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国家科技重大专项(2008ZX10404)

作品数：1 被引量：0H指数：0
相关作者：董海艳楼永良丁威严杰薛峰更多>>
相关机构：浙江大学温州医学院更多>>
发文基金：浙江省科技厅国际合作项目国家科技重大专项更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇问号钩端螺旋...
  • 1篇螺旋体
  • 1篇免疫
  • 1篇免疫保护
  • 1篇免疫保护性
  • 1篇免疫学
  • 1篇免疫学鉴定
  • 1篇免疫原性
  • 1篇基因
  • 1篇基因分
  • 1篇基因分析
  • 1篇钩端螺旋体
  • 1篇OMPA

机构

  • 1篇温州医学院
  • 1篇浙江大学

作者

  • 1篇薛峰
  • 1篇严杰
  • 1篇丁威
  • 1篇楼永良
  • 1篇董海艳

传媒

  • 1篇中华微生物学...

年份

  • 1篇2009
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
问号钩端螺旋体ompA基因分析及其重组表达产物的免疫学鉴定
2009年
目的了解我国15群15株问号钩端螺旋体（简称问号钩体）参考标准株携带ompA基因情况，重组表达OmpA（rOmpA）并鉴定rOmpA的免疫原性和免疫保护性。方法采用酚．氯仿法提取问号钩体基因组DNA，PCR扩增全长ompA基因，T—A克隆后测序。构建问号钩体黄疸出血群赖型56601株ompA基因的原核表达系统，采用SDS—PAGE及Bio—Rad凝胶图像分析系统检测rOmpA表达情况及其产量。rOmpA免疫家兔以获得抗血清，采用免疫扩散试验检测抗血清效价。采用Western blot检测rOmpA与其抗血清和问号钩体56601株全菌抗血清的免疫反应性，显微镜凝集试验（MAT）检测rOmpA抗血清对15株问号钩体的交叉凝集情况。分别采用问号钩体黏附J774A．1细胞模型和豚鼠感染模型，了解rOmpA兔抗血清黏附阻断及rOmpA免疫保护作用。结果15株问号钩体均含有序列保守的ompA基因，双曲钩体Patoc Ⅰ株则否。rOmpA表达量约占细菌总蛋白的20％。rOmpA能诱导家兔产生抗体，其抗血清免疫扩散效价为1：4。兔抗血清及问号钩体56601株全菌抗血清均能与rOmpA产生阳性Western blot信号。rOmpA抗血清对15株问号钩体的MAT效价为1：20～1：320。1：10～1：160稀释的rOmpA抗血清均能阻断问号钩体黏附J774A．1细胞，100μg和200μgrOmpA对豚鼠的免疫保护率分别为50．0％和75．0％。结论ompA基因仅存在于不同血清群致病性问号钩体基因组中。rOmpA具有较好的抗原性，多种免疫学方法检测显示，有可能作为通用型问号钩体基因工程疫苗的候选抗原。
丁威董海艳薛峰严杰楼永良
关键词：问号钩端螺旋体免疫原性免疫保护性
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