中国博士后科学基金(2004035528)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
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- NHE-1反义基因对人耐药小细胞肺癌细胞增殖及凋亡的影响
- 2007年
- 目的探讨NHE-1反义基因表达存肿瘤细胞内pH(pHi)调节及凋亡调控中的作用。方法以NHE-基因的反义基因转染人耐药小细胞肺癌H446/CDDP细胞,采用荧光标记法研究反义基因对肺癌细胞的酸化效应,使用细胞计数的方法进行细胞生长检测,采用免疫组织化学方法研究细胞凋亡基因Caspase3的表达,使片流式细胞仪双染法研究NHE-1反义基因对细胞凋亡的影响,采用透射电镜的方法检测NHE-1反义基因转染的肺癌细胞是否存在细胞凋亡。结果细胞酸化效应显示,NHE-1反义基闪转染的人耐药小细胞肺癌H446/CDDP细胞可使pHi下降至6.86±0.01,与空载体转染的人耐药小细胞肺癌细胞H446/CDDP(7.25±0.02)相比明显降低(P<0.01)。反义基因转染的人耐药小细胞肺癌H446/CDDP细胞在48 h后生长明显受到抑制。免疫组织化学方法显示转染NHE-1反义基因的人耐药小细胞肺癌H446/CDDP细胞凋亡基冈Caspase3有表达,而空载体转染的人耐药小细胞肺癌细胞H446/CDDP Caspase3没有表达。流式细胞仪双染法研究显示NH-1反义基因转染组比空载体组的人耐药小细胞肺癌H446/CDDP细胞凋亡率明显增加(P<0.01)。透射电镜发现NHE-1反义基因转染的人耐药小细胞肺癌H446/CDDP细胞存在细胞凋亡,细胞脱落大量小块胞质,细胞体积明显缩小。结论细胞酸化能使人耐药小细胞肺癌H446/CDDP细胞生长受到抑制,凋亡基因表达增强,产生细胞凋亡。人耐药小细胞肺癌H446/CDDP细胞NHE-1基因表达能通过阻止其胞内酸化,对维持其抗凋亡生长性质具有重要作用。
- 李树钧钱桂生王关嵩黄桂君吴国明冯起甲戢福云
- 关键词：细胞内肺癌NHE-1
- 一种肺癌新耐药基因的反义基因抑制Bcl-2基因在人耐药小细胞肺癌细胞表达的研究被引量：2
- 2008年
- 目的通过构建一种肺癌新耐药相关基因的反义基因,抑制该基因在人耐药小细胞肺癌H466/CDDP细胞中的表达,进一步研究新耐药相关基因的功能和调控。方法构建该新耐药相关基因的反义基因逆转录病毒载体,通过RT-PCR检验转染新耐药相关基因的反义基因或空载体的人耐药小细胞肺癌H466/CDDP细胞中该基因mRNA的表达,使用MTT方法检测人耐药小细胞肺癌H466/CDDP细胞对化疗药物的敏感性。采用免疫组织化学方法研究人耐药小细胞肺癌抗凋亡基因Bcl-2的表达。结果成功构建新耐药相关基因的反义基因逆转录病毒载体。药物敏感性检测显示,与空载体组相比,转染新耐药相关基因反义基因的耐药小细胞肺癌细胞H446/CDDP对部分化疗药物的敏感性增强,差异显著(P<0.01)。免疫组织化学方法显示转染新耐药相关基因反义基因的耐药小细胞肺癌细胞H446/CDDP抗凋亡基因Bcl-2的表达,与空载体组相比明显减弱(P<0.01)。结论新耐药相关基因是与CDDP致人耐药小细胞肺癌H466/CDDP细胞耐药密切相关的一条新基因。该新耐药相关基因的反义基因能够抑制抗凋亡基因Bcl-2的表达,可能在肺癌MDR发生中的起着重要作用。
- 李树钧钱桂生王关嵩戢福云周向东张芳冯起甲
- 关键词：肺癌BCL-2基因
