卫生部临床学科重点项目(无)
- 作品数：4 被引量：17H指数：3
- 相关作者：龚建平陶德定肖徽胡俊波张鹏更多>>
- 相关机构：华中科技大学更多>>
- 发文基金：卫生部临床学科重点项目国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 线粒体融合素-2对裸鼠成瘤性及增殖、转移的影响被引量：1
- 2009年
- 目的 观察线粒体融合素（mfn）-2对裸鼠成瘤性及增殖瘤的增殖、转移的影响。方法裸鼠共分为3组：实验组、空载体对照组、空白对照组，分别将3组MCF-7细胞异种移植到无胸腺小鼠体内，建立裸鼠人乳腺癌移植瘤模型，比较3组裸鼠之间肿瘤的大小和重量，逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测3组肿瘤组织mfn2的表达，免疫组织化学半定量检测核增殖抗原（Ki-67）、血管内皮生长因子（VEGF）的表达。结果实验组、空载体对照组、空白对照组3组肿瘤瘤体质量（单位：g）分别为1．78±0．13、2．84±0．16、2．77±0．12，实验组裸鼠肿瘤重量明显低于对照组（P〈0．05），实验组瘤体的体积与两对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05），实验组mfn2基因高表达（P〈0．05），两对照组低表达，两对照组之间差异无统计学意义（P〉0．05），实验组与两对照组比较，实验组Ki-67的表达升高，而VEGF的表达明显降低（P〈0．05）。结论mfn2基因可明显抑制人乳腺癌成瘤，对人乳腺癌裸鼠移植成瘤后的增殖和转移能力有影响。
- 夏耘龚建平吴亚群
- 关键词：线粒体融合素基因-2成瘤基因治疗
- 紫杉醇诱导人类原代胃癌细胞凋亡及其与细胞周期关系的研究被引量：4
- 2008年
- 目的探讨紫杉醇作用于人的胃癌实体瘤的机制,为紫杉醇应用于胃癌化疗提供相应的实验室依据。方法应用流式细胞术的AnnexinⅤ/PI技术检测紫杉醇诱导的37例人胃癌原代细胞凋亡;Sub-G1方法分析细胞周期及检测晚期凋亡;琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡;Confocal检测凋亡发生的形态。结果AnnexinⅤ/PI法和Sub-G1法均能检测到不同浓度紫杉醇在不同时间诱导的胃癌细胞凋亡,同一浓度在不同时间诱导的胃癌细胞凋亡与对照相比差异均有显著性意义(均P<0.01);周期分布图可发现紫杉醇作用12h出现明显的G1期细胞减少,而S和G2/M期细胞增多;25.50μg/ml药物作用12和24h琼脂糖凝胶电泳均可见典型的梯形改变;共聚焦显微成像可见紫杉醇诱导的人胃癌细胞的典型早期和晚期凋亡图像。结论紫杉醇能诱导人胃癌细胞凋亡可能是其对胃癌化疗有效的机制之一。
- 姚静吴剑宏张鹏陶德定肖徽胡俊波龚建平
- 关键词：紫杉醇胃癌流式细胞术
- 香烟烟雾提取物对人呼吸道上皮细胞DNA损伤和凋亡的影响被引量：9
- 2006年
- 背景与目的:香烟烟雾可以致多种细胞发生DNA损伤已有报道证实。本研究旨在进一步阐明香烟烟雾提取物(cigarettesmokeextract,CSE)作用于正常人类支气管上皮细胞系(normalhumanbronchialepithelialcells,NHBE)和肺腺癌细胞系SPC-A1后引起的DNA损伤和凋亡情况。方法:不同浓度的CSE作用于NHBE和SPC-A1细胞,用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测两种细胞活性。荧光标记的磷酸化H2AX组蛋白(γ-H2AX)抗体特异性标记细胞核内DNA双链断裂(DNAdouble-strandbreaks,DSBs)处的γ-H2AX,然后用流式细胞仪定量检测并分析DNA损伤。用免疫印迹检测γ-H2AX表达。同时,亚G1峰法(SubG1peak)和AnnexinⅤ-FITC/碘化丙啶双染色流式细胞术检测CSE诱导的细胞凋亡。用激光共聚焦显微镜观察细胞损伤和凋亡形态学变化。结果:MTT结果显示,随CSE浓度和作用时间增加,细胞活性均逐渐降低。CSE可引起细胞DNA双链断裂,γ-H2AX最大值在作用后4h左右,然后逐渐降低。DNA损伤后平均12h可以出现凋亡。另外,激光共聚焦显微镜观察到两种细胞内的γ-H2AX量在细胞受到CSE刺激后快速大量的积聚,呈现典型细胞损伤的形态学变化,较为明显的凋亡形态学特征4h后方可出现。结论:CSE能直接引起NHBE和SPC-A1细胞的DNA损伤和凋亡,且存在着浓度和时间依赖关系。
- 付强成静韩中博李小兰陈小燕张鹏肖徽陶德定胡俊波龚建平
- 关键词：Γ-H2AX凋亡
- 线粒体融合素基因-2对乳腺癌细胞增殖的影响及其机制被引量：3
- 2008年
- 目的观察外源性线粒体融合素基因-2（Mfn2）对乳腺癌细胞（MCF-7）增殖的影响，探讨其抑制乳腺癌细胞产生增殖的机制。方法将含有Mfn2cDNA的质粒在阳离子聚合物的介导下在体外转染MCF-7，蛋白印记法（Western blot）检测绿色荧光蛋白（GFP）、p21^wafl、CDK2蛋白的表达，细胞计数测定Mfn2对MCF-7细胞增殖的影响，DNA直方图分析法测定Mfn2对MCF-7周期分布的影响，用Cyclins／DNA双参数流式细胞术对CyclinA进行标记，Cellquest软件分析。结果转染Mfn2基因的MCF-7细胞可以稳定高表达GFP蛋白；细胞计数测定表明转染Mfn2cDNA后，MCF-7细胞增殖明显受抑，DNA直方图分析法测定显示细胞停滞于S期；转染质粒组S期细胞占42．70％，转染空质粒组和空白对照组分别为17．15％、19．58％（P〈0．05）；用Cyclins／DNA双参数流式细胞术检测转染质粒组CyclinA较对照两组明显升高；Westernblot显示转染质粒组p21高表达，磷酸化CDK2低表达。结论转染Mfn2基因可以明显抑制MCF-7细胞的增殖，并使细胞停滞于S期。
- 夏耘吴亚群龙浩成陶德定龚建平裘法祖
- 关键词：乳腺癌增殖
