日本文部科学省科学研究费补助金资助项目(18390324)
- 作品数:8 被引量:17H指数:3
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- 脑蛋白水解物注射液改善阿尔茨海默病认知功能的机理探究被引量:3
- 2010年
- 目的通过研究脑蛋白水解物注射液(CL)对体外培养神经祖细胞(NPCs)增殖和分化的影响,探讨其改善阿尔茨海默病认知功能的机理。方法从成年大鼠脑不同区域原代及传代培养神经祖细胞,以乳酸脱氢酶(LDH)分析法测定细胞活性,以免疫荧光染色法鉴定细胞性质,以蛋白印迹转移(Western blot)法检测蛋白质表达变化。结果CL处置明显增加神经祖细胞数及MAP2a/b、SynapsinⅠ表达水平。结论CL促进神经祖细胞增殖和向神经元分化,可能是其改善阿尔茨海默病认知功能的机理之一。
- 于秀军楯林義孝郭力
- 关键词:脑蛋白水解物注射液阿尔茨海默病神经祖细胞增殖分化
- 抗氧化剂在分离培养成年大鼠海马神经祖细胞中的作用
- 2009年
- 目的探讨抗氧化剂在分离培养成年大鼠海马NG2蛋白聚糖阳性神经祖细胞(NG2细胞)中的重要作用。方法根据文献从成年大鼠海马分离培养NG2细胞的方法,以B27-AO添加剂(去除B27添加剂中所有抗氧化剂的衍生物)替代原培养液中的B27添加剂,并将四种抗氧化剂单独或组合加入B27-AO培养环境,行海马细胞原代及传代培养。以乳酸脱氢酶(LDH)分析法测定细胞活性;以免疫荧光双重染色法鉴定细胞性质。结果B27-AO添加剂未能分离或传代大部分NG2细胞,而过氧化氢酶(Catalase)能挽救大部分在B27-AO培养条件下死亡的细胞。结论抗氧化剂在NG2细胞分离培养过程中是必不可少的。
- 于秀军楯林義孝郭力
- 关键词:抗氧化剂氧化应激
- 氨基酸对NG2蛋白聚糖阳性神经祖细胞增殖的影响被引量:5
- 2010年
- 目的探讨不同种类氨基酸对神经胶质抗原2(NG2)蛋白聚糖阳性神经祖细胞(NG2细胞)增殖的作用。方法从成年大鼠脑不同区域分离培养NG2细胞,以0.1-0.5mmol/L浓度不同种类氨基酸干预细胞72小时,以乳酸脱氢酶(LDH)分析法测定细胞活性。结果 0.3mmol/L谷氨酸和天冬氨酸显著增加不同脑区来源NG2细胞数(p<0.001)。结论高浓度兴奋性氨基酸(EAAs)能促进NG2细胞的增殖。
- 于秀军楯林義孝郭力
- 关键词:氨基酸神经祖细胞增殖
- 脑蛋白水解物注射液对NG2蛋白聚糖阳性神经祖细胞增殖的影响被引量:2
- 2009年
- 目的探讨脑蛋白水解物注射液(Cerebrolysin,CL)对NG2蛋白聚糖阳性神经祖细胞(NG2细胞)增殖的作用。方法根据文献从成年大鼠海马原代及传代培养NG2细胞,以免疫荧光染色法鉴定细胞性质,以乳酸脱氢酶(LDH)分析法测定细胞活性,以原位缺口末端标记技术(即TUNEL法)观察细胞凋亡,5'-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)掺入法鉴定新生细胞。结果CL处置明显增加NG2细胞数,并显著减少TUNEL阳性细胞数,但对BrdU阳性细胞数无明显影响。结论CL能抑制NG2细胞凋亡,从而促进NG2细胞的增殖。
- 于秀军楯林義孝郭力
- 关键词:脑蛋白水解物注射液神经祖细胞增殖凋亡
- 从成年大鼠海马分离培养NG2蛋白聚糖阳性神经祖细胞的新方法被引量:3
- 2009年
- 目的探索建立从成年大鼠海马分离培养高纯度NG2蛋白聚糖阳性神经祖细胞(NG2细胞)的简便方法。方法从成年雌性大鼠解剖出海马,经木瓜蛋白酶消化和Optiprep不连续梯度离心,从离心产生的组织细胞密集带,用含B27添加剂和碱性成纤维细胞生长因子2(FGF2)的NeurobasalA培养液,分离培养出增殖性细胞,免疫荧光双重染色法鉴定细胞性质。结果应用上述方法,可从成年大鼠海马简便地培养出纯度大于90%的NG2细胞,此细胞具有神经干细胞(NSCs)潜能,在FGF2作用下可迅速增殖并传代。结论此方法在纯度、产出率和简便性等方面改进了成体NG2细胞的原代培养技术。
- 于秀军楯林義孝郭力
- 关键词:海马NG2原代培养神经祖细胞
- 从成年大鼠中枢神经系统不同区域分离NG2蛋白聚糖阳性神经祖细胞被引量:4
- 2009年
- 目的探索从成年大鼠中枢神经系统(CNS)不同区域是否能分离培养出NG2蛋白聚糖阳性神经祖细胞(NG2细胞)。方法从成年雌性大鼠解剖出CNS的9个不同区域,分别经木瓜蛋白酶消化和Optiprep不连续梯度离心,从离心产生的组织细胞密集带,用含B27添加剂和碱性成纤维细胞生长因子2(FGF2)的NeurobasalA培养液,分离培养出增殖性细胞,再以免疫荧光双重染色法鉴定细胞性质。结果应用上述方法,可从成年大鼠CNS的9个不同区域分离出具神经干细胞(NSCs)潜能的NG2细胞。结论成年大鼠CNS的非神经发生区域同样存在NSCs样细胞,且可通过适当方法体外培养。
- 于秀军李震中郭力楯林義孝
- 关键词:中枢神经系统原代培养神经祖细胞
- 血小板源生长因子和脑源性神经营养因子促进NG2蛋白聚糖阳性神经祖细胞向神经元分化
- 2009年
- 目的探讨血小板源生长因子(PDGF)和脑源性神经营养因子(BDNF)对NG2蛋白聚糖阳性神经祖细胞(NG2细胞)分化的作用。方法根据文献方法从成年大鼠海马原代培养NG2细胞,7d后添加10~40ng/mlPDGF和/或BDNF继续培养7d,以免疫荧光双重染色法鉴定细胞性质。结果10ng/mlPDGF和BDNF联合处置明显增加Map2a/b、GAD67和GABA表达水平。结论PDGF和BDNF联合处置促进NG2细胞向神经元(特别是GABA能抑制性中间神经元)分化。
- 于秀军楯林義孝郭力
- 关键词:血小板源生长因子脑源性神经营养因子神经祖细胞分化
- 脑蛋白水解物注射液对NG2蛋白聚糖阳性神经祖细胞分化的影响被引量:1
- 2010年
- 目的探讨脑蛋白水解物注射液(Cerebrolysin,CL)对NG2蛋白聚糖阳性神经祖细胞(NG2细胞)分化的作用。方法根据文献从成年大鼠海马原代培养NG2细胞,7天后添加10μl/ml(0.4mg/ml)CL继续培养7天,以免疫荧光双重染色法鉴定细胞性质。结果10μl/mlCL处置明显增加NG2细胞中Map2a/b、SynapsinI、VGAD和GABA表达水平。结论CL促进NG2细胞向神经元(特别是GABA能抑制性中间神经元)分化。
- 于秀军楯林義孝郭力
- 关键词:脑蛋白水解物注射液神经祖细胞分化神经元