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肿瘤微环境中过表达的IL-6对大鼠间充质干细胞恶性转化的影响被引量：10: 2012年; 目的分析肿瘤微环境中异常高表达的白介素6(IL-6)是否可导致间充质干细胞(MSCs)的恶性转化。方法 ELISA法检测肿瘤微环境与正常微环境中IL-6的表达差异。以肿瘤微环境中相应水平IL-6处理的MSCs为实验组,正常微环境中相应水平IL-6处理的MSCs作为正常对照组。采用免疫荧光法检测各组STAT3蛋白表达情况;通过细胞生长曲线观察各组MSCs增殖能力的变化;采用免疫荧光定量PCR和Western blotting检测p53和MDM2的蛋白及mRNA表达变化;通过裸鼠成瘤实验检测各组MSCs的体内成瘤能力。结果肿瘤微环境中IL-6的表达量为191.23±16.80pg/ml,明显高于正常微环境(0.82±0.12g/ml,P<0.01)。实验组90%±7%的MSCs表达STAT3蛋白,主要集中于细胞核,为激活状态,而对照组未检测到STAT3表达。细胞生长曲线显示,2个月后实验组MSCs生长接触抑制减弱。细胞培养2个月后,与对照组比较,实验组p53蛋白及mRNA表达明显降低(P<0.01),MDM2蛋白及mRNA表达明显升高(P<0.05)。实验组MSCs培养2个月后,接种裸鼠皮下可形成肿瘤,而对照组接种后未见肿瘤形成。结论肿瘤微环境中过表达的IL-6具有促进MSCs恶性转化的作用。; 刘建平朱静田杰刘官信鲁荣林建萍; 关键词：间质干细胞白细胞介素6 肿瘤微环境

C6胶质瘤微环境中SIL-6R/GP130与MSCs瘤向转化的相关性被引量：2: 2013年; 目的通过骨髓间充质干细胞(MSCs)与C6胶质瘤细胞间接共培养,探讨在C6胶质瘤微环境中SIL-6R及GP130的过度激活和表达对MSCs向肿瘤方向转化的影响。方法用Transwell插入式培养皿结合6孔板构建间接共培养体系来模拟MSCs生长的微环境,用RT-QPCR检测细胞中GP130、STAT-3、Cyclin D1和BCL-xl mRNA的表达;相差显微镜下观察细胞形态学;ELISA法检测上清液中SIL-6R的表达;免疫荧光法检测细胞膜上GP130的表达;Western blot检测细胞中STAT-3、Cyclin D1、BCL-xl蛋白表达。结果实验组的MSCs呈现类似胶质瘤细胞样的形态;细胞中GP130、STAT-3、Cyclin D1和BCL-xl mRNA的表达水平和上清液中SIL-6R的表达水平明显高于阴性对照组和空白组(P<0.05);实验组大部分细胞及阳性对照组的细胞膜上表达GP130蛋白,分别达到93%±5%和95%±5%,显著高于阴性对照组及空白组的0%(P<0.01),细胞中STAT-3、Cyclin D1和BCL-xl的蛋白表达水平高于阴性对照组和空白组(P<0.05)。结论 MSCs的恶性转变与SIL-6R/GP130的过度表达和激活存在一定的相关性,但其在MSCs瘤向转变中的作用及机制有待进一步研究。; 崔向荣朱静田杰邓兵李娅莎白璐; 关键词：骨髓间充质干细胞 SIL-6R GP130

骨髓间充质干细胞在肿瘤微环境中发生瘤性转化研究: 骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)具有多项分化潜能和自我更新能力等特质,广泛应用于组织细胞的替代治疗,有望成为肿瘤靶向治疗的载体,因此MSCs的安全使用是一个至关重要的问题。本文将...; 张春敏白璐崔向荣燕莎崔建邦尹耐靖朱静; 关键词：MSCS 肿瘤微环境

STAT3特异性抑制剂STA-21对乳腺癌MCF-7B细胞增殖及凋亡的影响: 2013年; 目的:探讨信号传导与转录活化因子3(signal transducers and activators of transcription 3,STAT3)特异性抑制剂STA-21对乳腺癌MCF-7B细胞增殖及凋亡的影响。方法:空白组为单独培养MCF-7B细胞,实验组采用不同浓度STA-21作用于乳腺癌MCF-7B细胞后,用MTT法观察STA-21对MCF-7B细胞生长抑制的作用;流式细胞仪检测细胞周期及凋亡;Westernblot检测MCF-7B细胞P-STAT3、STAT3、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、Bcl-xl蛋白的表达。结果:MCF-7B细胞经各浓度STA-21(10、30、50μmol/L)作用后,其细胞增殖的抑制率及细胞凋亡率较空白组明显增加(P=0.000);流式细胞仪检测发现STA-21可导致MCF-7B细胞阻滞于G1期;Western blot结果显示与空白组相比,STA-21可降低MCF-7B细胞P-STAT3、CyclinD1、Bcl-xl蛋白的表达(P=0.000),但对STAT3蛋白的表达基本无影响(P=0.367)。结论:STA-21可在一定程度上抑制MCF-7B细胞的增殖及促进凋亡,其作用机制可能与抑制STAT3活性有关。; 白璐朱静田杰崔向荣张春敏尹耐靖

骨髓间充质干细胞在C6脑胶质瘤细胞微环境中瘤性转化的生物学分析被引量：3: 2014年; 目的:探讨骨髓间充质干细胞(bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BMSCs)在C6脑胶质瘤细胞微环境中是否发生了生物学特性的改变。方法:全骨髓贴壁筛选法分离培养SD大鼠BMSCs,免疫荧光(immunofluorescence,IF)法检测BMSCs表面标志分子CD90+、CD105+、CD45-;活细胞荧光染料CM-Dil标记BMSCs(CM-Dil+BMSCs),流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测标记效率,台盼蓝染色法连续监测BMSCs死亡率;CM-Dil+BMSCs与C6脑胶质瘤细胞直接接触共培养为直接共培养组,BMSCs与C6脑胶质瘤细胞非接触共培养为间接共培养组,阳性对照组为C6脑胶质瘤细胞单独培养,阴性对照组为BMSCs单独培养,培养7 d后,IF法检测各组酸性胶质纤维蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)、CD90、CD105表达情况;FCM分选实验组CM-dil+BMSCs和C6脑胶质瘤细胞,实时荧光定量聚合酶链反应(real time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测各组GFAP、PTEN、Bcl-xl、CyclinD1、CD90、CD105基因的表达。结果:①培养至第3代的BMSCs 90%以上表达CD90、CD105且不表达CD45;②IF结果显示直接共培养组、间接共培养组BMSCs细胞表达GFAP水平较阴性对照组BMSCs均增高。③RT-qPCR结果显示直接共培养组、间接共培养组BMSCs细胞GFAP、PTEN、Bcl-xl、CyclinD1基因表达水平较阴性对照组BMSCs明显增高(P<0.05),且直接共培养组与间接共培养组比较无明显差异(P>0.05);同时,直接共培养组、间接共培养组BMSCs的CD90、CD105基因表达水平较阴性对照组BMSCs显著降低(P<0.05)。结论:BMSCs在C6脑胶质瘤细胞微环境中存在潜在瘤性转化的倾向。; 张春敏朱静燕莎崔建邦; 关键词：骨髓间充质干细胞

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国家自然科学基金(31140035)

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