福建省卫生厅医学创新课题(2012-CX-32)
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- siRNA沉默人类急性髓细胞白血病HL-60细胞HDAC1基因表达的实验研究
- 2013年
- 目的探讨siRNA沉默人类急性髓细胞白血病HL-60细胞HDAC1基因表达后对细胞增殖、凋亡以及组蛋白甲基化、乙酰化修饰的影响。方法 LipofectamineTM2000为载体将HDAC1特异性siRNA转染入HL-60细胞后,RT-PCR检测HL-60细胞HDAC1mRNA表达,MTS法绘制细胞生长曲线,流式细胞术分析细胞凋亡,Western Blot检测HDAC1的表达及其对凋亡相关蛋白及组蛋白甲基化、乙酰化表达的影响。结果 HDAC1siRNA转染HL-60细胞后可沉默该基因表达;抑制HL-60细胞增殖,呈量效和时效关系;诱导HL-60细胞凋亡,经0,30,60,120nmol/L HDAC1siRNA处理24h后,细胞凋亡率分别为(1.43±0.19)%,(14.4±3.1)%,(57.7±4.2)%,(68.7±1.6)%;与空白对照组(1.43±0.19)%比较,差别具有统计学意义(P<0.05);且HDAC1基因沉默后,可下调Bcl-2,Procaspase-9,Procaspase-3,c-Myc的表达;上调组蛋白H3,H3K9,H3K14,H3K27乙酰化水平,下调H3K9甲基化水平,对H4乙酰化无明显影响。结论沉默HDAC1基因表达后可能通过上调与基因转录激活有关的组蛋白H3,H3K14,H3K9,H3K27乙酰化水平,下调与基因转录抑制有关H3K9甲基化水平,从而抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡。
- 马旭东卢善良
- 关键词：小分子干扰基因基因表达HL-60细胞组蛋白类
