国家教育部博士点基金(20040286037)
- 作品数：10 被引量：75H指数：4
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- 应用硝普钠促进经门静脉移植的骨髓间充质干细胞在肝内弥散分布被引量：1
- 2007年
- 目的探讨硝普钠是否可促进经门静脉移植的骨髓间充质干细胞（MSCs）在肝内弥散分布。方法分离SD大鼠的骨髓MSCs，进行培养、传代，流式细胞仪鉴定MSCs表面标记，以Fe2O3-PLL标记供移植的MSCs。以彩色多普勒超声检查大鼠注射硝普钠后10～20min时门静脉内径及血流速度变化，并计算其血流量。受者（SD大鼠）背部皮下注射四氯化碳，制成肝损伤模型，将模型随机分为实验组和对照组，实验组经门静脉注射以Fe2O3-PLL标记的MSCs悬液0．5ml及含硝普钠的生理盐水（硝普纳的注入量为24nmol／100g），对照组仅注射Fe2O3-PLL标记的MSCs悬液0．5ml。分别于MSCs注射前及注射后3h、1周、2周、4周行磁共振扫描，测定肝脏信噪比（SNR）。最后1次磁共振扫描后，处死全部受者，取各叶肝组织，行HE染色和普鲁士蓝染色，进行组织学观察。结果分离获得的MSCs经培养、传代，高表达CD29（99．88％）和CD90（99．84％），CD45阳性细胞极少（0.130）。注射硝普钠后10-20min，大鼠门静脉内径明显扩张（P〈0.01），门静脉血流量明显增多（P〈0.01）。移植后随着时间延长，两组肝脏SNR均逐渐增高，实验组移植后3h、1周、2周时的肝脏SNR明显低于对照组（P〈0.05），至移植后4周，两组肝脏SNR的差异无统计学意义；两组移植后3h、1周、2周时的肝脏SNR均明显低于移植前（P〈0.05）。至移植后4周，肝脏SNR恢复至移植前水平。实验组肝组织普鲁士蓝染色阳性细胞多于对照组（P〈0.01）。结论门静脉注入硝普钠后，其分支内径扩大，血流量增加，在经门静脉移植MSCs的同时注入硝普钠可促进MSCs向末梢分支与血窦弥散分布。
- 陆海华滕皋军居胜红李爱梅王玲
- 关键词：间质干细胞移植硝普钠磁共振成像
- 磁共振活体监测大鼠间充质干细胞移植治疗急性肾功能衰竭被引量：1
- 2008年
- 目的磁共振活体监测移植入急性肾功能衰竭（ARF）大鼠腹主动脉的磁标记间充质干细胞（MSCs）并检测大鼠肾功能及肾脏病理改变。方法磁性纳米粒子体外标记大鼠骨髓MSCs。ARF大鼠分为3组，插导管至腹主动脉，分别移植入标记细胞（10只）；移植入未标记细胞（10只）；灌注等量生理盐水（10只）。移植后0．5h及第1、2、5天应用MRI对移植细胞进行活体示踪，并与肾脏普鲁士蓝染色及CD68抗体染色对照。监测大鼠肾功能恢复及肾脏病理变化情况。结果Fe2O3-PLL可有效标记大鼠MSCs。标记细胞移植后ARF大鼠肾脏皮质区T2＊WI信号强度明显下降，持续到移植后第5天。组织学分析见标记细胞分布于肾皮质肾小球内。细胞移植组肾功能优于对照组，肾损伤程度明显轻于对照组。结论临床应用型1．5T磁共振仪可活体监测移植入ARF大鼠腹主动脉的MSCs，移植后早期细胞分布于肾皮质肾小球内；MSCs移植后早期可促进ARF恢复。
- 孙军辉滕皋军马占龙安艳丽麦筱莉居胜红余辉
- 关键词：干细胞磁共振成像细胞移植
- 小鼠骨髓间充质干细胞体内定向诱导分化与治疗肝功能损伤的实验研究被引量：11
- 2007年
- 目的 观察小鼠骨髓间充质干细胞（MSC）在肝脏特定微环境下是否向具肝细胞表型与功能的细胞横向分化，并探讨其治疗肝功能损伤的可行性。方法 20只裸小鼠，随机分为4组，每组5只：A组：CCl4与橄榄油1：1混合，按1ml／kg腹腔注射，每周2次。1周后经尾静脉移植1×10^6GFP阳性MSC，术后继续注射CCl4，每周2次；B组：CCl4注射同A组，经尾静脉注入等量生理盐水；C组：正常小鼠，细胞移植同A组；D组：正常对照。术后4周处死全部受试动物，血清检测肝功能，HE、Masson染色行组织学观察，双荧光染色确认GFP阳性细胞并观察其是否表达肝细胞特异性蛋白。结果 A、B组受体肝纤维组织增生显示肝功能损伤模型制作成功，二组胶原分布百分比差异并无统计学意义（10．5±1．5vs12．7±1．6，t=-2．238，P〉0．05）。A组镜下可见GFP阳性细胞主要分布于汇管区及小叶间隔周围，部分同时表达白蛋白（35％±7％）；B、C、D组镜下均未见绿色荧光细胞。A组白蛋白水平明显高于B组（24．4g／L±3．3g／Lvs18．6g／L±2．9g／L，P〈0．05），两组血清丙氨酸转氨酶（ALT）水平差异有统计学意义（121U／L±21U／Lvs192U／L±29U／L，P〈0．05）。结论 持续肝功能损伤可以有效诱导MSC向肝迁移增殖，部分MSC在肝细胞持续损伤的微环境下有向肝样细胞横向分化的潜能，提示MSC移植可以在一定程度上修复受损肝功能。
- 陆海华滕皋军居胜红孙军辉李爱梅张爱凤
- 关键词：干细胞细胞分化
- 肾功能衰竭大鼠超顺磁性氧化铁标记骨髓间充质干细胞肾脏移植MR活体示踪的研究被引量：22
- 2006年
- 目的应用磁性氧化铁纳米粒子和多聚左旋赖氨酸(poly-L-lysine,PLL)的偶联物Fe2O3-PLL标记大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs),MR活体示踪经肾动脉移植入肾功能衰竭(简称肾衰)大鼠肾脏的标记细胞。方法制备Fe2O3-PLL,分离、纯化并培养大鼠骨髓MSCs,Fe2O3-PLL标记细胞,普鲁士蓝染色显示细胞内铁。肌内注射甘油所致肾衰的大鼠分为2组,分别经左肾动脉移植入标记细胞(6只)和未标记细胞(5只),移植后即刻及第1、3、5、8天应用MRI对移植细胞进行活体示踪,并与肾脏组织切片普鲁士蓝染色和HE染色对照。结果MSCs的Fe2O3-PLL标记率近100%,普鲁士蓝染色显示蓝色铁颗粒位于MSCs胞质内。标记细胞移植后肾衰大鼠肾脏皮质区信号强度明显下降,T2WI信号改变最明显,而肾髓质及肾盂信号较细胞移植前无明显变化,信号改变随着时间的延长逐渐减轻一直持续到移植后第8天。组织学分析见绝大多数标记细胞分布于肾皮质肾小球内,与MRI信号改变区域基本一致。未标记细胞移植后未见肾脏信号改变。结论Fe2O3-PLL可以有效标记大鼠骨髓MSCs,临床应用型1.5T磁共振仪可对经肾动脉移植入肾衰大鼠肾脏的标记细胞进行初步活体示踪。
- 孙军辉滕皋军居胜红马占龙麦筱莉张宇马明
- 关键词：细胞移植肾功能衰竭
