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国家自然科学基金(39800167)
国家自然科学基金(39800167) 作品数:3 被引量:6 H指数:1 相关作者: 孙昱昭 洪晶 刘经纬 彭荣梅 更多>> 相关机构: 中国医科大学附属第一医院 北京大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
视网膜色素上皮细胞吞噬功能与信号转导系统的关系 2004年 视网膜色素变性(RP)是一种严重的致盲性眼病,其确切病因不明。除了遗传因素外,近年的研究表明,视网膜色素上皮(RPE)细胞吞噬功能异常是导致视觉功能障碍的主要原因。本文简单介绍视网膜色素上皮细胞特异性吞噬功能,详细分析了IP3、PKC、cAMP、cGMP、PTK及Ca2+对RPE细胞吞噬的调节作用,综述了RP发病机制中涉及RPE细胞吞噬功能与信号转导系统的研究进展。 孙昱昭 洪晶关键词:信号转导系统 RPE 细胞吞噬 致盲性眼病 传代后视网膜色素上皮细胞MERTK基因表达变化的研究(英文) 被引量:1 2013年 目的:检测传代后的视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelial,RPE)MERTK基因表达的变化,明确传代的异体RPE移植的可行性。方法:离体培养原代的人视网膜色素上皮细胞,将原代细胞以1∶3比例进行传代至第6代,以SYBRGreen I real time RT-PCR方法检测不同传代数的RPE细胞MERTK基因表达的水平,采用2-ΔΔCT方法计算定量PCR的数值进而比较各代MERTK基因表达的的变化。结果:原代及传代的RPE细胞均表达MERTK基因。第二代RPE细胞MERTK基因表达水平与原代相同,第3~6代RPE细胞MERTK基因表达水平均明显低于原代。结论:传代的RPE细胞可以作为异体视网膜色素上皮细胞移植的细胞来源,但以第二代的RPE细胞为最佳选择。 孙昱昭 彭荣梅 刘经纬 洪晶关键词:视网膜色素上皮 传代 人视网膜色素上皮细胞吞噬过程中环磷酸腺苷及蛋白激酶C的改变 被引量:5 2004年 目的 研究人视网膜色素上皮 (HRPE)细胞特异性及非特异性吞噬过程中环磷酸腺苷(cAMP)浓度及蛋白激酶C(PKC)活性的变化 ,探讨cAMP及PKC在HRPE的吞噬功能中所起的作用。方法 用 1× 10 7个 /ml视杆细胞外节膜盘 (ROS)及乳胶微球 (LB)于 37℃孵育培养的正常HRPE细胞 ,在孵育的不同时间 (5min至 4 8h)终止吞噬反应。用双重荧光标记法检测HRPE细胞吞噬动力学。用扫描及透射电镜证明HRPE细胞对LB及ROS的结合与吞噬作用。分别用12 5I cAMP放射免疫试剂盒及液闪记数γ 3 2 P放射活性法检测相应时间点的HRPE细胞特异性及非特异性吞噬时的cAMP浓度及PKC活性。结果 HRPE细胞特异性吞噬过程中 ,孵育 15min时ROS结合于HRPE细胞表面 ,此时cAMP浓度开始降低 ;胞质及胞膜PKC活性的降低早于cAMP ,发生在孵育 5min时 ,但二者均在孵育2 4h达到最低值。在非特异性吞噬过程中 ,HRPE细胞结合LB发生在孵育 90min ,在孵育的 12h内cAMP浓度无明显变化 (P >0 .0 5 ) ,12~ 4 8hcAMP浓度降低 ;胞质及胞膜PKC活性在孵育的 5min至4 8h时间内 ,与对照组比较 ,差异均无显著意义 (P >0 .0 5 )。结论 cAMP及PKC对HRPE细胞特异性吞噬吞入过程的维持十分重要 ,但不参与非特异性吞噬的直接调节。并且 ,HRPE细胞特异性吞噬过程伴随着cAMP? 孙昱昭 洪晶关键词:人视网膜色素上皮细胞 环磷酸腺苷 蛋白激酶C