及M受体亚型抗体)检测膀胱ICC样细胞上M受体亚型的表达。结果在大鼠膀胱肌层及肌间发现膀胱ICC样细胞呈散在或者彼此连接的分布,M受体的5种亚型中,ICC样细胞上不表达M1、M4、M5受体亚型,表达M2和M3两种受体亚型。结论胆碱能神经可能通过激活膀胱ICC样细胞上胆碱能受体来调节膀胱功能。 贾卓敏 张永革 方强 王永权 卢根生 宋波关键词:膀胱 胆碱能受体 膀胱Cajal间质细胞对膀胱逼尿肌细胞兴奋调控的结构和功能特征的初步研究 被引量:7 2008年 目的探讨膀胱Cajal细胞(ICC细胞)在逼尿肌细胞兴奋调控中所起的作用。方法①透射电镜观察ICC细胞和逼尿肌细胞之间的超微结构联系;②以荧光光漂白恢复(FRAP)对相邻的ICC细胞和逼尿肌细胞进行检测,观察ICC细胞和相邻逼尿肌细胞之间的荧光强度的变化。结果①超微结构可见ICC细胞和逼尿肌细胞之间有缝隙连接;②对与单个ICC细胞相邻的逼尿肌细胞进行荧光漂白后,可发现逼尿肌细胞内的荧光强度有显著恢复(P<0.01),同时ICC细胞的荧光强度逐渐减弱,说明ICC细胞与逼尿肌细胞间有信号通讯的通路。结论①ICC细胞与逼尿肌细胞之间存在结构上联系;②ICC细胞可以将兴奋信号传递给周围的逼尿肌细胞。 丁砺蠡 方强 封建立 宋波关键词:膀胱逼尿肌 豚鼠膀胱组织ICCs细胞间隙连接蛋白Connexin43表达意义 被引量:5 2008年 目的探讨体外培养豚鼠膀胱组织ICCs细胞(interstitial cells of Cajal,ICCs)间隙连接蛋白Connexin43的表达。方法胶原酶消化法进行豚鼠膀胱组织ICCs细胞的原代培养,对照为原代培养膀胱平滑肌细胞,免疫荧光法进行两种细胞的特征性蛋白c-kit及平滑肌肌动蛋白(smooth muscle actin,SMA)染色观察,免疫荧光法及Western blot法进行培养细胞Connexin43的检测。结果豚鼠膀胱ICCs细胞特征性蛋白c-kit染色阳性,SMA染色阴性。豚鼠膀胱ICCs细胞间隙连接蛋白Connexin43表达水平较高,显著高于膀胱平滑肌细胞。结论豚鼠离体膀胱ICCs细胞间隙连接蛋白Connexin43高表达可能是其信号传递的重要物质基础。 鄢俊安 卢根生 李龙坤 宋波关键词:CAJAL 间质细胞 间隙连接蛋白 膀胱 P2X嘌呤受体在大鼠膀胱ICCs细胞中的表达 被引量:9 2008年 目的探讨P2X嘌呤受体各亚型在大鼠膀胱ICCs细胞(interstitial cells of Cajal,ICCs)的表达及意义。方法制备SD大鼠膀胱组织铺片及冰冻切片,通过免疫荧光法检测大鼠膀胱组织内ICCs细胞分布情况,并进一步采用免疫荧光双标法检测ICCs细胞上P2X嘌呤受体各亚型的表达。结果SD大鼠膀胱中的ICCs细胞主要集中于黏膜下层、肌束边缘以及肌束间,并相互连接呈网络状分布。在7种P2X嘌呤受体亚型中,ICCs细胞上可检测到P2X2和P2X5两种亚型表达。结论大鼠膀胱ICCs细胞可表达P2X2和P2X5两种嘌呤受体亚型,从功能学上证实嘌呤能信号对ICCs细胞功能有影响。 方强 杨景 潘进洪 封建立 李为兵 王永权 丁励蠡 宋波关键词:ICCS细胞 嘌呤受体 膀胱 孕18周胎儿膀胱ICC样细胞的分布 2009年 目的:探讨孕18周胎儿膀胱是否有ICC样细胞的分布,为人膀胱ICC样细胞发育研究提供依据。方法:制备孕18周胎儿膀胱组织冰冻切片,通过c-kit多克隆抗体和平滑肌肌动蛋白单克隆抗体免疫荧光双标,激光共聚焦显微镜观察检测胎儿膀胱组织内ICC样细胞分布情况。结果:孕18周胎儿膀胱组织发现具有纺锤形的细胞体、椭圆形细胞核和突触等典型特征的ICC样细胞分布,位于平滑肌肌束边缘和肌束间,散在分布,未连接成网络。结论:首次报道人膀胱ICC样细胞在孕18周胎儿时已经发育。 贾卓敏 张永革 方强 宋波关键词:胎儿 膀胱 大鼠膀胱Cajal间质细胞的分离、培养和鉴定 被引量:1 2009年 目的:探索大鼠膀胱Cajal间质细胞(ICC)的分离和培养方法,为进一步研究其在膀胱中的作用提供条件。方法:取大鼠的膀胱组织,采用Ⅱ型胶原酶酶解法分离细胞,将细胞悬液接种于含50ng/mlSCF、15%(v/v)FBS的DMEM培养基中,进行培养。用c-kit特异性杭体标记细胞,免疫荧光鉴定ICC细胞。结果:培养8小时后的ICC贴壁良好,并保持其固有特征:两个长的突起,多个短的侧突,胞体小,核大,c-kit抗体荧光染色阳性。结论:酶解法分离大鼠膀胱ICC并培养成功。 张永革 贾卓敏 方强 宋波关键词:膀胱 CAJAL间质细胞 逼尿肌反射亢进大鼠膀胱ICC细胞数量的变化及意义 被引量:1 2009年 目的:观察脊髓损伤后大鼠逼尿肌反射亢进膀胱Cajal间质细胞(ICC)数量的变化,探讨膀胱逼尿肌功能改变和ICC的可能关系。方法:制作大鼠骶髓上损伤模型,膀胱压力测定证实膀胱出现逼尿肌反射亢进后,取膀胱组织行c-kit免疫组织化学染色,用激光共聚焦显微镜观察ICC数量的变化。结果:逼尿肌反射亢进大鼠模型制作成功,膀胱ICC数量较正常组和膀胱造瘘组明显增加。结论:脊髓损伤后大鼠膀胱逼尿肌反射亢进可能由ICC数量变化所引起。 张永革 贾卓敏 方强 宋波关键词:脊髓损伤 逼尿肌反射亢进 CAJAL间质细胞 胆碱能激动剂卡巴可对大鼠膀胱ICC样细胞内钙流的影响 2009年 目的:探讨胆碱能激动剂卡巴可对大鼠膀胱ICC样细胞钙流的影响。方法:胶原酶消化大鼠膀胱,体外培养膀胱ICC样细胞,激光共聚焦技术检测Fluo-3AM负载的ICC样细胞在卡巴可刺激下Ca^(2+)信号的变化。结果:在大鼠膀胱组织铺片及体外培养细胞中观察到c-kit染色阳性及长梭形有突起的细胞鉴定为膀胱ICC样细胞;细胞给予Fluo-3AM钙负载,激光共聚焦检测,ICC细胞可观察到周期性的"钙波";ICC样细胞受到不同浓度卡巴可刺激后,ICC样细胞自发性钙波增强。结论:ICC样细胞受刺激后自发性钙波增强,提示卡巴可可能通过ICC样细胞上的胆碱能受体兴奋ICC样细胞。 贾卓敏 张永革 方强 郑霁 陈可 卢根生 宋波关键词:兴奋性 钙波