广东省自然科学基金(9151064201000063)
- 作品数:8 被引量:69H指数:5
- 相关作者:雷建军陈清华曹必好陈国菊肖熙鸥更多>>
- 相关机构:华南农业大学广东海洋大学广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室更多>>
- 发文基金:广东省自然科学基金国家自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 青枯病病菌对茄子相关防卫信号基因表达及活性氧含量的影响被引量:5
- 2012年
- 本文以茄子抗青枯病自交系和感病自交系为试材,在接种青枯病菌后,对调控抗性反应的不同信号传导基因进行表达特性分析。结果表明,在9个基因中,EDS1、PAD4、NPR1、SGT1和WRYK70等5个基因的表达均随着接种诱导时间延长而增加,而且在抗病自交系‘E-31’中的表达量要高于感病自交系‘E-32’;而JAR1、NDR1、EIN2和RAR1等基因的表达随着接种诱导时间的增加,表达水平变化不大。初步推断EDS1、PAD4、NPR1、SGT1和WRYK70可能与调节茄子抗青枯病抗性反应有关。同时茄子在接种后活性氧的含量均增加,但是感病植株的含量高于抗病植株。
- 肖熙鸥李冠男曹必好雷建军陈清华陈国菊
- 关键词:茄子活性氧
- 溶藻弧菌鞭毛蛋白flaC基因DNA疫苗对红笛鲷的免疫保护被引量:5
- 2013年
- 为研究溶藻弧菌鞭毛蛋白flaC基因DNA疫苗对红笛鲷的免疫保护作用,实验构建了重组真核表达质粒pcDNA-flaC并将该质粒肌肉注射红笛鲷,采用PCR、RT-PCR、ELISA和攻毒试验等方法检测了该真核表达质粒在红笛鲷组织内的分布、表达和对红笛鲷的免疫保护。PCR结果显示,免疫接种7和28 d,注射点周围肌肉、鳃、肾脏、肝脏和脾脏都存在质粒分布;RT-PCR结果显示,免疫接种后第7天、14天和28天,红笛鲷不同组织内均有目的基因表达。ELISA结果表明,鱼血清内产生了抗FlaC蛋白的抗体,表明DNA疫苗免疫后鱼体表达了目的蛋白,并诱导产生了相应抗体。攻毒实验表明,免疫后的红笛鲷能较好地抵抗致病性溶藻弧菌的感染。结果表明,质粒pcDNA-flaC可能是抵抗溶藻弧菌感染的有效的疫苗候选物。
- 梁海鹰陈永新简纪常吴灶和
- 关键词:红笛鲷溶藻弧菌DNA疫苗免疫保护率
- 茄子抗病育种研究进展被引量:27
- 2010年
- 综述了近年来国内外茄子在抗青枯病、黄萎病和枯萎病等主要病害育种方面的研究进展,并分析了目前茄子抗病育种中存在的问题和今后的研究方向。
- 魏小伞曹必好雷建军陈国菊陈清华
- 关键词:茄子青枯病黄萎病枯萎病育种
- 溶藻弧菌HY9901鞭毛蛋白flaB基因的克隆及原核表达被引量:9
- 2010年
- 参照GenBank上登录的弧菌鞭毛蛋白flaB基因序列设计引物,PCR扩增溶藻弧菌HY9901株的flaB全长基因,序列分析结果显示该基因为1134bp,编码377个氨基酸。与GenBank中其它弧菌的同源基因序列比对显示,溶藻弧菌flaB基因与副溶血弧菌flaB基因的同源性最高(92%)。将该基因定向克隆到原核表达载体pET-32a(+)中,在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达出带His-tag的融合蛋白,分子量大小与预期一致。优化的表达条件为28℃,0.4mmol/LIPTG浓度诱导10h。用纯化后的融合蛋白免疫SPF级小鼠,制备了多克隆抗体。Western-blotting结果表明鼠抗FlaB血清不仅能与诱导后的重组蛋白发生反应,而且能与天然的溶藻弧菌全菌蛋白发生反应,提示鞭毛蛋白FlaB可能是溶藻弧菌的重要保护性抗原之一,为下一步进行FlaB蛋白免疫原性的研究以及疫苗的制备奠定了基础。
- 梁海鹰夏立群吴灶和简纪常鲁义善
- 关键词:溶藻弧菌鞭毛蛋白原核表达
- 茄子抗病导入系的抗青枯病性及GISH鉴定被引量:4
- 2010年
- 利用栽培茄与野生茄(Solanumtorvum)的种间杂种为供体,以两个栽培茄的自交系为轮回亲本进行多代回交,得到2个导入系"BILR-1","BILR-2"。经过抗青枯病及GISH鉴定,表明所得两个导入系对青枯病有很强的抗性,且它们含有野生茄(Solanumtorvum)的遗传物质,成功把野生茄(Solanumtorvum)的抗青枯病性状转到栽培茄子中。所得抗病导入系的染色体数量为24条,它们可以作为一种新的抗源未来在茄子抗病育种中加以应用。
- 曹必好雷建军陈国菊陈清华肖熙鸥
- 关键词:导入系抗青枯病GISH
- 溶藻弧菌HY9901鞭毛蛋白flaC基因的克隆和序列分析及真核表达质粒的构建被引量:1
- 2010年
- 参照GenBank上登录的副溶血弧菌鞭毛蛋白flaC基因序列设计引物,PCR扩增溶藻弧菌HY9901株的flaC全长基因,序列分析结果显示该基因为1 155 bp,编码384个氨基酸.与GenBank中其他弧菌的同源基因序列比对显示,溶藻弧菌flaC基因与副溶血弧菌flaC基因的同源性最高(87%).将该基因定向克隆到真核表达质粒pcDNA3.1(+)中,获得带溶藻弧菌鞭毛蛋白flaC基因的真核表达重组质粒pcDNA-flaC,为其DNA疫苗的进一步研究奠定了基础.
- 梁海鹰夏立群吴灶和简纪常
- 关键词:溶藻弧菌基因克隆
- 茄子抗青枯病相关基因的分离和功能鉴定研究
- 茄子(Solanum melongena L.)是中国栽培的主要蔬菜之一,但是茄子青枯病(Ralstoniasolanacearum)的发生一般会使其减产20%~30%,严重时达50%~60%。解决这一问题的主要对策就是...
- 曹必好肖熙鸥李冠男雷建军陈清华程玉瑾
- 关键词:茄子
- 茄子青枯病诱导的cDNA文库构建与鉴定被引量:3
- 2014年
- 以茄子抗青枯病自交系E-31为材料,在4叶期接种青枯病菌,48 h后采集叶片提取RNA,利用Gateway技术构建茄子uncut型cDNA文库。经检测,本研究获得的茄子叶片cDNA文库滴度达到0.01亿CFU/mL,总库容量为0.15亿CFU,平均插入片段长度在1.2 kb以上,重组率为100%。说明构建的文库能达到所需要的标准,可用于分离茄子的功能基因。
- 蒋晶肖熙鸥曹必好雷建军陈清华
- 关键词:GATEWAY技术茄子青枯病
- 茄子种质资源的ISSR遗传多样性分析被引量:17
- 2012年
- 利用ISSR分子标记分析茄子种质多样性,从100条引物中筛选出20条能够扩增出多态性条带稳定清晰的ISSR引物,对48份茄子材料的DNA进行扩增,共获得了186条谱带,其中多态性带153条(占所有谱带的82.2%).利用UPGMA法建立了48份茄子及其近缘野生种间的遗传关系聚类图.聚类结果表明,48份供试种质间的遗传相似系数分布在0.52~0.98之间,可将其分为5大类群.其中又将44份栽培品种分为5组,其品种间相似遗传系数在0.84~0.98之间,表明栽培品种的遗传背景比较窄.聚类结果与茄子的果形以及地理来源有一定的相关性,而与果色呈现不完全相关.
- 肖熙鸥王勇李冠男曹必好雷建军陈国菊陈清华
- 关键词:茄子ISSR