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黑龙江省自然科学基金(C200922)
作品数:
1
被引量:1
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相关作者:
刘玉芬
陈辉
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相关领域:
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2012
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中介蝮蛇毒纤溶酶基因真核表达载体的构建及其功能的研究
被引量:1
2012年
目的:蛇毒纤维蛋白溶解酶能直接溶解纤维蛋白或纤维蛋白原,在心脑血管疾病的治疗方面具有潜在的应用价值。方法:采用双酶切技术从pMD18T-FLE I克隆载体上获得中介蝮蛇毒纤溶酶基因编码区,再将其亚克隆到真核表达载体pFASTBACHTa上,经转化、筛选和鉴定,获得重组真核表达质粒pFASTBACHTa-FLE。重组质粒经小鼠尾静脉快速注入小鼠体内,进行瞬时表达。结果:经SDS-PAGE和Western blot检测,表明在小鼠肝脏组织中有重组FLE蛋白表达。免疫组织化学检测证明该蛋白在小鼠肝脏组织中大量表达。纤维蛋白平板法鉴定该重组蛋白具有较高的纤溶活性,其活性呈现出剂量相关性和时间依赖性。因此为进一步对中介蝮蛇毒纤溶酶的应用奠定了坚实的基础。
刘玉芬
冬黎黎
孙玉刚
刘鹏
陈辉
赵文阁
关键词:
纤溶酶
真核表达
纤溶活性
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