国家自然科学基金(30271153)
- 作品数：6 被引量：84H指数：3
- 相关作者：周令望邹宁于维汉邹向晖杨克敌更多>>
- 相关机构：哈尔滨医科大学华中科技大学黑龙江省医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金黑龙江省自然科学基金黑龙江省教育厅资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 大鼠急性心肌损伤与CT-1mRNA相关性的实验观察被引量：4
- 2006年
- 目的研究心肌营养素1(cardiotrophin-1,CT-1)在异丙基肾上腺素(isoprenaline,Iso)致大鼠急性心肌损伤中的保护作用。方法将Wistar雄性大白鼠随机分为3组:对照组、Iso组和Iso+PD98059组,光镜观察心肌组织的病理变化,生化方法检测心肌酶,用RT-PCR方法检测心肌组织CT-1mRNA的表达。结果光镜下Iso+PD98059组心肌病理损伤程度较Iso组重,且CT-1mRNA表达水平及心肌酶活性明显升高(P<0.05)。结论CT-1具有心肌保护作用,可能与减轻心肌细胞坏死的程度有关。
- 顾明白冰张旭周令望刘阳邹宁王铜于维汉
- 关键词：心肌营养素1异丙基肾上腺素心肌
- 人硫氧还蛋白基因表达对病毒性心肌炎小鼠心肌炎症反应的影响及其机制被引量：6
- 2018年
- 目的探讨携带人硫氧还蛋白（hTRX）的重组腺病毒对柯萨奇B3（CVB3）病毒性心肌炎小鼠心肌炎症反应的影响及其机制。方法雄性Balb/c小鼠60只，4周龄，体重l2-14 g，分为3组，即对照组、心肌炎组和hTRX组，每组20只。hTRX组及心肌炎组小鼠腹腔注射100 TCID50的CVB3病毒0.1 ml，对照组同时给予等量的生理盐水。接种病毒前2 d，hTRX组小鼠心包腔穿刺注射滴度为2.5×108 pfu/ml的TRX重组腺病毒30 μl，心肌炎组小鼠心包腔穿刺注射滴度为2.5×108 pfu/ml的空载体重组腺病毒30 μl。于接种病毒的第7天将小鼠处死取心脏。心脏病理切片苏木素伊红染色观察各组心肌病理改变，电镜观察心肌超微结构改变，Western blot法检测心肌组织核因子κB（NF-κB）蛋白含量，ELISA法检测心肌组织肿瘤坏死因子α（TNF-α）和白细胞介素1β（IL-1β）蛋白含量。结果（1）各组小鼠心肌组织光镜观察结果：心肌炎组小鼠心肌炎病变检出14只，hTRX组检出5只，对照组未检出。光镜下观察可见，对照组小鼠心肌组织未见炎性细胞浸润及坏死灶，细胞排列整齐，呈圆柱状，细胞质丰富红染，胞核卵圆，位于细胞中央；心肌炎组小鼠可见局灶性心肌坏死和炎性细胞浸润；hTRX组小鼠可见点状心肌坏死和炎性细胞浸润。（2）各组小鼠心肌组织透射电镜观察结果：心肌炎组小鼠心肌细胞肿胀、大量肌丝溶解、线粒体肿胀空化。而与心肌炎组相比，hTRX组小鼠心肌细胞肿胀较轻、肌丝溶解较少、线粒体肿胀空化较少。（3）各组小鼠心肌细胞核中NF-κB的蛋白含量：心肌炎组小鼠心肌组织细胞核NF-κB蛋白含量高于对照组（F=6.237，P〈0.01）, hTRX组则低于心肌炎组（F=6.009，P〈0.01）。（4）各组小鼠心肌组织中TNF-α和IL-1β的蛋白含量：心肌炎组小鼠心肌组织TNF-α和IL-1β蛋白含量均高于对照组（F值分别为8.670和8
- 郭玉博周令望陈福来邹宁
- 关键词：心肌炎炎症
- 人的睾丸组织硫氧还蛋白cDNA的克隆及序列测定被引量：2
- 2003年
- 目的 克隆人硫氧还蛋白 (humanthioredoxin ,hTRX)cDNA序列并进行序列测定。方法 ①应用RT PCR技术以成人睾丸组织RNA为模板 ,扩增出hTRX成熟蛋白的cDNA基因。②应用PCR技术以人的睾丸组织cDNA文库为模板 ,扩增出hTRX成熟蛋白的cDNA基因。二者分别克隆至pGEM○R TEasy载体中进行基因序列测定。结果 将所得序列与EMBLDataLibraryX5453 9提供的序列比较 ,其可译框架相同。将所得序列与GenBank(J0 40 2 6)提供的序列比较 ,酶活性位点 (Trp Cys Pro Cys)与其相同 ,第 117、2 2 2位碱基与其不同 ,编码的氨基酸也发生了变化。结论 从睾丸组织或基因文库中克隆均获得编码hTRX成熟蛋白的cDNA基因 。
- 邹宁周丽华周令望樊红滕宗艳于维汉
- 关键词：睾丸组织硫氧还蛋白CDNA克隆
- 人硫氧还蛋白真核载体的构建及表达被引量：1
- 2005年
- 目的构建人硫氧还蛋白基因的重组真核表达载体。方法人硫氧还蛋白的cDNA克隆至pGEM-TEasy载体,经DNA测序证明后,将其克隆至真核表达载体pShttle构建重组pShttle-hTRX,pShttle-hTRX转染Hela细胞系进行瞬时表达,通过Westernblot、免疫组化、活性测定、酶切、PCR扩增等方法证实构建载体的正确性。结果构建携带人硫氧还蛋白基因的真核表达载体pShttle-hTRX,转染HeLa细胞后可检测到hTRX的转录和表达。结论正确构建了携带人硫氧还蛋白基因的真核表达载体,本结果可用于探讨硫氧还蛋白的生物学作用。
- 邹向晖邹宁周令望于维汉
- 关键词：真核表达载体人硫氧还蛋白HELA细胞真核载体HELA细胞系转录
- 氧化应激与细胞凋亡关系的研究进展被引量：70
- 2003年
- 大量研究表明 ,氧化应激可导致细胞凋亡。目前对这一现象有四种解释 :ROS活化核转录因子KB并诱导核转录因子 -KB表达 ,导致细胞凋亡 ;线粒体介导的细胞凋亡 ;ROS导致DNA损伤 ,激活P5 3诱导细胞凋亡及ROS激活SAPK通路介导细胞凋亡。但从总体上看 ,其分子机制还不十分清楚 。
- 褚启龙杨克敌王爱国
- 关键词：氧化应激细胞凋亡核转录因子线粒体DNA损伤P53基因
- 介导入硫氧还蛋白基因转移的重组腺病毒构建被引量：2
- 2007年
- 目的 应用基因重组方法构建携带人硫氧还蛋白（hTRX）基因的复制缺陷型重组腺病毒。方法 用内切酶、RT-PCR、测序方法获得目的基因片段，然后将其cDNA克隆至表达载体pShuttle构建hTRX的重组真核细胞表达载体pShuttle—hTRX，在HeLa细胞中进行瞬时表达检测。从真核表达载体pShuttle—hTRX切下目的基因，并插入至腺病毒载体构建hTRX的重组腺病毒载体Adeno—hTRX，经PCR方法亦证明了成功构建腺病毒重组体。重组腺病毒在293细胞中扩增、纯化。结果 成功构建了携带人硫氧还蛋白基因的复制缺陷型重组腺病毒，并以多种方法证实了构建载体的正确性。结论 正确构建的人硫氧还蛋白重组腺病毒载体，可为基因治疗心血管系统疾病打下良好基础。
- 邹向晖邹宁周令望于维汉
- 关键词：基因疗法DNA硫氧还蛋白
